22. Проба на пролин (на фильтровальной бумаге)

Фильтровальную бумагу смочить в изатиновом растворе. Высушить бумагу при комнатной температуре.

Нанести 1 каплю мочи, после чего бумагу положить в сухожаровой шкаф при температуре 100⁰ С в течение 10 мин.

После этого промыть бумагу 1H раствором HCl, а потом в дистиллированной воде.

Реактивы: Приготовить 0,2 % раствор изатина в ацетоне (0,2 г на 100 мл ацетона). Сохранять в холодильнике.

Изатиновый реактив готовится ex tempore: к 9,6 мл 0,2% раствора изатина в ацетоне прибавляют 0,4 мл ледяной уксусной кислоты.

Положительным результат считается при появлении окраски от голубого к синей. Характер окраски определяется излишком следующих аминокислот: пролин – от голубого к синему, фенилаланин – сине-серый, триптофан – коричневый, смесь разных аминокислот – пурпурный. Реакция на пролин положительная при концентрации его в моче не меньшее 0,1мг/мл.

Для проведения внутреннего контроля качества необходимо приготовить стандартную смесь: вариант 1) на 100 мл 0,9% раствора NaCl прибавить 10 мг фенилпирувата, 50 мг α-кетоглутарата, 15 мг цистина, 30 мг ацетоацетата и 1 г глюкозы. Раствор стабилен в течение 3 месяцев в холодильнике. В таблице 6 представлен 2 вариант приготовления контрольного раствора для проведения контроля качества скрининг-тестов в моче.

Контроль качества скрининг-тестов в моче

№г/п	Ингредиенты	Количество вещества на 1000 мл раствора
1	Хлорид натрия	5,0 г
2	Глюкоза	1,0 г
3	Белок (альбумин)	1,0 г
4	Ацетон	8,0 мл
5	Хлорид кальция 10% (в ампулах)	10,0 мл
6	Фруктоза	1,0 г
7	Фенилаланин, гистидин, тирозин, лейцин, -аминомасляная кислота, триптофан	0,05 г каждого реактива

21