Микроскопическое исследование костного мозга, содержимого кожных язв и бугорков на лейшмании

Материал на исследование: костный мозг, язвенный краевой инфильтрат, содержимое кожных бугорков.

Метод мазка из кожного инфильтрата. Бугорок или участок инфильтрата протирают ватным спиртовым тампоном. Стерильным скальпелем делают поверхностный надрез кожи (при этом сдавливают пальцами бугорок для обескровливания).

Со дна и краев надреза этим же скальпелем берется соскоб пораженной ткани (в случае появления крови при разрезе ее удаляют стерильным марлевым тампоном). Соскоб со скальпеля быстро перенести на предметное стекло и равномерно растереть (готовят несколько мазков).

Результаты.

1) Лейшмании обнаруживаются в макрофагах, а также вне клеток в виде округлых, овальных или удлиненных телец размером 3 - 5 мкм; цитоплазма лейшманий светло-голубого или синеватого цвета, ядра - красно-фиолетовые; кинетопласт - окрашен интенсивнее ядра.

2) В правильно приготовленном препарате хорошо различимы клетки инфильтрата (макрофаги, эндотелиальные, плазматические, лимфоидные клетки, фибробласты и небольшая примесь клеток периферической крови).

Наличие в препарате эпителиальных клеток, а также бесструктурных глыбок, окрашивающихся в равномерно сиреневый цвет, означает, что соскоб был взят слишком поверхностно и должен быть повторен.

Лейшмании легко обнаруживаются в бугорках и в краевом инфильтрате язвы на начальных стадиях изъязвления; в гнойном отделяемом язвы могут быть обнаружены лишь деформированные и разрушающиеся лейшмании (по которым трудно поставить диагноз). На стадии заживления в пораженных тканях лейшмании обнаруживаются редко.

Метод мазка костного мозга. Материал, полученный при пункции костного мозга, немедленно после взятия переносят на предметное стекло.

Лейшмании обнаруживаются в макрофагах или внеклеточно. Они имеют вид округлых, овальных или рисовидных телец диаметром 3 - 5 мкм; цитоплазма окрашена в серовато-голубой цвет, ядро в красно-фиолетовый; в цитоплазме имеется кинетопласт в виде округлого или палочковидного образования и окрашивается более интенсивно, чем ядро. Иногда принимают за лейшмании кровяные пластинки или "осколки" клеток (комочки цитоплазмы, содержащие ядерное вещество). В редких случаях источником ошибки при микроскопии могут служить посторонние микроорганизмы (дрожжевые грибки, одноклеточные водоросли), которые могут попасть со стенок посуды - в мазке они окрашиваются более интенсивно (темно-синяя цитоплазма, ярко-малиновое ядро) и кинетопласт отсутствует.

При висцеральном лейшманиозе есть вероятность обнаружения паразитов и в периферической крови; в отдельных случаях для диагностики висцерального лейшманиоза исследуют пунктаты селезенки, печени и лимфатических узлов.

РЕНТГЕНОЛОГИЧЕСКИЕ И СКАНИРУЮЩИЕ МЕТОДЫ

Многие гельминты могут объизвествляться в тканях и при рентгенологическом исследовании образовывать характерные затемнения. Рентгеновское исследование применяется для диагностики эхинококкоза. Метод сканирования имеет наибольшую ценность при выявлении амебных процессов в печени и личинок цестод в тканях.

УКАЗАНИЯ К ВЫПОЛНЕНИЮ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

1. Рассмотрите под микроскопом несколько «немых» микропрепаратов и поставьте паразитологический диагноз. Препараты зарисуйте.

2. С помощью малых таблиц и рисунка 1 на микропрепарате «Смесь яиц разных гельминтов» определите яйца: трематод, цестод, нематод. Препарат зарисуйте.

3. Самостоятельно решите и объясните следующие ситуационные задачи.

Задача 1. Больной 32 лет, житель Ашхабада, обратился к врачу – дерматологу по поводу глубокой долго не заживающей язвы на лице. При осмотре обнаружен вокруг язвы ярко-красный болезненный инфильтрат. Язва возникла на месте укуса москита. При микроскопировании мазка (окрашенного по Романовском) из инфильтрата вокруг язвы внутри клеток (макрофагов) обнаружены овальные, небольшие (2-6 мкм) простейшие без жгутика, с крупным округлым ядром красно-фиолетового цвета, цитоплазма серо-голубого цвета, рядом с ядром обнаружен кинетопласт.

Какие простейшие обнаружены в мазке? Как называется заболевание, возбудителем которого являются обнаруженные простейшие? На чем основана лабораторная диагностика данного заболевания?

