Контрольні питання

1. У чому полягає принцип методу смужок визначення сисної сили клітин?

2. Для яких рослинних об'єктів придатний цей метод?

3. Чому необхідно видаляти сік, що з´являється при розрізанні рослинної тканини, сисну силу якого визначають?

4. Чому дорівнює сисна сила дослідженого рослинного об'єкта, визначеного даним методом?

5. Як визначаються значення осмотичного тиску клітин при різному ступені їх насичення водою?

6. Як змінюються Р, Т, S залежно від насичення клітин водою?

Заняття 4. Робота 12. Визначення вільної та зв'язаної води ваговим методом

Основні відомості. При зануренні рослинної тканини в міцний розчин сахарози частина води із тканини переходить у розчин і зменшує його концентрацію. Знаючи вихідний об´єм розчину, початкову й кінцеву концентрацію, знаходять кількість води, віднятої розчином із тканин. За різницею між водою загальною й тією, що вийшла у розчин розраховують вміст води, що є зв'язаною. Концентрацію сахарози в розчині визначають рефрактометрично.

Для роботи необхідні розчини сахарози 30 і 60 % концентрації.

Матеріали й обладнання: листки різних рослин, коренеплоди, рефрактометр, конічні колби на 100 мл, скляні бюкси, аналітичні терези.

Реактиви: 30 і 60 % розчин сахарози.

Хід роботи

За допомогою рефрактометра визначають показник переломлення обох розчинів і визначають їх концентрацію (таблиця 7).

У зважені на аналітичних терезах бюкси наливають по 2 мл кожного розчину (двох-, трикратна повторність) і знову зважують. З листків висікають свердлом (6-10 мм) диски (без великих жилок). У кожний бюкс вміщують 0,4-0,5 г дисків рослин і знову зважують. Одночасно беруть наважку дисків для визначення загального вмісту води в тканинах, висушують при температурі 105 °С до постійної ваги.

Розчин сахарози з дисками періодично збовтують, щоб диски були повністю занурені в розчин. Через 2-3 год беруть із кожного бюкса краплю розчину й визначають показник переломлення й концентрацію. Розраховують кількість води, відданої тканинами в 1 і 2 розчинах сахарози. За різницею між вмістом води загальної та вільної знаходять таку її кількість, яка зв'язана з певною силою.

Кількість загальної, вільної й зв'язаної води обчислюють із розрахунками у відсотках на сиру вагу рослинного матеріалу. Крім цього, кількість вільної й зв'язаної води розраховують у відсотках від загального вмісту води.

Приклад розрахунків:

об'єкт – листи примули (диски 0,7 мм);

бюкс + розчин сахарози + наважка	– 15,1200 г;
бюкс + розчин сахарози	– 14,7200 г;
Бюкс	– 12,1000 г;
Наважка	– 0,4000 г;
Наважка сахарози	– 2,6200 г.

Таблиця 7

Зміна концентрації сахарози після занурення в неї тканин

Номер бюкса	Наважка тканини, г	Час визначення	Розчин сахарози			Кількість сахарози, г
			вага, г	показник перелом-лення	відсоток
1	0,4000	до занурення	2,6200	1,4429	60,5	1,5851
		після занурення	2,8305	1,4329	56,0	1,5851

Кількість сахарози в бюксі до й після занурення тканини однаково, воно дорівнює:

у 100 г розчину – 60,5 г сахарози

у 2,62 г – Х г

г сахарози

Після перебування в розчині рослинної тканини концентрація його стала 56 %. Отже, частина води з рослинної тканини перейшла в розчин, збільшивши його вагу.

Розраховують кінцеву вагу розчину в бюксі:

Різниця між вагою розчину після встановлення рівноваги й вихідним дорівнює 0,2105 г.

Вільна вода у відсотках від сирої ваги становить

%

Якщо при визначенні вологості матеріалу знайдено, що вміст загальної води дорівнює 81,2 % від сирої й 43,2 % від сухої ваги, то можна рахувати відносні величини різних форм води в тканинах. Отримані дані зведені в таблицю 8.

Таблиця 8

Вміст різних форм води

Вміст води, г	Кількість води, г	У відсотках від ваги		Сила утримання води, атм
		сирого рослинного матеріалу	сухого рослинного матеріалу
Загальна	0,3260	81,2	43,2	–
Вільна	0,2105	52,6	29,3	–
Зв'язана	0,1155	28,8	13,9	123

Якщо хочуть отримати більш докладну характеристику тканин по вмісту води, зв'язаною з різною силою, то застосовують розчини сахарози різної концентр

Вихідні данні для роботи.

об'єкт – листя герані (диски діаметром 0,7 мм);

бюкс + розчин сахарози + наважка	– 16,230 г;
бюкс + розчин сахарози	– 15,830 г;
Бюкс	– 13,100 г;
Наважка	– 0,400 г;
Наважка сахарози	– 2,730 г.

Таблиця 7

Зміна концентрації сахарози після занурення в неї тканин

Номер бюкса	Наважка тканини, г	Час визначення	Розчин сахарози			Кількість сахарози, г
			вага, г	показник перелом-лення	відсоток
1	0,4000	до занурення	2,730	1,4327	30,6
		після занурення	2,830	1,4230	29,0
2	0,4000	до занурення	2,52	1,4440	30,6
		після занурення	2,70	1,4350	28,5
3	0,4000	до занурення	2,53	1,4380	30,6
		після занурення	2,70	1,4245	28,5
4	0,4000	до занурення	2,63	1,4345	60,5
		після занурення	2,84	1,4242	56
5	0,4000	до занурення	2,81	1,4483	60,5
		після занурення	3,06	1,4361	55,5
6	0,4000	до занурення	2,67	1,4329	60,5
		після занурення	2,93	1,4255	55,5

Таблиця 8

Вміст різних форм води

Вміст води, г	Кількість води, г	У відсотках від ваги
		сирого рослинного матеріалу	сухого рослинного матеріалу
Загальна	0,3255
Вільна
Зв'язана

Завдання

1. Ознайомитися з рефрактометром: будова, призначення, застосування.

2. Заповнити таблицю 7;8, використовуючи готові данні розрахувати:

• кількість сахарози (г);

• кількість загальної;

• вільної;

• зв’язаної води.

3. Зробити висновки про вміст вільної та зв'язаної води в досліджуваній рослині.