- •Список умовних скорочень
- •Розділ і Огляд літературних джерел
- •1.1 Загальна характеристика а-вірусу винограду
- •Будова віріону а-вірусу винограду
- •1.1.2 Морфологія. Білки та нуклеїнові кислоти
- •Геномна організація
- •1.1.6.1 Головні хвороби
- •1.1.4 Особливості реплікації
- •1.1.5 Біохімічні та біофізичні властивості а-вірусу винограду
- •1.1.6 Симптоматика
- •1.1.6.2 Рослини-господарі і симптоматика
- •1.1.7 Передача а-вірусу винограду
- •1.1.8 Штами
- •Методи діагностики а-вірусу винограду
- •1.2.1 Серологія
- •Умови плр
- •Цикли плр
- •1.2.3 Біотест
- •1.3 Заходи боротьби та профілактики вірусних захворювань винограду
- •1.4 Філогенетичні методи діагностики
- •Розділ 2 Проведення філогенетичного аналізу а-вірусу винограду
- •Розділ 3 з ясування ролі вірусів у біотехнології
- •Висновок
- •Список використаної літератури
1.1.4 Особливості реплікації
Реплікація віруса відбувається в цитоплазмі за участю продуктів ВРЗ1, транспортний білок накопичується в цитозолі та в клітинних стінках, які контактують з плазмодесмами, що призводить до передачі вірусних часточок в сусідні клітини [20, 28].
Будова клітин паренхіми при цьому зберігається, органели мають нормальний вигляд, а нечисленні вірусні часточки формують розрізнені агрегати невеликого розміру. Однак, клітини судинної тканини зазнають деструкції, клітинні стінки розтягуються, ендоплазматична мембрана активно проліферує, утворюючи везикулярні вирости тонопласта з фібрилярним матеріалом, і у формі пучків, завитків, скупчених шарів вірусні часточки випинаються у вакуолю або заповнюють усю порожнину клітини [1].
Реплікація відбувається в цитоплазмі, вірогідно в асоціації з мембранними везикулами. Стратегії реплікації GVA охоплюють виробництво вкладених наборів: 5'-кінцеві sgRNAs 5.1, 5.5 і 6.0 Ко і 3'-кінцеві sgRNAs 1.0, 1.8 і 2.2 Кб, які служать для вираження всіх ВРЗ, за винятком ВРЗ5, яка може бути виражена за допомогою Бі - або поліцистронних мРНК. Покоління цих 5'- і 3'-кінців sgRNAs керується внутрішніми елементами цис-активації.
Загальна схема реплікації
1. Вірус проникає в клітину-господаря.
2.Етап роздягання і виходу вірусної геномної РНК в цитоплазму.
3. Вірусна РНК транслюється як моноцистронна мРНК для виробництва RdRp (кодується 5'-проксимальною ВРЗ).
4. Відбувається реплікація вірусного геному. Геном длРНК синтезується з геномної ssRNA(+).
5. ДлРНК - геном транскрибується / реплікуються, тим самим забезпечуючи вірусні мРНК або нові (+)олРНК - геноми.
6. Внутрішні субгеномні промотори використовуються для того, щоб розшифровувати sgRNAs. Переклад цих sgRNAs дає капсидний і білок руху..
7. Збірка нових вірусних частинок.
8. Потрійний блок генів білків (TGBp) робить можливим процес передачі «від клітини до клітини» на далекі відстані [65].
1.1.5 Біохімічні та біофізичні властивості а-вірусу винограду
Антигенні властивості
Віріони є помірними або білними антигенами. Більшість видів є досить добре вивчені за рахунок використання серелогічних реакцій. Продуку.ться моноклональні антитіла А-вірусу винограду та рекомбінантні білкові антитіла для ймовірних білків руху.
Взаємозвязок між А, Б і Д – вірусами винограду є можливим завдяки декільком спільним внутрішнім антигенним детермінантам (криптотопи).
Частинки А-вірусу винограду містять виско структуровані епітопи, що зосереджені в спільній пептидній ділянці ланцюга капсидного білка [57].
Фізичні властивості
В клітинному соці N. clevelandii, вірус втрачає свою інфекційність, після нагрівання протягом 10 хв при температурі близько 50 °C,
- розчиняється в 10-5,
- має здатність зберігатися при температурі 20 °C близько 6 днів або при температурі 5 °C - 15 днів [14].
Властивості частинок
Коевіцієнт седиментації (s20,w) не екстраполюються на нескінченне розведення: 92 ± 2С [13].
1.1.6 Симптоматика
1.1.6.1 Головні хвороби
А-вірус винограду спричинює хворобу – ямковість стебла Кобера і є одним із компонентом комплексу складчастості деревини.
Складчатість деревини – це дуже серйозна хвороба, яка в цілому вражає щеплену лозу, і характеризується борознами і ямками на стовбурах і гілках як прищепи, так і підщепи [24] (Рис.1.6).
Рис.1.6 Симптоми А-вірусу винограду на прикладі винограду, а саме прояв складчастості деревини [64].
Вірус індукує яскраво вираженими повздовжними борознами на стеблі Американського гібриду підщепи Кобер 5ВВ (Рис.1.7), внаслідок щеплення з винограду або щепленн від Nicotiana spp.
Рис1.7 Повствожні ями на гілці зараженого підщепа Кобер 5ВВ [64].
А-вірус винограду може інфікувати безсимптомно виноград лише певних сортів або підщеп. Він також відповідальний за значні втрати врожаю, в загальному від 5 до 22% серед сортів винограду в Італії.
