- •Міністерство охорони здоров’я україни
- •Завідуючий Сектором із забезпечення діяльності Міністра р.Й.Василишин
- •Методичні вказівки
- •Listeria monocytogenes у харчових продуктах та продовольчій сировині”
- •Загальні положення
- •2. Коротка характеристика мікроорганізмів роду Listeria
- •3. Організація контролю продукції на Listeria monocytogenes
- •6. Апаратура, матеріали, лабораторний посуд, реактиви, поживні середовища
- •6.1. Апаратура та інструментарій
- •4. Організація лабораторних досліджень на Listeria monocytogenes
- •5. Сутність методу
- •6.2. Лабораторний посуд та матеріали
- •7. Підготовка до дослідження
- •7.1. Приготування розчинів та реактивів
- •7.2. Приготування поживних середовищ
- •8. Відбір і підготовка проб харчових продуктів для дослідження
- •8.1. Загальні положення по відбору і підготовці проб
- •8.2. Відбір і підготовка проб молока, молочних продуктів, сирів, морозива
- •8.3. Відбір і підготовка проб м'яса, м'ясних напівфабрикатів, м'яса птахів і птахопродуктів, ковбасних виробів і інших м'ясопродуктів
- •8.4. Відбір і підготовка проб плодоовочевої продукції
- •8.5. Відбір і підготовка проб риби, нерибних об'єктів промислу і продуктів, що з них вироблені
- •8.6. Відбір і підготовка проб продуктів дитячого, лікувального харчування і їх компонентів
- •9. Порядок проведення дослідження
- •10. Виявлення Listeria monocytogenes у реакції наростання титру фага (рнф)
- •11. Визначення Listeria monocytogenes за допомогою автоматичного імуноаналізатора типу “miniVidas”
- •12. Біологічні, серологічні та молекулярно-генетичні дослідження
- •13. Вимоги безпеки
- •14. Нормативні посилання
- •Додаток до методичних вказівок
- •Поживні середовища промислового виробництва, зареєстровані в Україні, рекомендовані для виділення Listeria monocytogenes Для культивування ізолятів
- •Дріжджовий триптон-соєвий агар / бульйон - Tryptone Soya Yeast Extract Agar / Broth (m1214 / m1263)
- •Середовища селективного збагачення Основа бульйону Фрейзера - Fraser Broth Base (m1327)
- •Бульйон збагачення для лістерій - Listeria Enrichment Broth (м569
- •Середовище збагачення для лістерій (uvm) –
- •Бульйон збагачення для лістерій, модифікований –
- •Основа бульйону вторинного збагачення для лістерій –
- •Основа селективного бульйону для лістерій –
- •Диференційно-діагностичні селективні середовища Агар для ідентифікації лістерій (palcam) –
- •Основа Оксфордського середовища для лістерій –
- •Селективний агар для лістерій (двокомпонентне середовище) –
- •Основа агару МакБрайда для лістерій / Основа агару МакБрайда для лістерій модифікована –
- •Основа селективного агару lpm для лістерій - lpm Agar Base (m1228)
- •Нітратний агар / Нітратний бульйон –
- •Бульйон для визначення цукролітичної активності лістерій –
- •Основа бульйону з бромкрезоловим пурпурним для лістерій –
8. Відбір і підготовка проб харчових продуктів для дослідження
8.1. Загальні положення по відбору і підготовці проб
Відбір і підготовку проб продукції здійснюють відповідно до ГОСТ 26668-85 “Методы отбора проб для микробиологических анализов”, ГОСТ 26669-85 “Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов”, СаНПиН "Микробиологические нормативы и методы анализа продуктов детского, лечебного и диетического питания и их компонентов", затверджені заступником Головного державного санітарного лікаря СРСР 21.12.1988р №42-123-4940-88, СанПиН "Нормативы и методы микробиологического контроля продуктов детского питания, изготовленных на молочных кухнях системы здравоохранения", затверджені заступником Головного державного санітарного лікаря СРСР 31.08.1987г №42-123-4423-87, а також відповідно до діючих ГОСТ і НД на конкретні види продуктів.
Маса та об’єм проб, що відбираються, повинні бути достатніми для проведення дослідження і мінімум вдвічі перевищувати аналітичний зразок. З об'єднаної проби беруть наважку масою (25±0,1) г (50-100 г - для продуктів дитячого, лікувального і спеціалізованого харчування).
Від продукції в споживчій тарі в дрібній фасовці проби відбирають у кількості однієї або декількох одиниць в залежності від маси або об’єму споживчої тари. Кількість їх повинна бути достатньою для проведення дослідження.
Від продукції в транспортній або споживчій тарі великих розмірів або не упакованій проби відбирають з різних місць з різної глибини, включаючи поверхню.
Для бактеріологічного дослідження проби відбирають до узяття проб на фізико-хімічні й органолептичні дослідження стерильним інструментом у стерильний посуд. При цьому від зразка відбирають кілька проб з різних місць, подрібнюють, перемішують і з них складають наважку необхідної маси.
Заморожені продукти попередньо розморожують до температури усередині продукту 0-(-1) 0С; продукти, що містять жири (вершкове масло, морозиво тощо) нагрівають до температури (40-45) 0С і перемішують.
Відібрані зразки перемішують і подрібнюють або доводять до однорідної консистенції за ГОСТ 26669, із подрібненої суспензії складають наважку необхідної маси.
При посівах висококислотних чи лужних (із рН < 6 чи >7,5) рідких і твердих продуктів для запобігання зниження рН поживних середовищ, рН продукту перед посівом доводять до (7,0 ± 0,2).
8.2. Відбір і підготовка проб молока, молочних продуктів, сирів, морозива
Відбір і підготовку проб продуктів проводять відповідно ГОСТ 9225—84 “Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа”.
Кисломолочні продукти, сир, сирні вироби і пастоподібні продукти ретельно подрібнюють за допомогою гомогенізаторів і піддають нейтралізації, масло вершкове і морозиво розтоплюють до сметаноподібної консистенції.
8.3. Відбір і підготовка проб м'яса, м'ясних напівфабрикатів, м'яса птахів і птахопродуктів, ковбасних виробів і інших м'ясопродуктів
Відбір і підготовку проб м'яса, субпродуктів, м'ясних напівфабрикатів, ковбасних виробів і інших м'ясних продуктів проводять за ГОСТ 21237 “Мясо. Методы бактериологического анализа”, ГОСТ 26668-85 „Продукты пищевые и вкусовые. Методы отбора проб для микробиологических исследований”, ГОСТ 26669-85 „Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов". Масу наважки відбирають відповідно до п. 9.1.