- •Введение
- •Описание метода
- •Детекция продуктов амплификации
- •Выщепление 5' концевой метки (TaqMan Assay)
- •Использование зондов с комплементарными концевыми последовательностями (molecular beacons)
- •Применение 2-х зондов с резонансным переносом энергии (LightCycler assay)
- •Использование интеркалирующих агентов
- •Полуколичественный пцр
- •Кривые плавления
- •Пцр в реальном времени с реакцией обратной транскрипции
- •Оборудование для проведения пцр в реальном времени
- •6.1 Модель ViiA7
- •6.2 Модели 7500 и 7500 Fast
- •6.3 Модели StepOne и StepOne Plus
- •Применение
- •7.1 Диагностические исследования
- •7.2 Выявление циркулирующих опухолевых клеток
- •7.3 В микробиологии
- •7.4 Научные исследования
- •7.5 КПцр для определения количества малых ядрышковых рнк (мяРнк)
- •7.6 Пцр в реальном времени для измерения количества белка
- •7.7 Обнаружение фитопатогенов
- •7.8 Детекция генетически модифицированных организмов
- •Преимущества пцр в реальном времени
- •Заключение
- •Список используемой литературы
Оборудование для проведения пцр в реальном времени
6.1 Модель ViiA7
Данная модель – это прибор нового поколения для решения широкого спектра задач, как для количественного, так и для качественного анализа: анализ экспрессии генов и микроРНК, выявление транслокаций, определение вирусной нагрузки, типирование SNPs и т.д.
Основные характеристики:
Возможность выбора конфигурации термоблока: 96 лунок, 96 лунок для работы в скоростном режиме (96 Fast), 384 лунки и блок для проточных карт;
Способность детектировать 21 флуоресцентный краситель;
ПЦР в скоростном режиме – за 40 мин (блок 96 Fast);
Многоцветное детектирование – 6 фильтров эмиссии и 6 фильтров детекции сигнала (возможность проведения мультиплексных исследований);
Возможность независимого анализа кривых плавления ДНК и снятие полной кривой амплификации при типировании SNPs;
Наличие жидкокристаллического дисплея с технологией TouchScreen;
Возможность программирования независимо от компьютера;
Возможность автоматизирования процесса;
Автоматический поиск неисправностей;
Возможность подключения к локальной сети и удаленного контроля;
Высокая специфичность и чувствительность;
Возможность выполнения разнообразных экспериментов;
Возможность экспорта и импорта данных;
Большой спектр реагентов и расходных материалов;
Программное обеспечение с наличием дополнительных подсказок.
6.2 Модели 7500 и 7500 Fast
Системы 7500 и 70 Fast – это универсальные приборы для определения и детекции количества нуклеиновых кислот в режиме реального времени в стандартном 96-ти луночном формате. В случае необходимости модель 7500 может быть модернизирована до модели 7500 Fast. Её термоблок предназначен для проведения ПЦР в скоростном режиме.
Основные характеристики:
5-ти цветная система детекции (возможность проведения мультиплексных исследований);
ПЦР в стандартном режиме – менее чем за 2 часа (модель 7500), ПЦР в скоростном режиме – менее чем за 30 мин (модель 7500 Fast);
Возможность независимого анализа кривых плавления ДНК и снятие полной кривой амплификации при типировании SNPs;
Калибровка для новых красителей без дополнительного набора фильтров;
Минимизация спектральной перекрестной связи;
Легкое в использовании программное обеспечение;
Возможность экспорта данных;
Возможность выполнения разнообразных экспериментов;
Большой спектр реагентов и расходных материалов.
6.3 Модели StepOne и StepOne Plus
Данные модели предназначены для решения большого количества задач, как для количественного, так и для качественного анализа: анализ экспрессии генов и микроРНК, типирование SNPs, определение вирусной активности, транслокаций и т.д.
В модели StepOne имеется термоблок на 48 лунок, обладающий возможностью трехцветной детекции. При необходимости может быть модернизирована до модели StepOne Plus.
Модель StepOne Plus снабжена модифицированным термоблоком VeriFlex, состоящим из шести независимо программируемых модулей, которые объединены в стандартном 96-ти луночном формате. Данный блок обладает возможностью детекции 4 красителей.
Основные характеристики:
ПЦР в стандартном режиме – менее чем за 2 часа, ПЦР в скоростном режиме – менее чем за 40 мин;
Многоцветное детектирование (возможность проведения мультиплексных исследований);
Способность независимого анализа кривых плавления ДНК и снятие полной кривой амплификации при типировании SNPs;
Наличие жидкокристаллического дисплея с технологией TouchScreen и USB-порта;
Программное обеспечение с наличием дополнительных подсказок;
Способность программирования независимо от компьютера;
Способность выполнения разнообразных экспериментов;
Способность подключения к локальной сети и удаленного контроля;
Способность экспорта и импорта данных;
Большой спектр реагентов и расходных материалов.
