Методы паразитологического исследования

Трихинеллез (лат. Trichinella-spiralis - трихинелла) - род паразитических круглых червей класса Enoplea. Вызывают смертельно опасное заболевание – трихинеллез, в природе распространен довольно широко. Личинки трихинеллы паразитируют в капсулах в теле животных.

У диких животных он зарегистрирован на Украине, в Белоруссии, Поволжье, Сибири, на Дальнем Востоке, в Арктике… Особенно широкое распространение трихинеллез получил в Америке и Канаде, где зараженность людей трихинеллезом в отдельных областях достигает 22-46%.

Трихинеллезом заражаются практически все животные: волки - до 96,9% поголовья, лисицы - 80%, кабаны - 21,4%, песцы - 34%, норки - 11,1%, колонки - 60%, куницы - 20%, собаки - 4,3%, кроты - 50%. Среди хищников болезнь постоянно поддерживается из-за поедания одними животными других. Циркулируя в диком мире, данная инвазия, снижает качество пушнины, понижает плодовитость, сокращает численность ценных пушных зверей и постоянно грозит заражением домашних животных (свиней, собак, кошек) и человека. Основная масса домашних собак заражается трихинеллезом в осенне-зимнем сезоне охоты, т. к. тушки добытых на охоте животных выбрасываются охотниками или используются ими в качестве привады. Трихинеллезные тушки становятся при этом источником заражения других животных.

Личинки находятся в мышцах зараженных животных на протяжении их жизни. Могут длительно сохраняться в трупах животных, при замораживании сохраняются десятки лет. Человек приобретает личинки, употребляя в пищу зараженное мясо. В организме человека личинки ведут себя также, как и в организме животных. Под действием желудочного сока оболочка капсулы растворяется, и личинки оживают и начинают размножаться. Одна самка, находясь в кишечнике человека или животного, способна воспроизвести 1-2 тысячи личинок, которые разносятся через кровеносные и лимфатические сосуды по всему телу «хозяина» (рис. 4).

Рис. 4 Цикл развития трихинелл

Выживают лишь те личинки, которые попадут в поперечно-полосатые мышцы с хорошим кровоснабжением (жевательные, глазодвигательные, диафрагмы). Там они могут существовать несколько лет. Зараженность мышц личинками трихинелл может достигать 15 тысяч на килограмм ткани. Для замыкания жизненного цикла необходимо, чтобы «хозяина» съело другое млекопитающее или человек. При попадании в тонкий кишечник в течение нескольких дней трихинелла достигает половой зрелости. При интенсивных инвазиях «хозяин» может погибнуть.

В зараженном свином мясе - небольшие овальные капсулы, в которых содержатся скрученные в спираль маленькие (0,5 мм) червячки - трихинеллы. Их жизненный цикл проходит в кишечнике и мышцах. В свином мясе находиться до 15 тыс. трихинелл на 1 кг. Свою жизнеспособность трихины сохраняют до 20 и более лет (рис. 5).

С имптомы трихинеллеза: головная боль, отеки, ломота в теле, диарея, высокая температура (до 40°).

Рис. 5 Трихинеллы скрученные в спираль

Трихинелла - это единственный гельминт, который не гибнет при глубокой заморозке, при -180, потому что находится «в капсуле».

В народе поражение организма человека круглым глистом называют еще «одутловаткой», поскольку болезнь сопровождается отеком лица, иногда таким, что глазные щели закрываются (рис. 6). Попадая внутрь с не прожаренной свининой, мясом диких животных (медведей, кабанов), черви длиной 1,5-4 мм паразитируют на стенках кишечника, а отсюда личинки разносятся по всему организму и оседают в мышцах туловища и конечностей.

Р

ис. 6 «Одутловатка» - поражение организма человека трихинеллой

Болезнь проявляется через 2-3 недели после употребления зараженного мяса и характеризуется высокой температурой, покраснением глаз, светобоязнью, мышечными бо-лями, появляются боли в животе, диарея. В легкой форме переносится на ногах, потому распространенность трихинеллеза в несколько раз выше официальной статистики.

Профилактика трихинеллеза

Готовить мясные продукты до достижения внутренней температуры 74°С в течение, как минимум, 15 секунд.

Замораживать свинину в течение 20 дней при 15°C или трех дней при 20°С.

