Общепринятые методы оценки состояния иммунитета

В свете современных представлений о структуре иммунной системы среди методов оценки состояния иммунитета можно выделить методы оценки состояния врожденного иммунитета и методы оценки состояния адаптивного иммунитета.

Для оценки состояния врожденного иммунитета чаще всего применяют качественные методы оценки, позволяющие рассмотреть функциональные характеристики компонентов врожденного иммунитета. В оценке состояния адаптивного иммунитета применимы и качественные, и количественные методы оценки, но на первом, ориентировочном этапе все же более значимыми являются количественные методы оценки, которые дают возможность путем анализа соотношений различных популяций и субпопуляций клеток выявить наличие нарушений в основных звеньях иммунной системы. А далее с помощью тестов, оценивающих функциональную активность клеток, станет возможным более детальный анализ природы выявленных на первом этапе отклонений.

Примеры тестов для оценки состояния врожденного и адаптивного иммунитета приведены в табл. 26.

Первичное иммунологическое обследование, как правило, включает определение минимального количества основных показателей, дающих возможность выявления иммунной недостаточности в широкой клинической практике. В перечне этих показателей на первом месте стоит оценка лейкоцитарной формулы крови (табл.25).

Таблица 25. Нормальные показатели лейкоцитарной формулы

Всего лейкоцитов	Число гранулоцитов			Число мононуклеаров
	нейтрофилов	базофилов	эозинофилов	лимфоцитов	моноцитов
4-9х109/л	52-72%	0-1%	1-4%	20-39%	3-8%

Для количественной оценки основных субпопуляций Т- и В-лимфоцитов на практике все еще применяются наиболее доступные методы розеткообразования.

Методы розеткообразования

Это первые методы, позволившие иммунологам определить содержание Т- и В-лимфоцитов человека в период, когда отсутствовали необходимые моноклональные антитела для выявления этих клеток. Но тем не менее эти методы все еще находят применение в диагностических целях.

Метод спонтанного розеткообразования основан на том, что на поверхности всех Т-лимфоцитов человека содержится белок-рецептор для бараньих эритроцитов. На В-лимфоцитах таких рецепторов нет. Инкубируя взвесь лимфоцитов периферической крови с бараньими эритроцитами, получают структуры, называемые “розетками”: в центре Т-лимфоцит, по периферии – прикрепленные к его поверхности бараньи эритроциты. Т-лимфоциты, выявляемые с помощью этого теста, обозначают еще Е-РОК (где Е-эритроцит барана, РОК – розеткообразующая клетка). Позднее было установлено, что рецептором к бараньим эритроцитам является белок CD2 – общий маркер всех Т-лимфоцитов человека.

Таблица 26. Ориентировочный набор современных методов оценки врожденного и адаптивного иммунитета

Методы оценки состояния врожденного иммунитета		Методы оценки состояния адаптивного иммунитета
Количественные	качественные	количественные	качественные
1. Проточная цитометрия (выявление количества определенных клеток врожденной иммунной системы)	1. определение фагоцитар-ного индекса 2. определение фагоцитарного числа 3. НСТ-тест 4. ИФА (определение цитокинов, хемокинов, компонентов комплемента и т.д.)	1. Проточная цитофлуори-метрия (определение попу-ляций и субпопуляций лим-фоцитов) 2. Иммунофлуоресцентный метод (определение поверх-ностных иммуноглобулинов и субпопуляций лимфоци-тов с помощью люминес-центной микроскопии) 3.Методы розеткообразова-ния (определение содержа-ния Т- и В-лимфоцитов: Е-РОК, м-РОК, ЕА-РОК, ЕАС-РОК)	1. Проточная цитофлуори-метрия (определение экс-прессии рецепторов для ци-токинов и других рецепто-ров на различных субпопу-ляциях лимфоцитов и др.) 2. РБТЛ (реакция бластной трансформации лимфоци-тов) 3. РТМЛ (реакция торможе-ния миграции лейкоцитов) 4. ИФА (определение сыво-роточных и секреторных иммуноглобулинов, уровня цитокинов, растворимых рецепторов для цитокинов и др.) 5. кожные пробы 6. РАСТ (радиоаллергосор-бентный тест)

Аналогичный метод применяется при оценке количества В-лимфоцитов, в нем используется взаимодействие эритроцитов, нагруженных антителами к этим эритроцитам, с Fc-рецепторами В-лимфоцитов (ЕА-розетки: эритроциты, антитела).

Используют также метод ЕАС-розеткообразования (эритроциты, антитела и комплемент). В этом случае бычьи эритроциты, соединенные с антителами и комплементом, способны взаимодействовать с Fc- и С3- рецепторами В-лимфоцитов, также формируя розетки. Схематически тесты розеткообразования представлены на рис. 52.

Рисунок 52. Методы розеткообразования (слева – Е-РОК,