- •Історичний нарис розвитку мікробіології (демонстраційний матеріал представнений у презентації)
- •Особливості організації прокаріот .
- •Ультраструктура бактерій
- •3. У цитоплазмі прокаріот виявляють різноманітні включення, що є:
- •2) Пігменти, основу яких складають довгі поліізопреноїдні ланцюги (каротиноїди).
- •Ріст та розвиток прокаріт
- •2. Дія хімічних факторів:
- •Морфологіно-диференційовані клітини прокаріот
- •2. Хемотрофи – населяють ті зони, де є легкодоступна для гідролізу органічна речовина, особливо їх багато в зоні кореневих систем рослин і на самих коріннях:
- •Екологія мікроорганізмів
- •4. Мікрофлора продуктів харчування. Поява мікроорганізмів у продуктах харчування відбувається через зараження:
- •Особливості метаболізму прокаріот
- •2. Шляхи катаболізму гексоз. Перетворення глюкози у с3-сполуки відбувається кількома шляхами:
- •Характеристика процесів бродіння
- •2. Спиртове бродіння. Спиртовим бродінням називається процес розкладу глюкози на спирт і вуглекислий газ. Рівняння реакції зобразив у 1815 році Гей-Люссак:
- •Дихання бактерій
- •Фотосинтез прокаріот
- •Мікробіологічні та молекулярно-біологічні основи антибіотикотерапії інфекційних захворювань
- •2. Механізми дії найважливіших антибіотиків. Антибіотики класифікують і характеризують за походженням, хімічним складом, типом впливу, спектром, механізмом дії.
Екологія мікроорганізмів
Термін екологічна мікробіологія вперше був введений у 1945 році С.М. Виноградським. Він сформував положення про постійну (аутохтонну) та тимчасову (алохтонну) мікрофлору конкретної мікробіологічної ніші.
Природні середовища існування мікроорганізмів: ґрунти, водойми, повітря, організми рослин, тварин і людей. У кожному з них розрізняють:
• постійну (резидентну, індигенну, аутохтонну) мікрофлору;
• випадкову (транзиторну, алохтонну) мікрофлору.
1. Ґрунт – найсприятливіше середовище існування мікроорганізмів. Ґрунти з рослинами і тваринами утворюють складні та багатоманітні біогеоценози, склад, щільність, функціональна активність яких залежать від типу і структури ґрунту, складу мінеральних і органічних речовин, фізико-хімічного стану, температури, рН, вологості, концентрації О2 і СО2.
Максимальна кількість мікроорганізмів у чорноземах і червоноземах на глибині 10-20 см, понад 1-2 м – зустрічаються в незначній кількості, починаючи з 5-6 м ґрунт стерильний. Патогенні мікроорганізми попадають у ґрунт із виділеннями, сечею, гноєм, мокротою, слиною, з трупами людей і тварин, при викиді фекально-побутових і стічних вод різних підприємств.
І) Серед грамнегативних бактерій найпоширеніші мешканці ґрунту такі:
1. Фототрофні бактерії:
- оксифотобактерії – ціанобактерії, що здійснюють кисневий фотосинтез (заливні рисові поля);
- аноксифототрофні бактерії – пурпурні та зелені, що здійснюють безкисневий фотосинтез.
Багато з них здатні до азотфіксації. У аеробних ціанобактерій цей процес пов’язаний з існуванням гетероцист, у яких чутливий до кисню фермент нітрогеназа, захищений від кисеньпродукуючої фотосинтетичної системи. Зрілі гетероцисти мають 3 додаткові шари поверх клітинної стінки і з вегетативними клітинами контактують через чисельні пори. Фотосинтетичні мембрани в гетероцистах сильно редуковані. Вегетативні клітини ціанобактерій проявляють сильну нітрогеназну активність лише в анаеробних чи мікроаеробних умовах.
