4 . Определение глюкозы в крови по методу Хагедорна и Иенсена

Метод основан на реакции окисления глюкозы гексациано-(III)-ферратом калия в слабощелочной среде:

К₃[Fe(CN)₆] + C₆H₁₂O₆  К₄[Fe(CN)₆] + C₆H₁₂O₇

(красная кровяная соль)

Глюкоза окисляется до глюконовой кислоты, гексациано-(III)- феррат калия восстанавливается до гексациано-(II) феррата калия. (Напишите уравнение реакции.)

Гексациано-(III)-феррат калия берут в избытке и неиспользованный остаток его определяют иодометрически в кислой среде:

2 К₃[Fe(CN)₆] + 2KI  2 К₄[Fe(CN)₆] + I₂

Вследствие обратимости этой реакции, гексациано-(II)-феррат калия переводят в нерастворимую соль К₂Zn₃[Fe(CN)₆]₂ действием ZnSO₄.

Свободный иод оттитровывают тиосульфатом натрия:

2 Na₂S₂O₃ + I₂  Na₂S₄O₆ + 2 NaI

(Напишите полуреакции, укажите окислителя и восстановителя).

Реактивы: ZnSO₄ – 0,45 %-й раствор, NaOH – 0,1 н раствор, K₃[Fe(CN)₆] – 0,005 н раствор, тройной раствор, CH₃COOH – 3 %‑й раствор, крахмал – 1 %-й раствор в насыщенном растворе NaCl, Na₂S₂O₃ – 0,005 н раствор.

Посуда: лабораторные пробирки (10 мл), «сахарные пробирки», конические колбы для титрования (100 мл).

Х о д р а б о т ы. В первую (опытную) пробирку набрать: 4 мл 0,45 %-го раствора ZnSO₄, 1 мл 0,1 н раствора NaOH, 0,1 мл крови. После выпускания крови пипетку дважды промыть раствором из пробирки. Во вторую (контрольную) набрать: 4 мл 0,45 %-го раствора ZnSO₄ и 1 мл 0,1 н раствора NaOH. Опытную и контрольную пробирки поставить в кипящую водяную баню на 15 мин.

Содержимое пробирок отфильтровать через смоченные заранее горячей дистиллированной водой фильтры в «сахарные пробирки». Пробирки трижды промыть 2 мл (точно!) горячей дистиллированной воды и также отфильтровать в «сахарные пробирки».

В обе «сахарные пробирки» отмерить по 2 мл 0,005 н раствора K₃[Fe(CN)₆] и поместить в кипящую водяную баню на 15 мин. (Время соблюдать точно!)

Пробирки вынуть и охладить. В обе пробирки прилить по 3 мл тройного раствора, 2 мл 3 %-го раствора СН₃СООН и 5–6 капель крахмала.

Титровать в конических колбах 0,005 н раствором тиосульфата до исчезновения синей окраски.

Содержание сахара определяется по табл. 14.

Пример: на титрование пробы пошло 1,34 мл тиосульфата. По таблице находим в вертикальном столбце – 1,3, в горизонтальном – 0,04. На месте пересечения стоит число 117, что соответствует содержанию сахара 117 мг %. Так же находим контроль, на титрование которого пошло 1,97 мл (5 мг % сахара). Вычитаем из опыта контроль и получаем истинную концентрацию сахара в крови – 112 мг %.

Таблица 14

Содержание сахара по результатам титрования тиосульфатом

Целые и	Объем раствора тиосульфата
десятые	сотые доли мл
	0,00	0,01	0,02	0,03	0,04	0,05	0,06	0,07	0,08	0,09
	Содержание сахара, мг%
0,0	385	0,382	379	376	373	370	367	364	361	358
0,1	355	0,352	350	348	345	343	341	338	336	333
0,2	331	329	327	325	323	321	318	316	314	312
0,3	310	308	306	304	302	300	298	296	294	292
0,4	290	288	286	284	282	280	278	276	274	272
0,5	270	268	266	264	262	260	259	257	255	253
0,6	251	249	247	245	243	241	240	238	236	234
0,7	232	230	228	226	224	222	221	219	217	215
0,8	213	211	209	208	206	204	202	200	199	197
0,9	195	193	191	190	188	186	184	182	181	179
1,0	177	175	173	172	170	168	166	164	163	161
1,1	159	157	155	154	152	150	148	146	145	143
1,2	141	139	138	136	134	132	131	129	127	125
1,3	124	122	120	119	117	115	113	111	110	108
1,4	106	104	102	101	99	97	95	93	92	90
1,5	88	86	84	083	81	79	77	75	74	72
1,6	70	68	66	65	63	61	59	57	56	54
1,7	52	50	48	47	45	43	41	39	38	36
1,8	34	32	31	29	27	25	24	22	20	19
1,9	17	15	14	12	10	8	7	5	3	2

Нормальное содержание сахара в крови здорового человека 60–100 мг %.