Не позволять свиньям есть сырые туши других животных, в том числе крыс, которые могут быть инфицированы трихинеллами.

Готовить мясо диких животных тщательней. Замораживание мяса диких животных, в отличие от замораживания продуктов из свинины, даже в течение длительных периодов времени, может быть неэффективным. Это происходит потому, что эти виды трихинелл более устойчивы.

Необходимо соблюдать правила:

• не приобретать мясо свиней и диких животных с рук;

• покупая мясо на рынке, требовать справки о проведенной ветеринарно-санитарной экспертизе на трихинеллез;

• охотничье-промысловым хозяйствам, обществам рыболовов и охотников, охотникам-любителям, которые занимаются отстрелом диких животных, сдавать пробы мяса на веет. санитарную экспертизу перед употреблением;

• в

  

  полевых условиях выявлять зараженное мясо при помощи портативного трихинеллоскопа (рис.7).

Рис. 7 Портативный трихинеллоскоп ПТ-101

Портативный трихинеллоскоп ПТ-101 предназначен для диагностики трихинеллеза у диких и домашних животных методом компрессионной трихинеллоскопии. Трихинеллоскоп используют в лабораториях ветеринарной санитарной экспертизы, ветеринарных учреждениях, фермерс-ких и охотничьих хозяйствах, частными производителями мясной продукции. Прибор позволяет выявлять паразитов в мышцах рыб, трематод в пресноводных моллюсках при гельминтологической оценке пастбищ, и как обычный микроскоп. Все наблюдения производятся в проходящем свете.

Порядок работы при определении трихинеллеза

Отбор материала для исследования осуществляется от каждой туши животного. Из каждой пробы мышц проверяемого животного делают срезы строго вдоль мышечных волокон размером 5х2 мм. Всего из разных участков пробы делают 24 среза, при отрицательных результатах в 3-4 раза больше (рис.8).

Рис. 8 Из мышц проверяемого животного делают срезы

Для исследования отбирают пробы мышечной ткани из ножек диафрагмы (на границе перехода мышечной ткани в сухожилие), при их отсутствии берут части межреберных, шейных, жевательных, поясничных, икроножных мышц, сгибателей и разгибателей пясти, а также мышцы языка, пи-щевода и гортани; от туш морских млекопитающих - мышцы глаз и кончика языка.

Каждый срез помещают на отдельный сектор предмет-ного стекла компрессория (стекло из 8 секторов). Накрывают верхним стеклом компрессория. Сдавливают струбцинами стекла и удаляют излишки жидкости, во избежание попадания ее внутрь прибора. Помещают стекла в трихинеллоскоп и фиксируют с разных сторон зажимами.

Плотно прижимают стекла к основанию трихинеллос-копа при помощи прижимного кольца. При отсутствии компрессория возможно использование стекол толщиной 3-4 мм и шириной не более 25 мм.

Каждый из подготовленных образцов микроскопируют отдельно. Установка резкости осуществляется вращением окуляра и объектива.

При обнаружении в мышцах хотя бы одной личинки трихинелл все пробы мышц утилизируют, перед этим засыпают или заливают дезинфектантами - хлорная или белильная известь. Стекла компрессория обеззараживают путем кипячения в течение 60 мин с момента закипания.

Результат микроскопирования: инкапсулированная ли-чинка трихинелл в мышцах представляет собой капсулу личинки лимоновидной или овальной формы размером 0,5-0,7 х 0,2-0,3 мм; внутри капсулы одна, реже две или три спиралевидно свернутые личинки. При бескапсульном варианте обнаруживаются только спиралевидно свернутые личинки трихинелл.

Срезы просматривают под малым увеличением микроскопа или трихинеллоскопа (10^×4; 10^×10).

Для приготовления препарата из шпика берут мышечные прослойки. Делают 24 среза от каждого куска, помещают в 10%-й раствор фуксина в 5%-м растворе едкого натра на 5 - 8 мин. И просматривают в компрессории. Трихинеллы могут локализоваться в подкожных жировых отложениях, в которых макроскопически не видно мышечных прослоек. Шпик без видимых мышечных прослоек разрезают на всю толщину и срезы берут с внутренней поверхности шпика по линии его расслоения (такие линии образуются в местах атрофированных мышц). Делают не менее 5 срезов толщиной около 0,5 мм и погружают в раствор, указанный выше. При микроскопическом исследовании на фоне неокрашенных жировых клеток резко выделяются трихинеллы в виде светло-красных или желто-красных включений. Оболочка трихинелл при этом ясно выражена.