2. Хемотрофи – населяють ті зони, де є легкодоступна для гідролізу органічна речовина, особливо їх багато в зоні кореневих систем рослин і на самих коріннях:
- псевдомонади – рухливі, утворюють спори, зазвичай аероби, деякі здатні до денітрифікації. Окремі збудники хвороб рослин – ксантомонаси;
- бделовібріони – трохи зігнені палички, з товстим полярним джгутиком. Це облігатні паразити бактерій, які проникають у периплазматичний простір інших Гр- клітин. Там ростуть, набуваючи форми довгої спірили, а далі поділяються відразу на кілька клітин. Ці клітини набувають джгутиків і виходять із клітини-господаря, активно нападаючи на нові бактерії;
- азотобактерії – великі перитрихи, аеробні азотфіксатори. Найрозповсюдженіший вид – A. chroococcum. Короткі рухливі палички перетворюються в нерухливі коки, об’єднані в диплококи. Вони покриваються слизистими капсулами. Під час старіння утворюються додаткові покриви, клітини спокою – цисти;
- бульбочкові бактерії – рухливі палички, не утворюють спор. Нерухомі, викривлені палички – бактероїди здатні до азотфіксації;
- ентеробактерії. Екологічно виділяють 3 групи – представники нормальної кишечної мікрофлори ссавців і збудники кишечних інфекцій (сальмонели, шигели); епіфітні та патогенні для рослин бактерії (ервінії); мешканці водойм і ґрунту (протеї, сератії). Активні амоніфікатори – протей навіть розкладає сечовину;
- брунькуючі бактерії – у нітробактерій утворюються „сидячі” бруньки, у гіфомікробіумів – на виростах (стебельцях);
- міксобактерії та цитофаги – слизутворюючі ковзаючі бактерії. Міксобактерії відрізняються складним життєвим циклом із формуванням плодових тіл. Можуть, окрім ґрунту, рости на гною, корі дерев. Розкладають целюлозу чи лізують інші бактерії. Хітинофаги розкладають хітин;
- простекобактерії – мають простеку у вигляді стебельця. Caulobacter відрізняється унікальним життєвим циклом. У клітини з′являється спочатку джгутик, на протилежному полюсі, на простеці, формується фіксатор, що складається з пластинок липкого матеріалу. Під час поділу утворюються 2 нерівноцінні клітини:
а) одна з простекою продовжує поділ;
б) друга з джгутиком плаває доти, поки не втратить його і не виросте простека. Тоді починає поділ. Кілька клітин із простеками об’єднюються в розетки за рахунок злипання стебелець. Часто за їх допомогою прикріплюються до більших бактерій. Дуже погано вивчені. Серед них зустрічають шестикутні форми;
- спірили – дуже рухливі. На коріннях злакових розповсюджені азоспірили, що володіють азотфіксуючою здатністю;
- спірохети – довгі (500 мкм), рухливі за рахунок аксіальних волокон.
ІІ) Серед грампозитивних зустрічаються:
- спороутворюючі – більшість паличкоподібних – бацили (утилізатори білків, сечової кислоти, фосфоорганічних сполук), клостридії (анаероби – 4 групи – цукролітичні, пектинолітичні, пуринолітичні, сульфатредукуючі). Беруть участь у перетвореннях сполук вуглецю, азоту, сірки;
- коринебактерії – характеризуються плеоморфним ростом із циклом „кок-паличка-кок” і клітинами у формі Т, Х, У, V. Артробактери беруть участь у процесах мінералізації органічних речовин в аеробних умовах. Їх вміст зростає у ґрунтах, бідних свіжими органічними залишками та в екстремальних умовах – тундра, високогірні райони, пустелі. Вони не утворюють таких стійких ендоспор, як бацили, але їх клітини довго зберігають життєздатність, а популяції виживають завдяки економному використанню ендогенних субстратів. У процесі розпаду органічних речовин деякі види утворюють пероксид водню, який бере участь в окисленні та осадженні заліза і марганцю.
- актиноміцети – високий вміст ГЦ пар 60-75%. Усі вони розкладають складні органічні речовини;
ІІІ) Мікоплазми – найважливіші Gallionella, Metallogenium, Siderococcus, розповсюджені на рослинах, тваринах, ґрунтах, чистих і стічних водоймах;
ІV) Архебактерії – метаногени, сіркоокислюючі, сірковідновлюючі, термоацидофіли, галофіли.
V) Гриби – пеніцили, аспергіли беруть участь у ґрунтоутворюючих процесах, перетвореннях сполук азоту, вуглецю, виділяють біологічно активні речовини, в тому числі токсини й антибіотики. Токсиноутворюючі гриби, потрапляючи в продукти харчування, викликають інтоксикації – мікотоксикози і афлатоксикози.
VІ) Найпростіші – харчуються бактеріями й органічними залишками, викликають зміни у складі органічних сполук ґрунту. Кількість від 500 до 500000 на 1 г.
Мікроорганізми відіграють важливу роль у формуванні ґрунту й визначають його родючість. Загальна кількість мікроорганізмів свідчить про інтенсивність біохімічних процесів, які протікають у ґрунті.
Для точнішого уявлення про родючість ґрунту проводять дослідження на наявність у ньому певних фізіологічних груп мікроорганізмів – амоніфікуючих, нітрифікуючих, денітрифікуючих, азотфіксуючих та ін.
