- •Методические рекомендации к практическому занятию для студентов 1 курса специальности «Лечебное дело»
- •Краткое содержание темы
- •Паразиты в препаратах крови
- •Методы обнаружения и исследования простейших
- •Окраска толстой капли крови
- •Серологические методы
- •Информативность серологических методов исследования при паразитарных заболеваниях
- •Методы формалин-эфирного и уксусно-эфирного осаждения
- •Методы исследования на тениоз и тениаринхоз
- •Основные методы лабораторной диагностики гельминтозов
- •Количественные копрологические методы
- •Методы исследования на энтеробиоз
- •Принципы диагностики гельминтозов
- •Исследование дуоденального сока, мокроты и мочи
- •Исследование мышечной ткани для обнаружения личинок трихинелл
- •Микроскопическое исследование костного мозга, содержимого кожных язв и бугорков на лейшмании
- •Основная литература
- •Дополнительная литература
Окраска толстой капли крови
Чем выше температура в помещении, тем быстрее окрашивается препарат, и наоборот. В среднем мазок окрашивается в течение 45-50 мин, толстая капля – 15-30 мин.
Если толстые капли сохранялись более недели неокрашенными, что само по себе действует как слабая фиксация, особенно в условиях жаркого климата, то препараты после окраски могут получиться недостаточно прозрачными из-за неполного гемолиза эритроцитов.
В таких случаях предварительно следует налить на препарат несколько капель дистиллированной воды. Через 10-15 мин гемоглобин эритроцитов переходит в воду, придавая ей буроватый оттенок, а толстая капля становится белесоватой. Воду сливают, каплю осторожно прополаскивают дистиллированной водой и затем наливают краску.
Можно окраску проводить и в специальных контейнерах, в которых стекла расположены на ребре, а выпадающая в осадок краска не портит препарат. Однако при этом возрастает риск смывания толстой капли со стекла.
Правильно окрашенная толстая капля имеет фиолетовый цвет, перекрашенная – темно-фиолетовый, недокрашенная – светло-голубой. Длительно хранившаяся при высокой температуре или зафиксированная толстая капля приобретает почти черный цвет.
Серологические методы
Протозойные болезни сопровождаются выработкой иммунитета и появлением в сыворотке крови антител, на обнаружении которых основаны серологические методы диагностики.
С указанной целью применяют РСК – реакция связывания комплемента (токсоплазмоз), РГА (трихомоноз, токсоплазмоз), РИФ (малярия, лейшманиоз, амебиаз, токсоплазмоз), РЭМА – реакция энзиммеченных антител (лейшманиоз, трипаносомоз, токсоплазмоз, амебиаз, малярия) и др.
Например, при РИФ с целью диагностики пневмоцистоза на мазки-отпечатки с пневмоцистами наносят капли различных разведений исследуемой сыворотки и затем – люминесцирующей сыворотки. Если в исследуемой сыворотке имелись антитела, то вокруг клеток паразитов в мазке образуются светящиеся ореолы, наблюдаемые при микроскопии препаратов в люминесцентном микроскопе.
Информативность серологических методов исследования при паразитарных заболеваниях
С
ерологические
методы относятся к косвенным методам
исследования, которые направлены на
определение антител или антигенов в
сыворотке крови или фекалиях, поэтому
в данные методические указания не
вошли. Следует при использовании
тест-систем и диагностикумов для
определения паразитарных заболеваний
руководствоваться инструкциями к их
применению, утвержденными Минздравом
России.
-
Сыворотка
крови
ИФА (иммунофер-ментный анализ)
описторхоз, фасциолез, эхинококкоз, альвеококкоз, цистицеркоз, трихинеллез, лямблиоз, амебиаз
РНГА (реакция непрямой гемагглютинации)
описторхоз, эхинококкоз, альвеококкоз, трихинеллез, амебиаз
РЛА (реакция латекс-агглютинации)
эхинококкоз, альвеококкоз
РКП (реакция кольцепреципитации)
цистицеркоз, трихинеллез
РИФ (реакция иммунофлюоресценции)
малярия, амебиаз, лямблиоз
