Определение содержания гемоглобина в крови с помощью фотоэлектроколориметра

При наличии фотоэлектроколориметра содержание гемоглобина в крови можно определить экспресс-методом. Принцип этого метода заключается в следующем: если раствор, содержащий гемоглобин, поместить между источником света и фотоэлементом, то степень освещенности фотоэлемента будет зависеть от количества гемоглобина в растворе. Следовательно, чем больше в растворе гемоглобина, тем меньшее количество световых лучей определенной длины будет попадать на фотоэлемент и тем меньший фототок будет в нем возбуждаться.

Фотоэлектроколориметр состоит из стабилизатора напряжения, стрелочного гальванометра, кюветы для проб с разбавленной и гемолизированной кровью и потенциометра для калибровки прибора. Прибор сконструирован таким образом, что возникающий в фотоэлементе ток отклоняет стрелку чувствительного гальванометра, градуировка шкалы которого позволяет непосредственно определить в процентах относительное содержание гемоглобина в крови.

Для работы необходимы: фотоэлектроколориметр, стерильный скарификатор, фильтровальная бумага, специальный раствор для разведения крови (приготовленный по инструкции к прибору), вата, спирт, эфир, йод.

Объект исследования – человек.

Проведение работы. Для определения содержания гемоглобина кровь берут обычным способом из пальца до метки капилляра «кровь» и смешивают ее в пробирке с 4 мл приготовленного раствора. Смесь переливают в кювету. Через 1–2 мин наблюдается гемолиз. Кювету помещают в прибор, который включают в сеть. Далее проводят определение гемоглобина в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора. Отмечают положение стрелки гальванометра, которая показывает относительное содержание гемоглобина в цельной крови в процентах. На основании полученных данных рассчитывают абсолютное содержание гемоглобина в крови. Вся процедура анализа (не считая времени взятия крови) занимает 1–2 мин.

Результаты работы и их оформление. Запишите, каково содержание гемоглобина в исследуемой крови. Охарактеризуйте преимущество данного метода.

Р а б о т а 6

Характеристика красной крови

Для того чтобы владеть более детальной информацией о состоянии красной крови, следует вычислить несколько показателей, используя при этом полученные данные о содержании эритроцитов в крови (Э), гемоглобина по Сали (Нв), а также показатель гематокрита (Ht).

Задача 1 Вычисление цветового показателя крови

Цветовым показателем (ЦП) называют условную величину, характеризующую степень насыщения гемоглобином каждого эритроцита. Этот показатель можно вычислить, зная содержание гемоглобина в исследуемой крови и количество эритроцитов в 1 мкл этой же крови. Вычисление проводят по формуле, в числителе которой указана величина гемоглобина в грамм-процентах, умноженная на 3, а в знаменателе – две первые цифры величины количества эритроцитов в 1 мкл. Например, ЦП = 15  3/45 = 1.

Если ЦП ниже единицы, такое соотношение называют гипохромией, выше – гиперхромией. ЦП позволяет дифференцировать разные формы заболеваний красной крови.