- •Практическое занятие № 1 (1-3)
- •Тема занятия:
- •Перечень нормативных документов, регламентирующих требования к безопасности работы в лаборатории:
- •Устройство кдл
- •Содержание производственной деятельности медицинского лабораторного техника.
- •Санитарное содержание помещений.
- •Правила работы в кдл.
- •Первая помощь при химических ожогах и отравлениях
- •Задание:
- •Подготовьте полные письменные ответы на следующие вопросы:
- •Выписка из инструкции по противоэпидемическому режиму лаборатории диагностики спид
- •5 Июня 1990 г. № 42-28/38-90
- •Правила сбора мочи
- •Подготовка рабочего места для определения физических свойств мочи
- •Ознакомившись с изложенной ниже информацией, заполните предложенную таблицу по образцу:
- •Алгоритмы определения физических свойств мочи
- •Алгоритм действий:
- •Определение реакции мочи (кислотности, рН)
- •Практическое занятие № 2 (4-6)
- •Тема занятия:
- •2.1. Качественное определение белка в моче.
- •2.2. Количественное определение белка в моче с 3% сульфосалициловой кислотой и с пирогаллоловым красным.
- •2.3. Определение глюкозы в моче.
- •Внимательно прочтите ниже изложенную информацию.
- •Протеинурии
- •Определение белка в моче.
- •Метод количественного определения общего белка в моче с сульфосалициловой кислотой (30 г/л)
- •Метод определения белка в моче с пирогалловым красным
- •Определение суточной потери белка
- •Глюкозурии Внимательно прочтите ниже изложенную информацию.
- •Качественное определение глюкозы в моче.
- •Количественное определение глюкозы
- •Количественное определение глюкозы в моче ортотолуидиновым методом.
- •Количественное определение глюкозы в моче глюкозооксидазным методом
- •Определение глюкозы с использованием методов «сухой химии»
- •Алгоритмы определения белка и глюкозы Методы качественного определения белка в моче.
- •Количественное определение белка в моче кольцевой пробой
Определение суточной потери белка
Для определения суточной потери белка мочу собирают 24 часа, измеряют ее количество и указывают в направлении, перемешивают и доставляют в лабораторию 150-200 мл. Определяют содержание белка любым вышеописанных методом. Полученный результат умножают на суточный диурез (в литрах).
Например: Суточный диурез 1,8 л. Количество белка в моче 1,2 г/л. Суточная потеря белка: 1,2 г/л х 1,8 л = 2,16 г.
Глюкозурии Внимательно прочтите ниже изложенную информацию.
В моче здорового человека глюкоза находится в столь незначительном количестве, что обычными качественными пробами не обнаруживается. Появление глюкозы в моче называется глюкозурией.
ГЛЮКОЗУРИИ_____________________
/ /
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ
/ /
инсулярные экстраинсулярные
Подготовьте ответы на следующие вопросы, используя лекционный материал.
Что называется глюкозурией?
Что такое почечный порог?
Какие вещества называются пороговыми?
Каков почечный порог глюкозы у взрослых и детей?
Какие виды глюкозурий различают?
Какие глюкозурии называют физиологическими? При каких состояниях они возникают?
Каковы причины инсулярных глюкозурий?
Каковы причины экстраинсулярных глюкозурий?
Каковы причины печеночных глюкозурий?
Каковы причины ренальных глюкозурий?
Какое состояние называют лактозурией? Фруктозурией? Галактозурией?
Качественное определение глюкозы в моче.
Качественное определение глюкозы в моче является обязательным и может быть проведено одним из следующих унифицированных методов: 1) реакция Гайнеса; 2) экспресс методом с применением готового набора реактивов; 3) при помощи экспресс тестов.
Принцип. В основу большинства методов положены восстанавливающие свойства глюкозы. В реакции Гайнеса восстанавливается сульфат меди последовательно в гидроксид меди желтого цвета и в оксид меди кирпично-красного цвета. Реакция протекает при нагревании в щелочной среде.
Подготовительная работа.
1. Мутную мочу центрифугируют.
2. При большом содержании в моче белка (свыше 1 г/л) его удаляют. Для этого подкисляют мочу до слабокислой реакции, нагрева до кипения, затем охлаждают и фильтруют. Фильтрат должен быть прозрачным и при добавлении к нему раствора сульфосалициловой кислоты (200 г/л) не должен давать помутнения.
Примечание. В редких случаях при наличии в моче большого количества восстанавливающих веществ (мочевая кислота, индикан, креатинин, желчные пигменты и др.) их необходимо удалить. В пробирку наливают 8 мл мочи, прибавляют 1 мл 96% спирта и небольшое количество активированного угля; восстанавливающие вещества адсорбируются углем, оседающим на дно пробирки.
Реакция Гайнеса.
Приготовление реактивов: 13,3 г химически чистого сульфата меди растворяют в 400 мл дистиллированной воды (раствор 1); в другой посуде растворяют 50 г гидроксида натрия в 400 мл дистиллированной воды (раствор 2); далее разводят 15 г глицерина в 200 мл дистиллированной воды (раствор 3). Смешивают 1-й и 2-й растворв и к этой смеси при постоянном помешивании прибавляют небольшими порциями раствор 3. Получают готовый реактив синего цвета. Реатив годен в течение длительного времени.
Ход определения. В пробирку помещают 3-4 мл реактива Гайнеса и 8-12 капель мочи. Нагревают ее над пламенем до закипания смеси, а затем кипятят в течение 1—2 мин или кипятят на водяной бане. При наличии глюкозы голубой цвет переходит в желтый, а при отсутствии — цвет реактива Гайнеса не изменяется. На практике чаще к 1 капле мочи прибавляют 9 капель реактива и кипятят на водяной бане 1—2 мин. На результаты анализов могут влиять и другие вещества мочи (ацетилсалициловая кислота, кофеин, антибиотики, поливитамины, аскорбиновая кислота, хлорамин, желчные кислоты, билирубин), от которых необходимо избавляться.
Внимательно изучив изложенную выше информацию, выполните следующее задание:
Составьте краткий конспект качественного определения глюкозы в моче методом Гайнеса: принцип метода; подготовку мочи для исследования; приготовление реактивов; ход определения.