1.4. Количественное определение

Оптическое вращение может быть использовано для количественного определения субстанции, например этамбутола гидрохлорида. При этом необходимо использовать стандартный образец с известной оптической чистотой.

2. Абсорбционная спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях спектра (2.2.25)1

Должна быть доказана пригодность выбранных условий определения, таких, как используемые растворители и их качество, рН раствора и т. д. Обычно ультрафиолетовая спектрофотометрия имеет ограниченную специфичность, которую можно повысить использованием первой и второй производной спектра.

2.1. Идентификация

Ультрафиолетовая спектрофотометрия сама по себе редко используется для идентификации. Когда этот метод включают в набор испытаний для идентификации, необходимо изучить его специфичность путей сравнения спектров анализируемого вещества со спектрами подобных соединений. Специфичность метода можно повысить, если использовать не абсолютные значения оптических плотностей, а спектральные отношения. 1 European Pharmacopoeia. — 2.2.25. Absorption Spectrophotometry, Ultraviolet and Visible.

D. Рекомендации относительно критериев при проведении валидации для методик количественного анализа [8,11,12,13]

При валидации методик рекомендуется использовать следующие подходы и критерии1.

1. Требования к неопределенности результатов анализа

Полная неопределенность результата анализа (ДАs), в процентах, выраженная как односторонний относительный доверительный интервал для уровня доверительной вероятности 95% [17], не должна превышать следующих величин (табл. 3):

Таблица 3

Рекомендуется также проводить прогноз неопределенности результата анализа (для оценки корректности методики при выполнении анализа в другой лаборатории) (Приложение 1).

1 При проведении валидации могут использоваться другие научно обосно-

ванные критерии. Обычно полную неопределенность результатов анализа ДАs можно разбить на составляющие, связанные с погрешностью пробоподготовки (ДSP) и с погрешностью конечной аналитической операции (ДFAO). При прогнозе ДSP исходят из следующих требований к предельно допустимым погрешностям для мерной посуды, весов и приборов (табл. 4).

Таблица 4

Прогнозируемая неопределенность конечной аналитической операции (ДFAO) для хроматографических методик может быть рассчитана из требований к относительному стандартному отклонению в испытании на пригодность хроматографической системы (RSDmax) и используемого числа хроматограмм в методике. Для спектрофотометрических методик при прогнозе неопределенности конечной аналитической операции рекомендуется исходить из относительного стандартного отклонения оптической плотности с рандомизацией положения кювет, полученного в межлабораторном эксперименте (0.52%), и числа параллельных измерений (рекомендуется при выполнении анализа и при оценке неопределенности принимать, что число измерений должно быть не менее 3). Рекомендуется, чтобы при разработке методик прогнозируемая неопределенность пробоподготовки была незначима, т. е. выполнялось соотношение: Данное соотношение не всегда может быть выполнимо. Так, в случае обычной спектрофотометрии в варианте метода стандарта основным источником неопределенности результатов является, как правило, пробоподготовка. Однако для хроматографических методик предполагается, что обычно основным источником неопределенности является конечная аналитическая операция. Если неопределенность (прогнозируемая или изученная экспериментально), связанная с пробоподготовкой, является значимой, то к неопределенности конечной аналитической операции (т. е. к RSDmax в испытании на пригодность хроматографической системы) следует предъявлять, соответственно, более жесткие требования, чтобы обеспечить выполнение критериев для полной неопределенности результата анализа.