69 Реакции Агглютинации

Антиген – агглютиноген

Антитело – агглютинин

Иммунный комплекс – агглютинат

Этапы (стадии) РА

СПЕЦИФИЧЕСКАЯ (невидимая) – взаимодействие Аг и АТ, формирование решетки (каркаса)

НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ (видимая) – выпадение решетки (каркаса) в осадок

Внешние проявления:

 МЕЛКОДИСПЕРСНАЯ АГГЛЮТИНАЦИЯ – О – агглютинация (иногда видимая только в агглютиноскоп или даже микроскоп – реакция микроагглютинации)

 КРУПНОХЛОПЧАТАЯ АГГЛЮТИНАЦИЯ – Н – агглютинация (при агглютинации жгутиконосных бактерий)

Способы постановки:

1. Прямая реакция агглютинации: - пластинчатая (ориентировочная) - объемная (развернутая) 2. Непрямая реакция агглютинации:  эритроциты – гемагглютинация (РНГА, РОНГА);  частицы латекса - латекс-агглютинация;  стафилококки – коагглютинация;

 На стекле (пластинчатая, ориентировочная) – чаще используется для идентификации антигена  Компоненты (ингредиенты): чистая культура неизвестного микроба и агглютинирующие диагностические сыворотки (поли- и моновалентные)

 В пробирке (объемная, развернутая) – чаще используется для обнаружения антител (серодиагностики) и определения их количества (титра);  Повторение ее через 5-7 дней позволяет выявить нарастание титра антител у больного человека (метод парных сывороток);  Компоненты (ингредиенты): сыворотка больного и диагностикумы.

Реакция гемагглютинации РНГА (РПГА) – цель серодиагностика.  Компоненты (ингредиенты): сыворотка больного (неизвестные Ат) и эритроцитарный диагностикум (мелкодисперсные Аг адсорбированы на эритроцитах).  РОНГА – цель сероидентификация.  Компоненты (ингредиенты): неизвестные Аг (исследуемый материал) и эритроцитарные сыворотки (Ат адсорбированы на эритроцитах). РНГА (РПГА) РНГА (РПГА): внешние проявления отрицательная – «пуговка» положительная – «зонтик»

70 Реакция преципитации

Сущность осаждение (преципитация) антигена, находящегося в коллоидном состоянии, под воздействием специфических антител в растворе электролита. Основные термины • Преципитоген - антиген • Преципитин – антитело Преципитат – иммунный комплекс (осадок), образующийся в результате РП. Применение 1. диагностика инфекционных заболеваний 2. судебная-медицинская экспертиза определение видовой принадлежности белков – при анализе кровяных пятен, спермы и т.д. 3. санитарная практика выявление фальсификации рыбных и мясных изделий. Цель: сероидентификация. Способы постановки

 В пробирке (кольцепреципитация, по Асколи)

 В геле (иммунодиффузия)

 Простая диффузия (линейная, радиальная по Манчини)

 Двойная или встречная иммунодифузия (по Оухтерлони, реакция нейтрализации токсина антитоксином)

 Усовершенствованные методы

 иммуноэлектрофорез

 иммуноблотинг

РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ: по Асколи В пробирке: высокочувствительная (как всякая РП)

Компоненты (ингредиенты) - последовательные разведения антигена экстрагированные из исследуемого материала – шерсти животного) наслаивают на стандартные разведения диагностической преципитирующей сыворотки; титр РП – максимальное разведение антигена, при котором наблюдается кольцо преципитации.

РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ: в геле ►преимущество по сравнению с пробирочной - гель, высокоочищенный агар, выполняет функцию локализации преципитата, т.к. он, в отличие от антител и антигенов, не может диффундировать в геле.

РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ: простая радиальная иммунодиффузия по Манчини

 Цель - определение класса и концентрации Ig в сыворотке пациентов (сероидентификация).

 Компоненты (ингредиенты) – гель, содержащая антиглобулиновую сыворотку (Ат против Ig человека) и сыворотка пациента (содержащая Ig), которая вносится в лунки.  Визуально вокруг лунки с исследуемым материалом образуется преципитат в виде кольца.