Інструкція
до проведення лабораторного заняття №5
Тема: Мітотичний поділ клітин. Будова хромосом.
Мета: Навчитись розрізняти структурні компоненти хромосом,
аутосоми та статеві хромосоми;навчитися розрізняти фази мітозу в рослинних і тваринних клітинах.
1. Конкретні цілі:
Знати: - види рбзмноження клітин;
поняття життєвого циклу клітин, його періоди;
фази мітозу та біологічне значення мітозу;
будови та типи хромосом.
Вміти: - складати схему життєвого циклу клітин;
- на настійних мікропрепаратах корінця цибулі визначити фази
мітозу;
класифікувати хромосоми за формою.
2. Зміст роботи:
Вивчити нормальний каріотип людини й каріотип хворої людини.
На постійному мікронрепараті коріння цибулі потрібно знайти клітини на стадії інтерфази, профази, метафази, анафази, телофази.
Це потрібно знати:
Для вивчення каріотипу людини звичайно використовують клітини кісткового мозку або лейкоцити периферійної крові, оскільки ці клітини найлегше одержати для аналізу. Клітини культивують у поживному середовище, в яке додають колхіцин — препарат, що зупиняє поділ клітин на стадії метафази.
Потім клітини обробляють гіпотонічним розчином, у якому вони набрякають, і хромосоми віддаляються одна від одної. Препарат забарвлюю ть і фотографують. У зв’язку з тим, що в метафазі хромосоми складаються з двох хроматид, кінці яких відходять один від одного, вони мають Х-подібну форму. З отриманої фото кар і о грами вирізають хромосоми й розміщують їх попарно в порядку зменшення розмірів. Виняток роблять для статевих хромосом, які розтошовують останніми. Ідентифікувати хромосоми тільки за розмірами і формою досить важко, тому ви можете користуватися зображенням нормального каріотипу. У медичної практиці для точного визначення місця хромосом використовують додаткові методи, в тому числі автоматичні. Метод каріотипування широко застосовують у медичної практиці для визначення змін у структурі хромосом або їхньої кількості, з якими пов’язано багато спадкових захворювань. Такий аналіз хромосом можна провести у клітини ембріона на ранніх стадіях вагітності та передбачити можливі спадкові захворювання. Оскільки здійснити каріотипування без спеціальних умов неможливо, вам пропонуються готові фотокаріограми.
Схема мітозу в клітині гіпотетичної тварини з диплоїд ним числом хромосом, що дорівнює 6 (гаплоїдне число дорівнює 3).
А — стадія спокою.
Б — рання профаза.
В — більш пізня профаза. Г — метафаза.
Д — анафаза. Е — те- лофаза. Ж — дочірні клітини.
1 — центріоля; 2 — ядерце; 3 — хроматин.
Обладнання: фотокаріограми. здорових і хворих людей;мікропрепарат
та матеріали: корінця цибулі, мікроскоп.
Хід Роботи
1. Ознайомитись з будовою та типами хромосом користуючись підручником і таблицями. Замалюйте схему типів і будови хромосом.
Будова хромосом |
2. При великому збільшенні мікроскопа знайдіть у другій зоні корінця цибулі клітини, які не діляться і перебувають на стадії інтерфази. В інтерфазі клітини прямокутної форми, оточені добре помітною оболонкою. Ядра клітин округлі, у них видно одне-два ядерця та дрібні грудки хроматину. Замалюйте одну клітину, позначте цитоплазму, ядро, ядерце.
Інтерфаза |
При великому збільшенні мікроскопа знайдіть у зоні поділу коріня цибулі клітини, що перебувають на стадії профази. У цей час у ядрі видно спочатку топкі, а в пізнішій профазі товсті й короткі нитки — хромосоми. У ранній профазі добре помітні ядерце та ядерна оболонка. До кінця профази вони зникають. Хромосоми, що нагадують короткі нитки, розташовані в центральній частині цитоплазми. Замалюйте клітину й позначте хромосоми.
Профаза |
4. При великому збільшенні мікроскопа знайдіть клітини на стадії метафази для цієї стадії характерні два процеси: 1) завершення утворення веретена поділу, що почалося ще наприкінці профази. Воно складається з мікротрубочок (у світловому мікроскопі їх видно як тонкі нитки), які тягнуться від одного полюса клітини до другого. Слід звернути увагу на те, що в клітинах вищих рослин веретено поділу формується без участі клітинного центру; 2) переміщення хромосом до центру клітини та розміщення іх у площині її екватора. У метафазі кожна хромосома складається з двох хроматид (сестринських хромосом). Умовно кінцем метафази можна вважати той момент, коли хроматиди починають відходити одна від одно і з’єднані лише в ділянці центромер. Замалюйте клітину, позначте хромосоми та веретено поділу.
Метафаза |
6. При великому збільшенні мікроскопа знайдіть клітину на стадії анафази. У ранній анафазі хромосоми повернуті центромерами до полюсів клітин, а їхні кінці спрямовані до її центру. У пізній анафазі хромосоми вже збираються на полюсах клітини. Можна знайти проміжний етап, оскільки в анафазі хромосоми розходяться до полюсів клітини за допомогою мікротрубочок веретена поділу. Замалюйте клітину та позначте хромосоми, веретено поділу.
Анафаза |
7. При великому збільшенні микроскопа знайдіть клітину на стадій телофази. У тслофазі хромосоми починають деконденсуватись, з’являється ядерна оболонка. Водночас відбувається «розбір» мікротрубочок веретена поділу, починаючи з полюсів клітини. Мікротрубочки найдовше зберігаються у центрі клітини, де й починає утворюватись перетинка, котра росте від центру клітини до периферії та ділить її на дві дочірні. Замалюйте клітину в стадії телофази й позначте хромосоми на її полюсах або ядро, що формується, місце утворення перетинки.
Телофаза |
Перелічіть відмінності в мітотичному поділі рослинної і тваринної клітини. Висновки