- •Часть 1
- •Предисловие
- •Глава 1 физиология крови
- •1.1. КРовь как внутренняя среда организма
- •1.1.1. Определение осмотической резистентности эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам
- •1.1.2. Буферные системы крови
- •2. Заполнение счетной камеры
- •1.2. ФорменНые элементы крови
- •1.2.1.1. Подсчет количества эритроцитов в счетной камере с использованием меланжеров для разведения крови
- •1. Разведение крови
- •3. Подсчет эритроцитов
- •1.2.1.2. Подсчет эритроцитов с использованием пробирочного
- •1.2.1.3. Подсчет лейкоцитов в счетной камере
- •1.2.1.4. Подсчет лейкоцитов с использованием пробирочного
- •1.2.2. Определение количества гемоглобина в крови
- •1.2.3. Вычисление цветового показателя
- •1.3. Плазма крови. Антигенные свойства крови
- •1.3.1. Определение скорости оседания эритроцитов (соэ)
- •Определение группы крови
- •1.3.2. Определение группы крови системы аво
- •1.3.2.1. Определение группы крови с помощью стандартных
- •1.3.2.2. Определение группы крови системы аво
- •1.3.3. Определение группы крови системы резус
- •1.3.3.1. Определение группы крови человека системы резус
- •1.3.3.2. Определение группы крови системы резус
- •1.4. Свойства плазмы. МЕханизмы свертывания крови
- •Получение результатов
- •Глава 2 общие свойства возбудимых тканей
- •2.1. Структура и функция рефлекторной дуги
- •2.1.1. Рецептивное поле спинномозгового рефлекса
- •2.1.2. Анализ рефлекторной дуги
- •1. Проверка роли рецепторов в возникновении рефлекса
- •2.Функциональное нарушение проводимости в афферентных и эфферентных нервных волокнах рефлекторной дуги
- •3. Нарушение проведения в центральном звене рефлекторной дуги
- •2.2. Возбудимость и возбуждение
- •2.2.1. Сравнение возбудимости нерва и мышцы. Прямое и
- •2.2.2. Виды раздражителей
- •2.2.3. Влияние ионного сдвига на возбудимость мышцы
- •2.3. Механизм мышечного сокращения
- •Кривая одиночного мышечного сокращения, образование
- •2.3.2. Локализация утомления в нервно-мышечном препарате
- •2.3.3. Нарушение передачи возбуждения в нервно-мышечном синапсе
- •2.4. Механизмы торможения в центральной нервной системе
- •2.4.1. Определение времени спинномозгового рефлекса
- •2.4.2 Центральное торможение спинномозговых рефлексов. Опыт
- •2.4.3. Торможение рефлексов спинного мозга. Опыт Гольца
- •2.4.4.Влияние стрихнина на центральную нервную систему
- •Глава 3 физиология центральной нервной системы
- •3.1. Свойства нервных центров
- •3.1.1. Иррадиация в спинном мозге
- •3.1.2. Суммация возбуждения в нервных центрах
- •3.1.3. Рефлекторное последействие
- •3.1.4. Сопряжённое торможение сгибательного рефлекса
- •3.1.5. Влияние функционального состояния цнс на рефлекторную деятельность спинного мозга
- •Глава 4 физиология сердца
- •4.1. Сердечный цикл. Анализ проводящей системы
- •4.1.1. Регистрация сокращений сердца лягушки
- •4.1.2. Влияние температуры на автоматизм синусного узла
- •4.1.3. Изучение степени автоматии различных отделов сердца
- •4.1.4. Определение длительности сердечного цикла у человека
- •4.2. Свойства сердечной мышцы
- •4.2.1. Особенности возбудимости сердца и экстрасистола
- •4.2.2. Электрокардиография
- •4.3. Рефлекторная регуляция минутного объема сердца
- •4.3.1. Влияние раздражения смешанного вагосимпатического нерва
- •4.3.2. Влияние адреналина и ацетилхолина на работу сердца
- •4.3.3. Рефлекс на сердце с органов брюшной полости. Опыт Гольца
- •4.3.4. Рефлекс на сердце с глазного яблока. Глазосердечный
- •4.3.5. Определение вегетативного индекса Кердо
- •4.3.6. Определение функционального состояния вегетативной
- •4.3.7. Реакция сердца на небольшую физическую нагрузку
- •4.3.8. Определение стрессоустойчивости сердечно-сосудистой
- •Глава 5 физиология сосудистой системы
- •5.1. Основные параметры системы кровообращения. Капиллярное ровообращение
- •5.1.1. Измерение артериального давления методом Короткова
- •Четыре наиболее характерных типа реакций сердечно-сосудистой системы на нагрузку
- •Кровообращение в капиллярах
- •5.1.2.1. Кровообращение в плавательной перепонке
- •5.1.2.2. Кровообращение в языке
- •5.2. Регуляция артериального давления
- •5.2.1. Анализ дуги прессорецептивного рефлекса
- •Литература
3. Подсчет эритроцитов
Камеру кладут на предметный столик микроскопа, установленный горизонтально, и приступают к подсчету эритроцитов при малом увеличении микроскопа (объектив 8x, окуляр 10x или 15x). Поле зрения должно быть затемнено диафрагмой и несколько опущенным конденсатором. Подсчитывают эритроциты в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых (всего в 5 x 16 = 80 малых квадратах), расположенных по диагонали. Во избежание двукратного подсчета клеток, лежащих на границах квадратов, руководствуются правилом Егорова. Считают эритроциты, находящиеся внутри квадрата и на его верхней и левой границах.
