- •Міністерство охорони здоров’я україни
- •Завідуючий Сектором із забезпечення діяльності Міністра р.Й.Василишин
- •Методичні вказівки
- •Listeria monocytogenes у харчових продуктах та продовольчій сировині”
- •Загальні положення
- •2. Коротка характеристика мікроорганізмів роду Listeria
- •3. Організація контролю продукції на Listeria monocytogenes
- •6. Апаратура, матеріали, лабораторний посуд, реактиви, поживні середовища
- •6.1. Апаратура та інструментарій
- •4. Організація лабораторних досліджень на Listeria monocytogenes
- •5. Сутність методу
- •6.2. Лабораторний посуд та матеріали
- •7. Підготовка до дослідження
- •7.1. Приготування розчинів та реактивів
- •7.2. Приготування поживних середовищ
- •8. Відбір і підготовка проб харчових продуктів для дослідження
- •8.1. Загальні положення по відбору і підготовці проб
- •8.2. Відбір і підготовка проб молока, молочних продуктів, сирів, морозива
- •8.3. Відбір і підготовка проб м'яса, м'ясних напівфабрикатів, м'яса птахів і птахопродуктів, ковбасних виробів і інших м'ясопродуктів
- •8.4. Відбір і підготовка проб плодоовочевої продукції
- •8.5. Відбір і підготовка проб риби, нерибних об'єктів промислу і продуктів, що з них вироблені
- •8.6. Відбір і підготовка проб продуктів дитячого, лікувального харчування і їх компонентів
- •9. Порядок проведення дослідження
- •10. Виявлення Listeria monocytogenes у реакції наростання титру фага (рнф)
- •11. Визначення Listeria monocytogenes за допомогою автоматичного імуноаналізатора типу “miniVidas”
- •12. Біологічні, серологічні та молекулярно-генетичні дослідження
- •13. Вимоги безпеки
- •14. Нормативні посилання
- •Додаток до методичних вказівок
- •Поживні середовища промислового виробництва, зареєстровані в Україні, рекомендовані для виділення Listeria monocytogenes Для культивування ізолятів
- •Дріжджовий триптон-соєвий агар / бульйон - Tryptone Soya Yeast Extract Agar / Broth (m1214 / m1263)
- •Середовища селективного збагачення Основа бульйону Фрейзера - Fraser Broth Base (m1327)
- •Бульйон збагачення для лістерій - Listeria Enrichment Broth (м569
- •Середовище збагачення для лістерій (uvm) –
- •Бульйон збагачення для лістерій, модифікований –
- •Основа бульйону вторинного збагачення для лістерій –
- •Основа селективного бульйону для лістерій –
- •Диференційно-діагностичні селективні середовища Агар для ідентифікації лістерій (palcam) –
- •Основа Оксфордського середовища для лістерій –
- •Селективний агар для лістерій (двокомпонентне середовище) –
- •Основа агару МакБрайда для лістерій / Основа агару МакБрайда для лістерій модифікована –
- •Основа селективного агару lpm для лістерій - lpm Agar Base (m1228)
- •Нітратний агар / Нітратний бульйон –
- •Бульйон для визначення цукролітичної активності лістерій –
- •Основа бульйону з бромкрезоловим пурпурним для лістерій –
6.2. Лабораторний посуд та матеріали
Вата медична гігроскопічна
Каструлі емальовані
Колби плоскодонні конічні чи круглі різної місткості
Ковпачки силіконові або металеві
Лійки скляні
Марля медична
Маркери по склу
Папір фільтрувальний лабораторний
Піпетки місткістю 1, 2, 5 і 10 см3
Полістиролові планшети U-подібні
Пробірки Уленгута (поплавці)
Пробірки
Пробки силіконові, гумові або ін., що витримують стерилізацію
Скельця предметні та покривні для мікропрепаратів
Термометр ртутний з діапазоном виміру від 0 до 1000С (ціна поділки шкали 10С)
Циліндри місткістю 100, 250, 500 см3 або мензурки місткістю 250, 500, 1000см3
Чашки Петрі скляні або пластикові
6.3. Реактиви та поживні середовища |
||
|
|
|
6.3.1. Реактиви, компоненти середовищ |
нормативний документ, фірма-виробник |
|
|
|
|
Агар мікробіологічний |
|
|
Акрифлавіну гідрохлорид (трипафлавін) |
HiMedia |
|
Вода очищена або дистильована |
ГОСТ 6709-72 |
|
Вугілля активоване |
|
|
D-глюкоза, ч |
|
|
D-лактоза, 1-водна |
|
|
Ескулін |
|
|
Екстракт дріжджовий сухий |
|
|
Жовток курячого яйця |
|
|
Заліза амонійного цитрат |
|