Бактеріологічне дослідження ґрунту охоплює визначення:
а) загальної кількості сапрофітних мікроорганізмів;
б) кількості мікроорганізмів різних фізіологічних груп;
в) мікроорганізмів-антагоністів і виявлення їх активності;
г) санітарно-показових мікроорганізмів (кишкової палички);
д) патогенних мікроорганізмів.
При виділенні мікроорганізмів з ґрунту необхідно враховувати поживне середовище і мати на увазі, що всі вони на ньому не виростуть.
Терміни перебування патогенних мікробів у ґрунті варіюють – неспоротворні (дизентерії, чуми, бруцельозу, туляремії, туберкульозу) кілька днів, місяців; спори правцю, сибірської виразки, газової гангрени – роки. Відмирання зумовлюється нестачею вологи, відсутністю поживних речовин, антагонізмом бактерій, сонячним світлом.
Санітарно-епідеміологічне дослідження ґрунту проводять із метою санітарного нагляду і за епідеміологічними показниками. Ґрунти з переважанням мікрофлори, що свідчить про фекальне забруднення, вважають несприятливими (Str. faecalis, Citrobacter, Enterobacter, C. perfingens).
У ґрунті мікроорганізми утворюють складні асоціації з рослинами. Рослинна мікрофлора:
• епіфіти – існують на поверхні рослин. Є антагоністами фітопатогенних мікроб, ростуть за рахунок виділення їх і органічних забруднень. У максимальній кількості виявляють грамнегативну паличку Erwinia herbicola, псевдомонади, бацили. Знаходяться на стеблах, листках, насінні. Склад залежить від виду, віку рослин, типу ґрунту, температури;
• ризосфера – у ґрунті, біля коріння – неспороутворюючі псевдомонади, мікобактерії, актиноміцети, гриби. Функції: переводять різні субстрати у сполуки, доступні для рослин, синтезують біологічно активні речовини, вступають у симбіотичні взаємовідносини з рослинами, володіють антагоністичними властивостями проти фітопатогенів. Товщина ризосферного шару складає від кількох мл до см. У ризосферу поступають органічні речовини – малат, сукцинат, ацетат, гліколат, цукри. Коріння рослин регулює мікробний склад за допомогою лектинів, забезпечуючи прикріплення лише сприятливих видів;
• симбіоз міцелію грибів із коріннями вищих рослин – мікориза: ектотрофна (гіфи на поверхні кореня), ендотрофна (гіфи всередині паренхіми), мезотрофна (на поверхні та всередині паренхіми). Функції – збільшує площу поглинання вологи і поживних речовин, виробляє біологічно активні речовини. Деякі рослини – орхідеї, мон тропи – облігатні мікотрофні рослини.
Патогенні бактерії викликають бактеріози – загальні (загибель всього організму), місцеві – окремих органів рослин:
• Erwinia – опік, зав’ядання, мокра гниль.
• Pseudomonas – бактеріальна плямистість різного розміру та кольору.
• Xantomonas – плямистість, судинний бактеріоз.
• Corynebacterium – судинні та паренхіматозні захворювання.
• Agrobacterium – пухлини.
2. Кількісний та якісний склад мікрофлори води. Вода відкритих морських і прісноводних водойм – природне середовище різноманітних бактерій, грибів, вірусів, мікроскопічних водоростей, найпростіших. Концентрація водних організмів визначається, в основному, вмістом органічних речовин. Найчистіші ґрунтові підземні води (затримуються у фільтруючому шарі ґрунту). Значно більше мікробів у відкритих водоймах, що пов’язано з високим вмістом розчинених поживних органічних речовин, які поступають зі стічними і каналізаційними водами, відходами підприємств. Сьогодні в ріки, озера, моря викидається така кількість стічних вод із мікробами й органічними речовинами, що вода не встигає самоочищуватися. Зростання кількості органічної речовини у воді супроводжується збільшенням кількості аеробних і анаеробних бактерій. Особливо багато анаеробів у мулі, на дні водойм. Мікрофлора води виконує роль активного фактору у процесі її самоочищення від органічних відходів.
Склад і кількість мікробів відкритих водойм залежить від: хімічного складу води, заселеності прибережних зон, пори року. Переважну більшість мікрофлори рік, ставків, озер становлять коки – мікрококи, стафілококи – 80%, решта – псевдомонади, бактеріуми, клостридії, ціанобактерії.
Вода має важливе санітарно-епідеміологічне значення як фактор передачі збудників багатьох інфекцій, особливо кишечних (черевного тифу, дизентерії, сальмонельозів, холери), які з виділеннями хворих і носіїв поступають у відкриті водойми, а нерідко і в питну воду.
