Лабораторна робота № 8. Мікробіологічне дослідження повітря

1. Теоретична частина

Санітарно-бактеріологічний аналіз повітря проводять з метою визначення біологічного показника забруднення мікрофлорою носоглотки людини, а також безпосереднього виявлення патогенних стафілококів, синьогнійної паличок та інших грамнегативних умовно-патогенних бактерій - збудників внутрішньолікарняних інфекцій. Для повітря санітарно-показовими мікроорганізмами обрано - Streptococcus haemolyticus, Streptococcus viridans, Staphylococcus aureus.

Санітарно-бактеріологічний аналіз повітря закритих приміщень проводять методом осідання на чашки (седиментації) і аспіраційних способом за допомогою приладу Кротова.

Метод седиментації. У приміщеннях, де проводять мікробіологічний аналіз повітря, встановлюють відкриті чашки з МПА на 20 хв. Потім чашки закривають і інкубують в термостаті при 37 ˚ С 24 години. Після чого підраховують число вирослих колоній, вимірюють діаметр чашки з метою визначення її площі.

Для підрахунку кількості м/о на 1 м³досліджуваного повітря використовують формулу Омеленского. Вона виведена на підставі експериментальних досліджень, які показали, що на площі чашки Петрі, в межах 100 см³за 5 хвилин осідає стільки м/о, скільки їх міститься у 10 дм³повітря. Повітря вважається чистим у мікробіологічному відносно якщо в 1 м³мікробне число не більше 1000.

N - мікробне число, а - число колоній МПА; F - площа чашки Петрі; t - час експозиції.

2. Експериментальна частина

2.1. Визначення мікробного числа повітря.

2.1.1. Стерильну чашку Петрі з МПА відкрити і витримати в приміщенні протягом 20 хвилин. Потім чашку закрити, підписати і інкубувати в термостаті протягом 24 годин при температурі 37 ˚ С.

2.1.2. Розрахувати мікробне кількість повітря за формулою Омеленского.

2.2. Вивчити тинкторіальних і культуральні властивості всіх м / о з посіву повітря.

2.2.1. Зарисувати всі виросли колонії на чашці.

2.2.2. Приготувати фіксований мазок-препарат кожного виду м / о. Фарбувати за Грамом. Дослідити вімерсійноїсистемі.

2.2.3. Заповнити таблицю.

Вид колоніїм/о

Розмір

Обрис

Краї

Поверхня

Профіль

Однорідність

Консистенція

Колір

3. Контрольні питання

3.1. Методи визначення мікробного числа повітря.

3.2. Мікробіологічні нормативи повітря приміщень (аудиторія, коридор, лабораторія, туалет, столова).

Лабораторна робота № 9. Санітарно-мікробіологічне дослідження води. Визначення мікробного числа води

1. Теоретична частина

Санітарно-мікробіологічне дослідження води проводять з метою санітарного контролю і за епідеміологічними показниками на наявність патогенних бактерій і ентеровірусів. Для води санітарно-показковими мікроорганізмами обрано - E. coli, Streptococcus faecalis.Визначення мікробного числа води передбачає дослідження загальної кількості аеробів і факультативних анаеробів в 1 мл досліджуваної води, здатних при 37 ˚ С протягом 24 годин утворювати на МПА колонії, які видимі неозброєним оком і при збільшенні в 2-5 разів. У залежності від ступеня забруднення води готують послідовно 10-кратні розведення від 1: 10 для чистих до 1:10 000 для стічних вод.Мікробне число питної води не повинно перевищувати 100 мікробних клітин в 1 мл.

Експериментальна частина

Матеріал та обладнання: спиртівки, бактеріологічні петлі, штативи, стерильні чашки Петрі з МПА, термостат, культура м/о, етиловий спирт, світловий мікроскоп, предметні скла, набір барвників для фарбування за Грамом.

Мікробіологічний аналіз водопровідної води

1. Набрати 1 мл досліджуваної води в стерильний шприц, внести її в стерильну чашку Петрі і зверху залити 10 - 12 мл розтопленого і охолодженого до 45 ˚ С МПА.

2. Потім чашку закрити, підписати і інкубувати в термостаті протягом 24 годин при температурі 37 ˚ С.

3. Вивчити тинкторіальні і культуральні властивості всіх м/о з посіву води.

   1. Підрахувати за допомогою лупи всі колонії м/о, що виросли на чашці Петрі. Нарисувати.

   2. Приготувати фіксований мазок-препарат кожного виду м/о. Пофарбувати за Грамом. Дослідити в імерсійної системі. Визначити мікробне число води.

   3. Заповнити таблицю. Визначити мікробне число води та вказати на відповідність санітарно-мікробіологічним нормам.

Вид колонії м/о

Розмір

Обрис

Краї

Поверхня

Профіль

Однорідність

Консистенція

Колір

3. Контрольні питання

3.1. Поняття про мікробіологічний контроль водопровідної води.

3.2. Поняття про мікробіологічний аналіз води.

3.3. Мікробіологічні нормативи для водопровідної води, колодязної води, води натуральних водойомів (озера, ріки, ставки) та ін.

Література

1. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии / Под. ред. В.В. Теца. – Изд. 2-е, перераб. и доп. – М.: Медицина, 2002. – 352с.

2. Микробиология: Руководство к лабораторным занаятиям: Учеб. пособие для студентов высш. учеб. заведений / И. Л. Дикий, И.И. Сидорчук, И. Ю. Холупяк и др. – Х.: Узд-во НфаУ: Золотые страницы, 2002. – 444 с.