Оценка результатов бактериологического исследования.

При соответствии полученных результатов по тестированию выделенной культуры с вышеуказанными данными полученный бактериальный штамм признают как бактериальную культуру вида Listeria monocytogenes.

В случае если изучаемая бактериальная культура не типируется как бактерии вида Listeria monocytogenes, возможен вариант повторного использования бактериальной суспензии со средой накопления хранящейся в холодильнике при +4°С.

Общие сроки бактериологического исследования материала в пределах 7 суток.

Для предупреждения прорастания контаминирующеи микрофлоры в среду вносят 0,05% теллурита К либо загрязненный материал засевают в триптозно-фосфатный буль­он с нитрофуразоном (1:40000) с последующим пересевом на фенил-этаноловый агар с 7% лошадиной сывороткой и нитрофуразоном (1:40000).

Серологические исследования. Обычно ставят РСК с листериозным диагностикумом ВНИИВВиМ.

Биологическая проба. Лучше всего использовать белых мышей, иммуносупрессированных кортизоном (4-5 мг в/м за 4ч до заражения); после гибели животного (обычно на 2-6 сут.) производят посев материала из различных органов. Следует помнить, что листерии характерино «холодовое обогащение», и для избежания ошибок в диагностике часть патологического материала следует поместить в стерильные пробирки и хранить в течение 5-10 сут. при температуре 4-6°С, а затем подвергнуть повторному исследо­ванию. Ставят коньюктивальный тест на морских свинках (проба Антона).

Рецепты и способы приготовления питательных сред для выделения листерий

1. Среда с теллуритом калия

(И.А. Бакулов и др. 1970)

К 1 л расплавленного МПА (рН 7.2-7.4) перед разливом в бактериологические чашки добавляют 10 мл 2%-го водно-глицеринового раствора теллурита калия. Добавление к указанной среде 5-10% сыворотки крови крупного рогатого скота улучшает рост листерий.

2. Среда с теллуритом калия и флоромицином или полимиксином

(И.А. Бакулов и др. 1970).

К 1 л расплавленного МПА (рН 7.2-7.4) перед разливом добавляют 10 мл 2%-го водно-глицеринового раствора теллурита калия и 0.3-0.5 мл раствора флоримицина или полимиксина (500 тыс. ед. препарата разводят в 10 мл физиологического раствора).

Цвет колонии на среде с теллуритом калия черный.

Предоставленная далее рецептура NN 3-11 предложена Подкомитетом по таксономии листерий и является унифицированной для всех лабораторий, работающих с данным микроорганизмом.

3. Триптозно-фосфатный бульон (трв).

Триптоза	20.0 мг
Декстроза	2.0 г
Хлорид натрия	5.0 г
Динатрий фосфат	2.5 г
Дистиллированная вода	1000.0 мл

Добавьте ингредиенты к воде. Хорошо смешайте. Когда раствориться, доведите рН до 7.3. Разлейте и стерилизуйте автоклавированием при +121°С в течение 15 мин.

4. Триптозно-фосфатный бульон с полимиксином в

(Бойсен-Мюллер)

Триптоза	20.0 мг
Декстроза	2.0 г
Хлорид натрия	5.0 г
Динатрий фосфат	2.5 г
Дистиллированная вода	1000.0 мл

Добавьте ингредиенты к воде. Размешайте. Когда раствориться, доведите рН до 7.3. Стерилизуйте автоклавированием при +121°С в течение 15 мин. Охладите и добавьте 5.0 г стерильной тиамин-HCl и 3.12 мг полимиксина В к 1 л ТРВ. Перемешайте.