|
Ксилоза |
|
|
Калію гідроксид |
ГОСТ 24363-80 |
|
Калій фосфорнокислий однозаміщенний, ч. |
ГОСТ 4198-75 |
|
Калій фосфорнокислий двозаміщенний 3-х водний |
ГОСТ 2493-75 |
|
Кислота соляна, х. ч |
ГОСТ 3118-77 |
|
Крохмаль |
|
|
Кислота налідиксова |
HiMedia |
|
Литій хлористий, ч. або х. ч., або ч. д. а. |
ГОСТ 4328-77 |
|
Маніт |
|
|
Масло імерсійне для мікроскопії |
ГОСТ 31739-78 |
|
Набір реактивів за Грамом |
|
|
Натрій амоній фосфорнокислий двозаміщенний 4х водний, ч або хч |
ГОСТ 4170-78 |
|
Натрію гідроксид, чда |
ГОСТ 4328-77 |
|
Натрій лимоннокислий, 5,5-водний, чда |
ГОСТ 22280-75 |
|
Натрій хлористий ч,хч, або чда |
ГОСТ 4233-77 |
|
Оцтова кислота |
ГОСТ 61-75 |
|
Парадіметіламінобензоальдегід |
ТУ 6-09-3272-77 |
|
Пептон сухий ферментативний для бактеріологічних цілей |
|
|
Поліміксин “М” або “В” сульфат по 500 000 од. (медичний препарат) |
|
|
Рамноза |
|
|
Спирт етиловий ректифікований |
ГОСТ 5962-67 |
|
Сульфанілова кислота |
|
|
Феноловий червоний |
ГОСТ 5853-51 |
|
Фенолфталеїн |
ГОСТ 5850-72 |
|
Фуксин основний |
ТУ6-09-4119-75 |
|
Хлороформ технічний |
ГОСТ2-15-76-72 |
|
α-нафтол |
|
|
Цинк порошкоподібний |
ГОСТ 3640 |
|
Цефазидим |
|
|
Циклогексамід |
|
|
Тест-штами Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, Listeria innocua, Staphylococcus aureus, Rhodococcus equi, типові за культуральними, морфологічними та біохімічними властивостями |
||
6.3.2. Поживні середовища |
||
6.3.2.1. Для культивування ізолятів |
||
Поживний агар - Nutrient Agar - |
M001* |
|
Поживний бульйон - Nutrient Broth - |
M002* |
|
Дріжджовий триптон-соєвий бульйон - Tryptone Soya Yeast Extract Broth (TSYEB) |
M1263* |
|
Дріжджовий триптон-соєвий агар - Tryptone Soya Yeast Extract Agar (TS YEA) |
M1214* |
|
6.3.2.2. Середовища селективного збагачення |
||
Бульйон Фрейзера: основа - Fraser Broth Base, ростова добавка - Fraser Supplement, селективна добавка - Fraser Selective Supplement |
M1327*, FD 141*, FD125I* |
|
Бульйон збагачення для лістерій - Listeria Enrichment Broth |
M569* |
|
Середовище збагачення для лістерій (Середовище UVM) - Listeria Enrichment Medium (UVM Medium) |
M890* |
|
Бульйон збагачення для лістерій, модифікований - Listeria Enrichment Broth, Modified |
M888* |
|
Бульйон вторинного збагачення для лістерій - Fraser Secondary Enrichment Broth Base, Збагачувальна добавка Фрезера – Fraser Enrichment Supplement |
M1083*
FD065* |
|
Селективний бульйон для лістерій: основа - Listeria Selective Broth Base селективна добавка - Listeria Selective Supplement |
M889*, FD163I*
|
|
6.3.2.3. Диференційно-діагностичні селективні середовища |
||
Агар для ідентифікації лістерій (ПАЛКАМ):
|
М1064*, FD061* |
|
Оксфордське середовище для лістерій:
|
M1145*, FD172*
|
|
Селективний агар для лістерій - Listeria Selective Agar |
M567* |
|
Агар Мак-Брайда для лістерій:
|
M386*, FD171* |
|
Агар Мак-Брайда для лістерій, модифікований:
|
M891*, FD171* |
|
Селективний агар LPM для лістерій:
|
M1228*, FD151* |
|
6.3.2.4. Диференційні середовища |
|
|
Нітратний агар - Nitrate Agar |
M072* |
|
Нітратний бульйон - Nitrate Broth |
M439* |
|
Набір для визначення сахаролітичної активності лістерій
Mannitol (Маніт) Rhamnose (Рамноза) Xylose (Ксилоза) Mannose (Маноза) |
M1264*,
DD006*, DD010*, DD014*, DD007* |
|
Основа бульйону з бромкрезоловим пурпурним для лістерій - Purple Broth Base |
M284D* |
|
Blood Agar Base - основа кров'яного агару |
M073* |
|
Основа колумбійського кров’яного агару - Columbia Blood Agar Base |
M144* |
|
Тест-системи біохімічні для видової ідентифікації API Listeria |
BioMerieux |
|
*Каталожний номер продукції фірми HiMedia.
Допускається використання інших комерційних поживних середовищ (ПС) та діагностичних препаратів аналогічного призначення для проведення досліджень відповідно до цього документа, зареєстрованих та дозволених до застосування в Україні. При їх застосуванні варто керуватися рекомендаціями виробника.