При исследовании консервированной (мороженой, соленой) свинины ее сначала оттаивают. Толщина срезов не должна превышать 1,5 мм. После размещения срезов на ниж нем стекле компрессория их слегка раздавливают верхним стеклом. Затем нижнее стекло снимают и на каждый срез наносят пипеткой каплю 0,5% раствора соляной кислоты или раствора метиленового синего (5 мл насыщенного спиртового раствора и 195 мл дистиллированной воды). Продолжительность обработки срезов - 1 мин. После этого вновь накладывают верхнее стекло и срезы исследуют в обычном порядке. Обработанные соляной кислотой мышечные срезы становятся прозрачными или сероватого цвета. Капсула имеет вид серебристого ободка, жидкость внутри полости трихинеллы - нежно-голубого цвета, личинка гельминта не окрашивается и становится хорошо видимой. Если мясо вследствие длительного хранения потеряло часть влаги, полость трихинеллы окрашивается в более темные тона, чем мышечные волокна.

Мышечные срезы из солонины делают в 2 раза тоньше, чем при трихинеллоскопии консервированной свинины. Их следует слегка раздавить верхним стеклом компрессория, затем на каждый срез наносят каплю глицерина, разведенного пополам с водой, или 5%-ного раствора молочной кислоты (для просветления срезов). Время обработки и порядок исследования такие же, как и мороженой свинины.

Иногда встречаются обызвествленные капсулы, в которых личинки трудно рассмотреть. Для их просветления срезы мышц следует поместить в чашку Петри с 5 - 10% раствором соляной кислоты и поставить в термостат при 37°С на 20 - 30 мин. Затем срезы мышц переносят в компрессорий и микроскопируют.

ПОМНИТЕ! Погубить их может варка в течение не менее 2,5 часов при толщине кусков мяса не более 8 см! шашлык готовить с применением уксуса, который убивает личинки трихинелл.

Что может привести трихинеллу к размножению?

Разрушить или частично повредить «капсулу» личинки могут любые механические воздействия:

Травма - ушибы, царапины, раны. Часто травма стимулирует развитие процесса метастазирования опухолей.

Пункция - гистологическое исследование - механические повреждения «капсулы».

Операция, даже идеально выполненная, но не ликвидировавшая другие конгломераты паразитов в организме. Известно, что у большинства хирургов подход общий: опухоль - оперировать, независимо от ее доброкачественности.

У онкологов - то же самое: опухоль - цитология – пунк ция - диагностическая гистология. В результатах анализа - атипичные клетки, и выставляется «клеймо» - рак. Оперировать! Облучать! Химиотерапию! А оперативное вмешательство дает выход личинкам или усиливает агрессию родителей-паразитов, живущих в кишечнике.

Электрофизиотерапия дает микротрещины в капсуле или разрушает капсулу и дает выход личинкам. Интуитивно, видя стимуляцию развития и распространения опухолей после физиотерапевтических процедур, онкологи запретили этот метод лечения всем своим пациентам.

Иглоукалывание - рука неопытного иглотерапевта может нарушить целостность паразитарного конгломерата. Опять же интуитивно онкологи Европы запретили этот метод лечения при опухолевом заболевании. В Китае - разрешено, но там ученику доверяют взять в руки иглу не ранее чем после двух лет обучения.

Сауна, парная - воздействие жара влечет расширение сосудов. А при наличии воспалительных участков вокруг капсулы может усилиться приток лейкоцитов, что приведет к обострению воспаления. В результате - расплавление стенки сосуда и микропрорыв в капсуле

При диагностике заболевания надежным методом считается биопсия мышечной ткани и иммунологические реакции, особенно кожно-аллергическая проба. Огромное значение имеет и опрос больного, так как заражение обычно носит массовый характер.

Значение имеет общественная профилактика:

1. строгий санитарно-ветеринарный контроль, осмотр туш животных на трихинеллез - при обнаружении трихинелл мясо подлежит уничтожению, так как термическая обработка не эффективна;

2. зоогигиенические условия содержания свиней (предупреждение возможного поедания ими крыс);

3. борьба с крысами.