Автоматический подсчет форменных элементов крови

Для подсчета числа частиц в дисперсии определенного объема служит прибор типа Пикоскель.

В

Рис. 19. Прибор для автоматического подсчета форменных элементов крови (Пикоскель):

I – шкала электронного счетчика; II – кнопки управления; III – измерительный узел; 1, 2, 3 – первый; второй и размыкающий электроды соответ-ственно; 4 – трубка с апертурой; 5 – стаканчик с раз-

бавленной кровью; 6 – подставка

приборе (рис. 19) имеется измерительный узел III, состоящий из электродов 1 и 2, тубуса с апертурой определенного диаметра 4 и стаканчика 5, наполняемого суспензией (кровь, разбав-ленная специальными растворами для подсчета эритроцитов или лейкоцитов).

В процессе ра-боты между электродами 1 и 2 путем нажатия кноп-ки «start» (пуск) за-сасывается в апертуру тонкая струя суспензии. Каждый форменный элемент изменяет сопротивление между электродами, и генерируемые при этом импульсы под-считываются электронным устройством. На табло появляется цифра после того, как струя определенного объема прошла от электрода 2 до размыкающего цепь электрода 3. На табло высвечиваются три первые цифры, указывающие на количество форменных элементов в 1 мкл крови. К показателю на табло прибора следует приписать соответствующее число нулей.

Для работы необходимы: электронный прибор для автоматического подсчета форменных элементов крови (например Пикоскель), стерильный скарификатор, заранее приготовленные в соответствии с инструкцией растворы для разбавления крови, фильтровальная бумага, вата, спирт, йод, эфир.

Объект исследования – человек.

Проведение работы. Прибор подготавливают к работе в соответствии с инструкцией. Взятую из пальца кровь в объеме 0,002 мл (специальный капилляр) разбавляют специальным раствором, приготовленным также в соответствии с инструкцией. 20 мл полученной суспензии наливают в стаканчик, который помещают на подставку 6 в прибор. Электроды 1 и 2 при этом погружены в суспензию. Нажатием кнопки «start» запускают измерение. Порция струи проходит от электрода 2 до электрода 3, при этом прибор выключается и полученный показатель высвечивается на шкале.

Подсчет лейкоцитов проводят в том же порядке. Для эритроцитов и лейкоцитов используют различные трубки, апертура которых отличается диаметром, а также разные разбавляющие растворы.

Результаты работы и их оформление: отметьте количество эритроцитов и лейкоцитов, полученное в результате подсчета. В выводе указать, соответствуют ли полученные данные норме.

Р а б о т а 4

Определение содержания гемоглобина в крови по методу сали

Гемоглобин – сложный хромопротеид – содержится в эритроцитах. В крови содержится в среднем 14 г% гемоглобина, у женщин – 12,1–13,8, у мужчин – 13,8–15,6 г% (соответственно 121–138 и 138–156 г/л).

О

Рис. 20. Гемометр Сали и капилляр

(пояснения см. в тексте)

пределение гемоглобина производят колориметрическим способом, основанным на следующем принципе: если исследуемый раствор путем разбавления довести до окраски, одинаковой со стандартным раствором, то концентрация растворенных веществ в обоих растворах будет совпадать, а количества веществ будут соотноситься как их объемы. Зная количество гемоглобина в стандартном растворе (16,7 г%, что принято за 100% гемоглобина), легко вычислить его содержание в исследуемом растворе в относительных процентах.

Для работы необходимы: гемометр Сали, стерильный скарификатор, 0,1 н раствор HCl, фильтровальная бумага, вата, йод, спирт, эфир, дистиллированная вода.

Объект исследования – человек.

Гемометр Сали (рис. 20) представляет собой штатив, задняя стенка которого сделана из матового стекла. В штатив вставлены 3 пробирки одинакового диаметра. Две крайние запаяны и содержат раствор солянокислого гематина, средняя градуирована и открыта. Она предназначена для исследуемой крови. К прибору приложены капилляр (с меткой 20 мм³), стеклянная палочка и пипетка.

Проведение работы. В среднюю пробирку гемометра наливают раствор HCl до нижней кольцевой метки. Затем из пальца обычным способом набирают кровь в капилляр до метки, удаляя излишек с помощью фильтровальной бумаги. Выдувают кровь на дно средней пробирки так, чтобы верхний слой соляной кислоты оставался неокрашенным. Не вынимая пипетки, ополаскивают ее соляной кислотой из верхнего слоя. После того содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцем по ее дну, и оставляют стоять на 8–10 мин. Это время необходимо для полного превращения гемоглобина в солянокислый гематин. Затем к раствору добавляют по каплям дистиллированную воду до тех пор, пока цвет полученного раствора станет таким же, как цвет стандартного (добавляя воду, раствор перемешивают стеклянной палочкой).

Цифра, стоящая на уровне нижнего мениска полученного раствора, показывает содержание гемоглобина в граммах на 100 г исследуемой крови (при переводе в единицы СИ полученную цифру умножают на 10, получая величину гемоглобина в граммах на 1 л крови). Можно вычислить также относительное содержание гемоглобина в исследуемой крови.

Результаты работы и их оформление. Запишите, каково содержание гемоглобина в исследуемой крови. Вычислите относительное процентное содержание гемоглобина следующим образом. Допустим, количество гемоглобина в крови соответствует 14 делениям гемометра. Тогда по пропорции

16,7 г% – 100%

14,0 г% – х

вычисляем относительное содержание гемоглобина в процентах:

x = (10014,0)/16,7.

Сравните полученное значение с нормой.

Р а б о т а 5