Середовище збагачення для лістерій (uvm) –

Listeria Enrichment Medium (UVM Medium) (М890) .

Склад	грам/дм3
Гідролізат казеїну Протеозопептон М'ясний екстракт Дріжджовий екстракт Натрію хлорид Калію дигідрофосфат Натрію гідрофосфат Ескулін Налідиксова кислота Кінцеве значення рН (при 250С) 7,4 ± 0,2	5,00 5,00 5,00 5,00 20,00 1,35 12,00 1,00 0,02

Приготування. Розмішати 54,37 г порошку в 1000 см³ дистильованої води. Підігріти до кипіння для повного розчинення частинок. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121⁰С) протягом 15 хв. Охолодити до 50⁰С і асептично додати стерилізований фільтруванням розчин акрифлавіну гідрохлориду (до кінцевої концентрації 12 мкг/ см³ або 25 мкг/ см³). Готове середовище має янтарне забарвлення, з легкою опалесценцією з голубуватим відтінком.

Принцип і оцінка результату. Середовище використовують для двоступеневого селективного збагачення лістерій, що дозволяє збільшити висів Listeria monocytogenes з м'ясних продуктів протягом 3-4 днів. Це середовище рекомендують як середовище первинного збагачення для виділення лістерій, пошкоджених при термічній обробці.

Гідролізат казеїну, протеозопептон, дріжджовий і м'ясний екстракти є джерелом необхідних поживних речовин для росту лістерій. Ескулін надає середовищу диференціюючи властивостей. Налідиксова кислота і акрифлавін пригнічують ріст, відповідно, грамнегативних і грампозитивних мікроорганізмів, що, разом з підвищеною концентрацією фосфату, додає середовищу селективних властивостей по відношенню до лістерій.

Для збагачення до 25,0 г або 25,0 см³ матеріалу додають 225 см³ середовища, що містить 12 мкг/см³ акрифлавіну і інкубують при 30⁰С протягом 4 годин, після чого висівають 0,2 см³ культури на чашки з Селективним агаром для лістерій. Через 24 год. інкубації 0,1 см³ культури вносять в 10,0 см³ того ж середовища, що містить 25 мкг/ см³ акрифлавіну гідрохлориду, і через 24 год. знову роблять висів на чашки з Селективним агаром для лістерій. Бульйонні культури лістерій представляють велику небезпеку, в порівнянні з колоніями на агарі, тому при роботі з ними треба дотримуватися особливої обережності.

Бульйон збагачення для лістерій, модифікований –

Listeria Enrichment Broth, Modified (М888)

Склад:	грам/дм3
Триптоза Дріжджовий екстракт М'ясний екстракт Натрію хлорид Натрію гідрофосфат Калію дигідрофосфат Ескулін Налідиксова кислота Акрифлавіну гідрохлорид (Трипафлавін) Кінцеве значення рН (при 250С) 7,4 ± 0,2	10,00 5,00 5,00 20,00 9,60 1,35 1,00 0,02 0,012

Приготування. Розмішати 52,0 г порошку в 1000 см³ дистильованої води. Підігріти (при необхідності) для повного розчинення частинок. Розлити у відповідні ємкості. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121⁰С) протягом 15 хв. Готове середовище має жовте забарвлення, прозоре або з легкою опалесценцією з блакитним відтінком.

Принцип і оцінка результату. Це середовище використовують для селективного збагачення видів Listeria з молока, молочних і інших харчових продуктів. Середовище містить триптозу, дріжджовий і м'ясний екстракти, які є джерелом необхідних поживних речовин для росту лістерій, у тому числі вітамінів, амінокислот, мікроелементів. Хлорид натрію підтримує оптимальний осмотичний тиск середовища, а фосфати надають йому буферних властивостей. Налідиксова кислота і акрифлавін пригнічують ріст, відповідно, грамнегативних і грампозитивних мікроорганізмів, за винятком лістерій.

Для збагачення до 25,0 г або 25,0 см³ матеріалу додають 225 см³ середовища і, при необхідності, подрібнюють. Інкубацію ведуть при 30⁰С протягом 7 діб, роблячи висів через 1, 2, і 7 днів на Селективний агар для лістерій.