- •Условия для получения суспензии клеток
- •Режимы воздействия мутагенов на l.Lactis
- •Условия для выделения колоний
- •Условия получения суспензии клеток
- •Условия для получения мутантов
- •Воздействие различных мутагенных факторов на молочнокислые бактерии
- •Повышение устойчивости молочнокислых бактерий к антибиотикам и к сушке
Воздействие различных мутагенных факторов на молочнокислые бактерии
Микроорганизм |
Мутаген |
Дозировка |
Изменение свойств |
L.plantarum |
Гамма-лучи |
30-500 Дж/кг |
Повышение кислотообразования в 3-4 раза |
L.lactis subsp.diacetilactis |
Гамма-лучи |
850, 1000, 1300 Дж/кг (однократное обслуживание) |
Увеличение диацетилообразования в 2-5 раз |
L.lactis subsp.acetoinicus |
Гамма-лучи |
450-750 Дж/кг 450-850 Дж/кг |
Увеличение диацетилообразования в 1,5-4 раз |
L.lactis subsp.acetoinicus |
Гамма-лучи, УФ-лучи |
1000-1300 Дж/кг (длительность воздействия УФ-лучами 30 с) |
То же |
L.helveticus |
Быстрые нейтроны |
3000 Дж/кг |
Повышение протеолитической активности на 54 % |
L.helveticus |
Рентгеновские лучи |
3600-5400 Дж/кг |
Увеличение протеолитической активности в 2-4 раза, увеличение кислотообразования на 46-81 % |
L.casei |
Рентгеновские лучи |
3600-5400 Дж/кг |
Увеличение протеолитической активности в 2,5-4,6 раза |
L.bulgaricus |
Рентгеновские лучи |
3600-5400 Дж/кг |
Увеличение протеолитической активности на 31 %, кислотообразования на 35 % |
L.lactis |
0,03 %-ный раствор этиленимина, УФ-лучи |
Длительность воздействия раствором 60 мин, длительность воздействия УФ-лучами 15-45 с
|
Увеличение активности свертывания на 30 % |
L.lactis |
1 %-ный раствор N-нитрозоэтилмочевины |
Длительность воздействия 30-60 мин |
Увеличение активности свертывания на 30-40 % |
L.lactis subsp.acetoinicus |
0,05 %-ный раствор N-нитрозометилуретана |
Длительность воздействия 50 мин |
Увеличение диацетилобразования в 2 раза |
L.lactis subsp.acetoinicus |
0,05 %-ный раствор N-нитрозоуретана |
То же |
Увеличение диацетилобразования в 8-9 раз |
L.lactis subsp.diacetilactis |
Гамма-лучи |
1000 Дж/кг |
Увеличение диацетилобразования в 9 раз |
L.cremoris |
Гамма-лучи |
1000 Дж/кг |
Увеличение диацетилобразования в 10 раз и более |
L.lactis, L.lactis subsp. diacetilactis |
1 %-ный раствор N-нитрозометилмочевины |
Длительность воздействия 2-4 ч |
Повышение антагонистической активности по отношению к бактериям группы кишечной палочки |
L.lactis subsp.diacetilactis |
0,05 %-ный раствор N-нитрозометилмочевины |
Длительность воздействия 2-6 ч |
Повышение липолитической активности в 3 раза |
L.helveticus |
0,05-1 %-ный раствор N-нитрозометилмочевины |
Длительность воздействия 2-3 ч |
Увеличение протеолитической активности на 63,7-104,5 % |
В настоящее время имеется достаточно данных, указывающих, что путем адаптации можно повысить резистентность молочнокислых бактерий к антибиотикам, химпрепаратам, поваренной соли и т. д.; установлена возможность адаптации молочнокислых бактерий к повышенной или пониженной температуре развития и к высушиванию.
Последовательность селекции молочнокислых бактерий адаптацией показана на схемах 4 и 5.
Схема 4. Селекция молочнокислых бактерий адаптацией к химическим веществам и физическим факторов
Культивирование в среде с постепенно возрастающим количеством вещества |
|
Культивирование в среде при постепенно повышающейся или снижающейся температуре |
||||
|
||||||
|
|
|
|
|
||
|
Высев культуры на плотную питательную среду |
|
||||
|
|
|
|
|
||
|
Термостатирование посевов |
|
||||
|
|
|
|
|
||
|
Выделение колоний и отбор улучшенных вариантов |
|
||||
Схема 5. Селекция молочнокислых бактерий, устойчивых к сушке
|
Первая сушка культуры |
|
|
|
|
|
Восстановление культуры |
|
|
||
Вторая сушка культуры |
||
|
||
Восстановление культуры |
||
|
||
Третья сушка культуры |
||
|
||
В ысев сухой культуры на плотную питательную среду |
||
|
||
Термостатирование посевов |
||
|
||
Выделение колоний и отбор улучшенных вариантов |
Получены культуры молочнокислых бактерий, резистентные к антибиотикам – низину, пенициллину и стрептомицину, а также культуры мезофильных лактококков и молочнокислых палочек, устойчивых к сушке (табл.7). Установлена возможность повышения резистентности культур L.acidophilus и L.bulgaricus к желчи через несколько циклов последовательного выращивания в средах, содержащих желчь.
Улучшенные формы молочнокислых бактерий, полученные путем адаптации, находят применение в производстве традиционных кисломолочных продуктов, а также лечебно-профилактических препаратов, содержащих молочнокислые бактерии.
Таблица 7