12.3.2. Определение глюкозы в крови с помощью экспресс-анализатора Эксан-г (Литва)

Принцип метода: Е-биосенсор – та же глюкозооксидаза, что и в предыдущей работе. Но, ее не вносят в раствор, а заранее иммобилизуют в геле на пленке = мембране, снабженной резиновым кольцом. Перед началом эксплуатации прибора, мембрану с помощью кольца фиксируют на торце датчика - кислородного электрода Кларка, вмонтированного в проточную измерительную ячейку. Количество продукта реакции – Н₂О₂, эквимолярно не только концентрации глюкозы, но и расходу кислорода в пространстве между мембраной и электродом. Поэтому, возникший на нем электрохимический потенциал, с помощью уравнения Нернста «вшитого» в микросхему, преобразуется в ммоль/л глюкозы и выводится на табло прибора. После ручной или автоматической регистрации показаний, для подготовки прибора к новому циклу работы, измерительную ячейку промывают буферным раствором.

Примечания: 1. В процессе хранения и эксплуатации устройства, иммобилизованный Е неизбежно денатурирует. Поэтому запасные мембраны хранят в холодильнике, с гарантированным временем работы 80 ч, а в конструкции прибора предусмотрены 3 уровня чувствительности.

2. В соответствии с «Инструкцией по эксплуатации анализатора глюкозы «Эксан Г», заливку буферного раствора и заправку мембраны в датчик, до начала занятий проводит лаборант.

3. Также, лаборант включает прибор в электросеть и, после каждого включения, калибрует его с помощью 50 или 20 мкл доз эталонного раствора глюкозы.

Ход работы: 1. Кнопкой «Промывка» на лицевой панели при-бора включить перистальтический насос и, промыть измерительную ячейку буферным раствором. Окончание промывки через 90 с, ограничивает автоматика устройства.

2. Нажать на лицевой панели прибора кнопку «Сброс» и убедиться, что на табло высветились цифры «0.00». Отклонение от «правого нуля» на 2-3 единицы допустимо. Если же высветилось другое –нажать кнопку «Сброс» и повторить п. 1. При высвечивании других цифр и неустойчивости показаний – обратиться к лаборанту или преподавателю.

3. Под контролем лаборанта, из пробирки с образцом цельной крови с антикоагулянтом, набрать в наконечник полуавтоматического дозатора 50 или 20 мкл

4. Ввести наконечник дозатора в коническое отверстие проточной кюветы и, плавно нажав кнопку дозатора до второго упора, внести дозу крови в измерительную ячейку.

5. Не отпуская кнопки, вывести наконечник дозатора из проточной кюветы, отпустить кнопку, сбросить в маркированную тару использованный наконечник и поставить дозатор в штатив.

6. Через 5-10 секунд после введения пробы, появившиеся на табло показания прибора занести в протокол работы.

7. Повторить пп. 1 и 2 данной инструкции и, за время подготовки прибора к новому циклу работы, убрать рабочее место.

8. По окончании работы всех студентов с анализатором, поставить в известность об этом лаборанта.

9. Завершить оформление протокола выводами.

12.3.3. Определение глюкозы в крови с помощью автономного экспресс-измерителя пкг-02-«Сателлит» (Россия)

Принцип метода: Миниатюрный глюкометр работает от внутреннего источника = батарейки напряжением 3 В, управляется с помощью одной кнопки, но зависит от одноразовых электрохимических полосок ПКГЭ-02, изготовленных на основе «сухой химии». Это позволяет применять его в полевых условиях, при чрезвычайных ситуациях, скрининге и оперативном контроле индивидуального пользования. Но, показания прибора должно рассматривать лишь как ориентировочные, требующие подтверждения лабораторным методом и не дают оснований изменять дозировку лекарств без ведома врача. Поэтому можно лишь предполагать, что биосенсор полосок – все та же глюкозооксидаза, иммобилизованная в геле, степень сшитости которого исключает влияние белков и форменных элементов крови. Судя по скорости анализа, химический сигнал преобразуется в электрическую форму, тоже по принципу кислородного электрода Кларка.

Технические характеристики:

1. Диапазон показаний прибора от 1,8 до 35 ммоль/л глюкозы.

2. Объем памяти – 40 последних показаний.

3. Режим хранения и пользования прибором ПКГ-02-«Сателлит», в комплекте с одноразовыми полосками ПКГЭ-02, изложен подробно в прилагаемых к устройству Инструкции и Руководству по эксплуатации.

Противопоказания к применению:

1. Анализ сыворотки, венозной, разведенной, сгущенной или хранившейся крови.

2. Анализ после приема внутрь > 1 г аскорбиновой кислоты и у больных с инфекциями, массивными отеками и злокачественными опухолями.

3. Полоски с просроченным сроком годности или несовпадением их пятизначного кода с кодом, хранящимся в памяти прибора.

Ход работы: 1. Достать из футляра прибор и полоски, разместив их на ровной поверхности.

2. Убедиться, что срок годности полосок не истек.

3. Надорвать края индивидуальной упаковки полоски, снять ее меньшую часть, закрывающую контакты, проводниками вверх, вставить полоску в гнездо прибора и, удалить остальную часть упаковки.

5. Нажать и отпустить кнопку прибора.

6. В случае несовпадения кодов полоски и высветившегося на табло – действовать соответственно инструкции к устройству.

7. При совпадениении кодов – повторно нажать и отпустить кнопку прибора. Появление на табло цифр «88.8» – признак готовности устройства к работе.

8. Обработать подушечку 4-го пальца кисти спиртосодержащим тампоном и, подсушив ее, проколоть кожу одноразовым стерильным скарификатором.

9. Выдавив каплю крови на пальце, аккуратно коснуться ею рабочей зоны полоски, добившись ее полного смачивания.

10. Звуковой сигнал прибора и мелькающие на табло цифры обратного счета свидетельствуют, что образец включен в анализ.

11. Через 40 секунд на табло высветится измеренная концентрация глюкозы, которую заносят в протокол опыта.

12. В третий раз нажать и отпустить кнопку прибора. Погасшее табло свидетельствует, что прибор выключен, а результат анализа включен в его память.

13. Извлечь использованную полоску и, убрать за собой рабочее место.