Подсчитав, таким образом, сумму эритроцитов в 5 больших квадратах (т.е. в 80 малых), находят среднее арифметическое число эритроцитов в одном малом квадрате - Э/80. Зная, что объем пространства камеры над одним малым квадратом равен 1/4000 мм3, умножают найденное число на 4000. Получают число эритроцитов в 1 мкл разведенной крови. Умножив на кратность разведения (200), рассчитывают количество эритроцитов в 1 мкл цельной крови.
Таким образом, формула для вычисления количества эритроцитов следующая:
Х = (А 4000 200) / 80,
где Х - искомое число эритроцитов в 1 мкл крови;
А - число эритроцитов в 80 малых квадратах;
1/4000 мм3 - объем разведенной крови над одним малым
квадратом;
80 - число малых квадратов;
200 - степень разведения.
Полученное число эритроцитов умножают на 106 и получают содержание клеток в 1 литре крови.
Ошибка метода составляет 2-3%.
Возможные источники ошибок при подсчете эритроцитов:
Образование сгустка во время взятия и разведения крови.
Несоблюдение условий, обеспечивающих должную высоту камеры (неправильный выбор покровного стекла и плохое его прижатие к камере).
Проведение подсчета сразу после заполнения камеры, когда клетки еще не распределились равномерно и не осели.
Попадание воздуха в капилляр с кровью.
Оформление протокола. Указать, чем разводится кровь для подсчета эритроцитов и почему. Написать формулу подсчета эритроцитов, провести ее анализ – описать значение всех цифр в формуле. Нарисовать фрагмент сетки Горяева, указать площадь малого квадрата и объем крови над ним. Начертить пять больших квадратов, указать подсчитанное количество эритроцитов в них. Записать нормальные значения количества эритроцитов у мужчин, женщин и новорожденных.
Вывод. Сравнить полученный результат с нормой.
1.2.1.2. Подсчет эритроцитов с использованием пробирочного
метода разведения крови
Цель работы: ознакомиться с методом подсчета эритроцитов.
Объект исследования – кровь человека.
Для работы необходимо: Донорская кровь, химические или серологические пробирки с пробками, капиллярная пипетка от гемометра Сали, градуированная пипетка для отмеривания разводящей жидкости, камера с сеткой Горяева, 3% раствор хлористого натрия (желательно подкрасить красителем типа метиленового синего), микроскоп, вата.
Проведение работы. В чистую пробирку точно отмеривают 4 мл разводящей жидкости и закрывают ее резиновой пробкой. Кровь в количестве 20 мкл набирают до метки в капилляр от гемометра Сали. Осторожно выдувают кровь из капилляра в пробирку и тщательно перемешивают и промывают капилляр разводящей жидкостью; полученное разведение можно приравнять к 1:200. Капиллярную пипетку промывают несколько раз дистиллированной водой.
Заполнение камеры, подсчет эритроцитов, анализ результатов и оформление протокола осуществляют, как указано в работе 3.1.1. в пунктах 2 и 3. Источники ошибок и точность метода такие же, как и в работе 3.1.1.