Хоча вода не особливо сприятлива для патогенних і умовно-патогенних мікробів, більшість із них здатні перебувати в ній певний час. Терміни виживання залежать від їх виду, концентрації, температури води, вмісту органічних речовин. Спори сибірської виразки можуть роками зберігатися у воді, місяці витримують сальмонели, лептоспіри, дні – збудники дизентерії, холери, бруцельозу, туляремії, ентеробактерії.
Основні об’єкти санітарно-епідеміологічного дослідження води – питна вода водопостачання, вода поверхневих і підземних джерел, стічні води, води прибережних зон морів, плавальних басейнів. Основні показники – загальна мікробна кількість, кількість бактерій групи кишечної палички – колі-титр, колі-індекс (чиста – 2-3, ЗМК=100, сумнівна – 100-150, забруднена – 500). Вода джерел централізованого водозабезпечення не повинна містити збудників кишкових захворювань і мати колі-індекс не більше 10000. Вода колодязів – не більше 10.
Ступінь забрудненості води мікробами прийнято виражати сапробністю – сукупністю організмів, які живуть у водах, що містять велику кількість тваринних чи рослинних решток:
• Олігосапробна – чиста вода, колі-титр = 1-10.
• Мезосапробна – зона помірного забруднення, кількість бактерій у 1 мл сотні тисяч, колі титр = 0,5-1.
• Полісапробна – вода дуже забруднена, бідна на кисень і багата на органічні речовини.
• Катаробна зона – дуже чиста вода (особливо в осінньо-зимовий період), розміщена далеко від населених пунктів.
Якщо в 1 мл 106 мікробів – вона прозора, якщо наявні дафнії – вода чиста.
Етапи очищення питних вод:
- механічне, іноді з попереднім хлоруванням;
- коагуляція солями алюмінію та заліза з наступним відстоюванням;
- фільтрування через антрацит;
- хлорування (озонування, опромінення).
Очищення стічних вод у природних умовах здійснюється шляхом фільтрації через ґрунт на спеціальних полях фільтрації та полях зрошення. У штучних умовах – на очисних спорудах – біологічних фільтрах, аеротентках, після яких вода надходить у відстійники.
3. Особливості мікрофлори повітря. Мікрофлора атмосфери вторинна, бідна і варіабельна – коки, бацили, клостридії, актиноміцети, гриби, віруси. Вона залежить від інтенсивності сонячної радіації, вітру, опадів, характеру ґрунту, пори року, умов прибирання, кількості людей, провітрювання. Мікроби надходять із поверхні ґрунту і рослин, із відходами виробництв, з організмів людини і тварин. Нестача вологи, поживних речовин, сонячна радіація перешкоджають розмноженню мікроорганізмів у повітрі. Багато мікроб у повітрі великих міст, мало – у сільській місцевості, над лісами, горами, морями (стерильне повітря під ліванськими кедрами. У древньому Римі під ними робили операції – виробляє фітонциди).
Зважені у повітрі краплі (слиз з епітеліоцитами і мікроорганізмами) утворюють стійкий мікробний аерозоль, дрібнодисперсні фракції якого здатні проникати не лише у верхні, а й у середні, нижні відділи респіраторного тракту. Повітряно-крапельним шляхом відбувається передача респіраторних захворювань – туберкульозу, грипу, кору, віспи, коклюшу, дифтерії, віспи, паротиту. Пиловим шляхом, коли викинені з респіраторного тракту крапельки висихають у бактеріальний пил, передаються туберкульоз, дифтерія.
Вивчають мікрофлору повітря методами:
• Природної седиментації – метод Коха.
• Примусової седиментації – з використанням імпакторів, імпінджерів.
• Фільтраційним – повітря продувають крізь воду або мембранні фільтри.
Критерії оцінки санітарно-мікробіологічного стану повітря – загальна кількість мікроорганізмів (на 1 м3, не повинна перевищувати 500); індекс санітарно-показових бактерій – кількість умовно-патогенних мікробів дихальних шляхів – гемолітичних стрептококів, золотистого стафілококу, Гр- бактерій, дріжджеподібних і цвільових грибів (до операції не більше 500, після – біля 1000).
Мікробіологічні аспекти охорони навколишнього середовища:
• Необхідно оберігати мікроорганізми, що здійснюють природний кругообіг речовин.
• Підтримувати мікроорганізми, що забезпечують деградацію ксенобіотиків.
• Стримувати розвиток організмів, що викликають псування харчових продуктів, ліків, водогінних і каналізаційних мереж, палива, машинної олії.
• Захищати середовище від забруднення патогенними й умовно-патогенними мікробами.
• Попереджати викид земних мікроорганізмів у космос.
• Захист природи і людини від генно-інженерних мікробів-мутантів.