Задача 2. В инфекционную больницу поступила больная с жалобами на приступообразные подъемы температуры с ознобом. Приступы лихорадки повторяются через день. У больной обнаружена анемия, печень и селезенка увеличены. При микроскопировании окрашенных мазков крови в эритроцитах обнаружены по 2-3 кольцеобразных трофозоита (размер - эритроцита), амебовидные трофозоиты имеют длинные ложноножки, гаметы округлые. Как называется заболевание, вызываемое этим паразитом? С каким этапом жизненного цикла развития этих простейших связаны приступы лихорадки?

Задача 3. В клинику обратился мужчина с жалобами на периодическое нарушение стула и боли в животе. При микроскопировании окрашенных мазков фекалий больного обнаружены 4-х ядерные цисты, размером 8-12 мкм с тонкой оболочкой. Из анамнеза известно, что 2 года назад больной был в командировке в Средней Азии.

Цисты каких простейших обнаружены у больного? Как называется заболевание, вызываемое этим простейшим? Нужно ли обследовать на цистоносительство всех членов его семьи, несмотря на то, что они здоровы? Объясните.

Задача 4. В больницу на обследование поступил мальчик 14 лет с подозрением на лямблиоз. Больной жалуется на периодические боли в правом подреберье, нарушение стула, сниженный аппетит. Болеет пациент несколько лет. При многократных исследованиях фекалий мальчика лямблии не обнаружены. Какой анализ (что исследовать) можно провести, чтобы сделать правильное заключение? Объясните.

Задача 5. Молодой врач прибыл по распределению в сельскую больницу. От зоотехника он узнал, что в районе происходит массовый падеж скота от эхинококкоза. Летом скот находится на пастбищах. Могут ли жители села заболеть эхинококкозом? Объясните, какие методы диагностики можно применить. Какая стадия эхинококка инвазионная для человека? Какие методы профилактики следует соблюдать жителям этого района?

Задача 6. В поликлинику к гинекологу обратилась женщина с жалобами на серозно-гнойные выделения из влагалища. В нативном мазке, приготовленном из свежесобранных выделений, обнаружены подвижные грушевидной формы простейшие, размером 15-30 мкм, на переднем конце 4 жгутика и ундулирующая мембрана.

Какие простейшие обнаружены у женщины? Как называется заболевание, вызываемое этим простейшим? Нужно ли обследовать мужа этой женщины, несмотря на то, что он не предъявляет жалоб?

Задача 7. В поликлинику обратился больной, вернувшийся из Африки, с жалобами на болезненное мочеиспускание и наличие крови в моче. При микроскопировании осадка мочи обнаружены крупные (120-150 мкм) яйца гельминтов, удлиненно-овальной формы, бесцветные, с шипом на одном из полюсов.

Яйца какого гельминта обнаружены у больного? Как называется заболевание, вызываемое этим гельминтом? Как можно заразиться данным гельминтозом? Какая стадия гельминта инвазионная для человека?

4. Напишите выводы, заполните таблицу 2.

Таблица 2.ИНФОРМАТИВНОСТЬ ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

Материал для исследования	Метод исследования	Применяется для диагностики заболеваний
Фекалии	толстый мазок по Като и Миура	описторхоз, фасциолез, дикроцелиоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, аскаридоз, трихоцефалез, анкилостомидозы
	седиментации	описторхоз, фасциолез, дикроцелиоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, аскаридоз, трихоцефалез, анкилостомидозы, некатороз, кишечный шистосомоз, кишечные протозоозы (лямблиоз)
	флотации	аскаридоз, трихоцефалез, тениидозы, анкилостомидозы, некатороз, гименолепидоз, дифиллоботриоз
	нативный мазок с физраствором и раствором Люголя	лямблиоз, балантидиаз, амебиаз
Перианальный соскоб		тениаринхоз, тениоз, энтеробиоз
Дуоденальное содержимое	микроскопия осадка	описторхоз, фасциолез, дикроцелиоз, анкилостомидоз, некатороз, лямблиоз
Моча	микроскопия осадка	мочеполовой шистосомоз
Мокрота	микроскопия осадка	парагонимоз
Кровь	мазок крови	малярия, филяриозы, трипаносомозы
	толстая капля	малярия
Биопсия мышц	трихинеллоскопия	трихинеллез
Послеоперационный материал, пунктаты, срезы кожи и патологоанатомический материал		личиночные стадии: эхинококкозы, трихинеллез, цистицеркоз, филяриозы, амебиаз, балантидиаз трипаносомозы, лейшманиозы