6. Өнделген антигендер нсмесе антиденелер колданатын иммунологиялық әдістер.

Иммунофлюоресценция. Өңделген антиденелерді флюоресцентті бояулармен (изотиоцианат, родаминсульфохлорид, аминолнафталин-5-сульфонилхлорид) конъюгациялау көмегімен алады. Бұл реакцияны тін кесінділеріне немесе жекеленген клеткаларға жүргізеді.

Радиоиммунды анализ. Радиоактивті өңдеудін флюоресценттіге карағанда жетістігі бар, әдістің сезімталдылығы және бағалау нөтижесінің нақты дұрыс болуы жоғарылайды. Антаденелерді ^13ІІ, ¹²⁵1,³Н, ¹⁴С өндейді.

1. Антигендердің бәсекелесуіне негізделген әдістер. Аныкталушы антиген, ■сорбентте байланыскан белгілі бір концентрациядағы антидене қатысуымен өңделген әнтигенмен бәсекеге түседі. Зертгелуші антиген неғүрлым көп болса, соғүрлым субстратга өнделген антиген аз болады. Бүл әдіспен IgE (PACT және РИСТ), біркатар гормондарды және медиаторларды аныктайды.

2. "Бәсекелеспеуші әдістер". Бүл техникада антиген немесе антидене сорбентте байланысады, зерттелуші сарысумен инкубацияланғанда антигеннің (немесе антидененііі) байланысуы журеді. Реагенттің бар екендігін өнделген антиглобулиннін байланысу негізінде анықтайды. Бүл әдіс еозылмалы гепатитте HBsAg анықтауда, ЖИТСта (СПИД) және т.б. колданылады.

Иммуноферменттік анализ (ELISA). Бұл жакдайда ферментгік белгіні (лизоцим, глюкоза-б-фосфатдегидрогеназа, ферритин) қолданады. Бүл сынақтың негізіне алыңған түцнүсқа ретінде антиценелердің белгіленген антигендермен осерлесуі ферментативтік актгивтіліктін төмендеуіне өкелетін дәлел болды. Бүл әдіс IgE, гормондарды, ВИ^ТІ- инфекдияларды және т.б. анықтау үшін қолданылады.

Комплемент жүйесін сандық бағалау

Комплемент жуйесінің жеке компонентгеріне және кейбір оның. ингибиторларына антисарысулардың сташдартты жинактары бар.

Сонымен қатар, иммуаохимиялық әдістер де (ракеталык иммуноферез. лазерлік нефелометрия) колданылады. Олар комплемент жүйесінін жекеленген белоктарының - СЗ, С4, сирек жағдайда фактор В жэне Clq концентрациясын бағалайды. СЗа жәнс С5а (анафилотоксиядер) сиякты төменгі молекулалык субфрагменттерінің концентрациясын аныктайтын радиоиммунологиялык және иммуноферменттік тәсілдер іске асырылған.

Тәжірибе максатында комплемент жүйесінің функционалдык активтілігін анықтау жеткілікті болады.

Комплемент жуйесінін функционалдық активтілігін бағалау

Комплемент жүйесінің классикалық жолмен активтенуін анықтау мақсатында, жоғарыда айтылып кеткен гемолитикалык жүйе қолданьшады (РСК реакциясында). Бұл үшін қан сарысуынын гемолитикалык жүйеде 50% және 100% гемолиз шақырушы концентрациялары қолданылады. Антиген-антидене комплексінің пайда болуы және оған комплементтің фиксациясы көзге көрінбейді. Комплементтің байланысуын анықтау ушін қосымша гемолитикалық жүйені қолданады. Ол антисарысумен өнделген қой эритроциттерінең, тұрады. Егер комплекс түзілмесе, онда комплемент бос күйде қалып, индикторлык гемолитикалык жүйенін активациясьна косылып, гемолизге экеледі.

Комплемент активтілігін анықтау иммунокомплекстік патологияда маңызы бар.

Фагоцитарлық жүйені бағалау Сандық аныктау

Иммундық статусты бағалауда перифериялык қандағы моноциттердің саны аз мэлімет береді, өйткені тінде негізгі кызметті моноцит тіндік макрофаг түрінде атқарады. Осыған байланысты фагоцитоз жүйесінің күйін бағалауда сапалық одістер мацызды.