19. Проба Легаля на кетоновые тела

Качественные реакции на кетоновые тела основаны на их взаимодействии с нитропрусидом натрия в щелочной среде и образовании окрашенных комплексных соединений.

К 1мл мочи прибавить 2 капли 5% раствора нитропрусида натрия (готовится ex tempore!!! из расчета 50 мг реактива на 1 мл воды) и 0,5 мл 10% раствора едкого натра. Потом прибавить 0,5 мл ледяной уксусной кислоты (свободной от ацетона!) и определить окраски.

Реакция считается положительной, если после добавления уксусной кислоты раствор сохраняет вишнево-красная окраску. Реакцию считают положительной и при слабо-розовой окраске, если моча хорошо подкислена.

Можно определять кетоновые тела (ацетон) в моче с помощью сухого реактива. Сухой реактив: 1 г нитропрусида натрия, 20 г сульфата аммония, 20 г карбоната натрия тщательно растереть в ступке к получению однородного порошка. Порошок сохраняется в сухом месте в хорошо закрытой стеклянной банке.

На белую фильтровальную бумагу кладут стекло, на него помещают небольшое количество сухого реактива (на кончике ножа) и наносят 2-3 капли мочи. При наличии кетоновых тел (ацетона), на протяжении 2-3 минут появляется окраска от розового к темно-фиолетовому, в зависимости от количества кетоновых тел. Окраски оценивают по шкале от 0 к ++++.

Интерпретация результатов: в норме в моче содержится минимальное количество кетоновых тел, которое не определяется обычными качественными пробами. Кетонурия у детей встречается чаще, чем у взрослых. Это поясняется лабильностью обмена углеводов и выраженной склонностью к кетозу. Кетонурия является специфическим диагностическим признаком при синдроме ацетонемической рвоты у детей; нарушениях режима питания, голодании, истощении, гипертермических состояниях, токсикозе, диабете, тиреотоксикозе, печеночных формах гликогенозов и других состояниях, которые протекают с нарушением углеводного обмена.

20. Тест с цетилтриметиламониумбромидом (цтаб) на мукополисахариды

К 5мл мочи прибавить 1мл 2,5% раствора ЦТАБ и оценить образование преципитата на протяжении 30 минут.

Реактив: 2,5% раствор ЦТАБ в 1 Г цитратном буфере, рН 5,75.

Для приготовления буфера: 210 г лимонной кислоты растворяют в 500 мл дистиллированной воды. К раствору прибавляют 150 мл 20 N раствора NaOH, перемешивают и охлаждают к комнатной температуре. Доводят рн до 5,75 с помощью 20 N раствора NaOH (около 15мл). Общий объем буфера доводят до 1л.

Флоккулентный осадок разной степени выраженности наблюдается у больных с синдромом Гурлера, Хантера, Марфана, а также при артроаниходисплазии, множественных экзостозах, ревматоидном артрите, кретинизме, карциноматозах.

21. Тест на медь (по показаниям).

Материал для исследования: суточная моча. Реактивы: концентрированная соляная кислота, раствор диетилдитиокарбамата свинца в четыреххлористом углероде. 100 мг диетилдитиокарбамата натрия растворяют в 50 мл воды, 100 мг уксуснокислого свинца – в 50-100 мл дистиллированной воды. Оба раствора слить в делительную воронку, где образуется белый осадок диетилдитиокарбамата свинца, прибавить 250 мл четыреххлористого углерода (CCl₄) и взболтать. Осадок растворяется. Водный пласт удаляют, а пласт CCl₄ фильтруют и доводят его объем до 500 мл. Готовый реактив можно беречь в холодильнике в посуде из темного стекла до 4 месяцев.

Для определения меди к 10 мл мочи прибавить 1 каплю концентрированной НCl и 2 мл реактива. Пробирку закрыть, энергично встряхнуть, оставить на 30 минут, после чего наблюдают окраску.

Появление желтой окраски в нижнем пласте (CCl₄) указывает на содержимое меди ~ 10 мкг%. Тест положительный при болезни Вильсона-Коновалова.