Опыт 4 Проба на понижение поверхностного натяжения

Реактивы и оборудование: 1. Пробирки. 2. Желчь, в разведении 1:5 3. Дистиллированная вода. 4. Серный цвет

Ход работы. Берут 3 пробирки. В 1-ю вносят 2 мл желчи, в разведении 1:5, во 2-ю – 0,5 мл разведенной желчи и 1,5 мл воды, а в 3-ю – 2 мл дистиллированной воды. Затем все пробирки ставят на 5 минут в холодную воду и всыпают на конце шпателя серный цвет. Замечают результат: в 1-ой пробирке вся сера опустилась на дно, во 2-ой на дне обнаруживается часть серы., а в 3-ей вся сера опустилась на дно. Следовательно, желчные кислоты снижают поверхностное натяжение.

Опыт 5 Реакции на ацетоновые тела а) Реакция на образование йодоформа

Реактивы и оборудование: 1. 0,5%-ный раствор ацетона. 2. 10%-ный раствор гидроксида натрия, 3.Йод в йодиде калия (раствор Люголя)

Ход работы В пробирку вносят 10 капель 0,5%-ного раствора ацетона, 10 капель 10%-ного раствора гидроксида натрия, и несколько капель йода в йодиде калия (раствор Люголя) и наблюдают образование желтого осадка йодоформа. Аналогичную реакцию проводят с мочой.

Б) Реакция с нитропруссидом натрия

Реактивы и оборудование: 1. 0,5%-ный раствор ацетона. 2. 0,5%-ный раствор ацетоуксусной кислоты 3. Ледяная уксусная кислота 4. 10%-ный раствор нитропруссида натрия 5. Концентрированный раствор аммиака

Ход работы: В одну пробирку наливают 10 капель 0,5%-ного раствора ацетона, а в другую – такое же количества 0,5%-ного раствора ацетоуксусной кислоты. Затем в обе пробирки прибавляют по 5 капель ледяной уксусной кислоты и по 3 капли 10%-ного раствора нитропруссида натрия. Встряхивают, после чего осторожно наслаивают по 0,5 мл концентрированного раствора аммиака. На границе двух жидкостей образуется красно-фиолетовое кольцо. Аналогичную реакцию проделывают с мочой.

В) Реакция на ацетоуксусную кислоту

Реактивы и оборудование: 1. 0,5%-ный раствор ацетоуксусной кислоты 2. 10%-ный раствор хлорного железа 3. Раствор нитропруссида натрия.

Ход работы. Приливают в пробирку 10 капель 0,5%-ного раствора ацетоуксусной кислоты и 2 капли 10%-ного раствора хлорного железа. Возникает вишнево-красное окрашивание. При выполнении аналогичной реакции с мочой надо учесть, что после добавления первых двух капель раствора хлорного железа образуется осадок фосфата железа. Поэтому для получения характерного окрашивания необходимо добавить еще 1-2 капли раствора нитропруссида натрия.

Лабораторная работа № 6 Переваривание жиров

Липаза содержится в семенах растений, особенно много ее в семенах клещевины. Липаза клещевины не растворяется в воде и проявляет свое действие в слабо кислой среде при рН 5, 0-4, 8.

Липаза злаков отличается от липазы клещевины тем, что проявляется свое действие при рН 8,0 и растворяется в воде.

Переваривание (гидролиз) жиров у человека начинается, хотя и в незначительной степени, в желудке. Главным местом переваривания жиров является двенадцатиперстная кишка. Масла представляют собой смеси сложных жирных кислот и глицерина Кроме того они содержат фосфатиды.

Качество масла характеризуется рядом физических и химических показателей (коэффициент преломления, кислотное число, йодное число, эфирное число, число омыления). Но самым существенным показателем качества масла является содержание в нем отдельных жирных кислот, главным образом, ненасыщенных - олеиновой, линолевой и линоленовой. Ненасыщенные жирные кислоты определяют пищевую ценность масла, т.к. они необходимы для нормального обмена веществ в животном и человеческом организме.

Ненасыщенные жирные кислоты легко окисляются, присоединяя кислород по двойным связям. При этом образуются перекиси и гидроперекиси, которые, в свою очередь, являются сильными окислителями других жирных кислот. Именно, вследствие окисления жира происходит его прогоркание.

Расщепление растительного жира с образованием глицерина и свободных жирных кислот происходит так же под действием фермента липазы.

Липаза панкреатического сока выделяется поджелудочной железой частично в неактивном состоянии, неактивная липаза под действием желчи переходит в активную. В кишечном соке также содержится липаза.

Гидролиз жиров удобнее всего наблюдать при помощи липазы панкреатического сока. В качестве субстрата лучше всего взять молоко, жир которого, находясь в эмульгированном состоянии, быстро расщепляется на глицерин и жирные кислоты. Последние можно оттитровать щелочью.

Реактивы и оборудование: материал поджелудочной железы, ступка, фильтры, колбы, бюретки, молоко, липаза, желчь, водяная баня, дистиллированная вода, 0,1н щелочь, фенолфталеин.

Ход работы. 1. Очищают поджелудочную железу от жира и измельчают ее ножницами.

2. Около 5 г измельченной поджелудочной железы помещают в ступу и тщательно растирают с 10-15 мл воды в течение 4-5 минут,

3. Полученную смесь отфильтровывают в пробирку через 2-3 слоя марли.

4. В 2 колбы (№ 1 и 2) отмеривают цилиндром по 50 мл молока и добавляют в каждую колбу по 2 мл отфильтрованной вытяжки липазы. В колбу № 1 добавляют, кроме того, 5-6 капель желчи (для активирования липазы).

5. Быстро перемешивают содержимое каждой колбы. Сейчас же отбирают по 10 мл жидкости и переносят их в две другие колбы (для титрования).

6. Первые две колбы (№ 1 и 2) помещают в водяную баню при 37°С.

7. В колбы для титрования прибавляют по 10 мл дистиллированной воды и по 2-3 капли раствора фенолфталеина.

8. Оттитровывают содержимое каждой колбы 0,1н щелочью до слабо розового окрашивания при непрерывном и тщательном помешивании. По окончании титрования записывают результаты, содержимое выливают, и колбы тщательно моют.

9. Еще 3-4 раза каждые 15 минут берут из колбы № 1 и 2 пробы по 10 мл и оттитровывают их с водой и фенолфталеином, как описано выше.

10. Сравнивают объем 0,1н щелочи. пошедшие на титрование каждой пробы из колб № 1 и 2 и откладывая их по времени, вычеркивают кривые расщепления жира.

Так как гидролиз идет постепенно, количество освобождающихся жирных кислот нарастает во времени.

Как видно из приведенного примера, желчь (собственно соли желчных кислот) имеет большое значение для переваривания даже такого сильно эмульгированного жира, как жир молока. Роль желчи для переваривания других жиров еще важнее, так как, помимо активации липазы, желчь переводит жиры в эмульгированное состояние (а также способствует всасыванию жирных кислот). При недостаточном поступлении желчи в кишечник жиры переходят в кал почти неизменными. Так, например, при закупорке желчного протока в кале обнаруживается много неусвоенного жира.