- •9. Типы и механизмы питания и дыхания бактерий. Ферменты бактерий и их классификация. Значение изучения ферментативной активности для идентификации бактерий. Типы и механизмы питания бактерий.
- •Методы изучения ферментативной активности бактерий.
- •2. Поликомпонентные эубиотики:
- •23. Микрофлора воды. Оценка санитарного состояния воды. Методы определения микробного числа воды и выявления колиформных бактерий. Нормативы.
- •24.Микрофлора воздуха. Оценка санитарного состояния воздуха закрытых помещений. Методы определения микробного числа воздуха и санитарно – показательных микроорганизмов. Засчет Омелянского.
- •25. Микрофлора почвы и ее значение. Показатели текущего санитарного надзора почвы. Методы определения общего микробного числа почвы и перфрингенс – тетра почвы.
- •1. Готовим 10-тикратные разведения (1:10, 1:100 и т.Д.).
- •2. Посев на мпа (для бактерий) и на среду Сабуро (для грибов): 1 мл в глубину агара или 0,1 мл на поверхность агара.
- •3. Инкубация: при 24с (для грибов) и 37с (для бактерий).
- •I.По локализации: II.По механизму поражения :
- •2.Сосудистые;3.Опухоли
- •Методы определения активности антибиотиков.
- •32. Источники, механизмы и пути передачи инфекции. Роль микроорганизма, окружающей среды и социальных условий в развитии инфекционного процесса.
- •34. Современное понятие об иммунитете. Врожденный и приобретенный иммунитет. Виды приобретенного иммунитета. Особенности противовирусного иммунитета. Понятие об иммунитете.
- •38. Антигены, их свойства и виды антигенов. Антигенная структура бактериальной клетки.
- •43. II тип гиперчувствительности (цитотоксический). Механизм развития ( комплементзависимый цитолиз, фагоцитоз, антителозависимая клеточная цитотоксичность) и клинические проявления.
- •44. III тип гиперчувствительности (иммунокомплексный). Механизм развития и клинические проявления. Лечение и профилактика. Сывороточная болезнь, ее характеристика и профилактика.
- •46. Реакция агглютинации (ра), механизм и методы постановки. Ингридиенты и их получение. Использование ра в диагностике инфекционных заболеваний.
- •48. Реакция преципитации (рп), механизм и методы постановки (кольцепреципитация и преципитация в геле). Ингридиенты и их получение. Применение рп.
- •49. Реакция связывания комплемента (рск). Механизм, компоненты, постановка и применение.
- •50. Реакция гемагглютинации (рга) и реакция торможения гемагглютинации (ртга), механизм, компонентыи применение реакций.
- •52. Реакция нейтрализации токсина антитоксином и реакция нейтрализации вирусов. Механизм, компоненты, постановка и применение.
- •53. Реакции с применением меченых компонентов. Реакция иммунофлюоресценции (риф) и радиоиммунный анализ (риа). Механизм, способы постановки, компоненты реакций и их применение.
- •54. Реакции с применением меченых компонентов. Иммуноферментный анализ (ифа) и иммуноблотинг. Механизм, способы постановки, компоненты реакций и их применение.
- •55.Принципы иммунотерапии и иммунопрофилактики. Медицинские иммунобиологические препараты (мибп), их классификация. Краткая характеристика классов мибп.
- •56.Живые вакцины. Определение и классификация. Способы получения вакцинных штаммов. Приготовление живых вакцин, контроль и хранение. Преимущества и недостатки. Примеры бактериальных и вирусных вакцин.
- •57.Неживые вакцины. Определение и классификация. Корпускулярные цельноклеточные и цельновирионные вакцины. Приготовление. Преимущества и недостатки. Примеры.
- •1) Физические: температура, уф-лучи, ионизирующее излучение;
- •2) Химические: - формалин, спирт, ацетон, β-пропиолактон.
- •58. Субклеточные и субвирионные вакцины. Определение и получение. Преимущества и недостатки. Роль адъювантов. Примеры вакцин.
- •59. Молекулярные вакцины. Определение. Получение анатоксинов, их примеры и применение. Единицы специфической активности анатоксинов. Ассоциированные вакцины, их достоинства и примеры.
- •60. Сывороточные иммунные препараты. Лечебно – профилактические сыворотки и их классификация. Получение, очистка, единицы активности антитоксических сывороток, их применение.
- •61. Препараты иммуноглобулинов. Получение и применение. Гомологичные и гетерологичные иммуноглобулины, нормальные и направленного действия, их характеристика.
- •62.Иммуномодуляторы: экзогенные, эндогенные, синтетические. Примеры и применение. Классификация по механизму действия.
- •71. Характеристика возбудителя ботулизма. Эпидемиология, патогенез и клиника заболевания. Диагностика, профилактика и лечение ботулизма.
- •76.Характеристика возбудителей бруцеллеза. Патогенез, диагностика, лечение и профилактика бруцеллеза.
- •79.Характеристика возбудителя коклюша. Принципы лабораторной диагностики. Препараты для специфической профилактики и лечения.
- •80. Характеристика возбудителей газовой гангрены. Принципы лабораторной диагностики заболевания. Препараты для специфической профилактики и лечения.
- •83.Характеристика вирусов гриппа. Эпидемиология и диагностика гриппа. Использование ртга для серотипирования вирусов гриппа. Препараты для специфической профилактики и лечения.
- •84.Характеристика возбудителей вирусных гепатитов а и е. Патогенез гепатита а. Роль nk- клеток в патогенезе гепатита а. Диагностика и профилактика заболевания.
- •Возбудитель вирусного гепатита е.
- •85.Характеристика возбудителей полиомиелита. Патогенез полиомиелита. Использование реакции нейтрализации в диагностике полиомиелита. Профилактика и лечение заболевания.
- •87.Характеристика вируса кори. Эпидемиология и клиника заболевания. Принципы лабораторной диагностики. Препараты для специфической профилактики и лечения.
- •88. Характеристика возбудителей вирусных гепатитов в,с и д. Эпидемиология, диагностика, лечение и профилактика заболеваний. Использование ифа для обнаружения hBsAg и анти – hBs.
- •Возбудитель гепатита с.
- •89.Характеристика возбудителей малярии. Заражение, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, лечение и профилактика малярии.
- •90.Характеристика возбудителей амебиаза и токсоплазмоза. Заражение, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, лечение и профилактика заболеваний.
- •Возбудитель токсоплазмоза
- •92.Характеристика вируса бешенства. Патогенез, клиника и принципы лабораторной диагностики заболевания. Специфическая профилктика и лечение бешенства.
- •93.Характеристика возбудителя крымской геморрагической лихорадки. Механизм заражения. Принципы лабораторной диагностики. Препараты для специфической профилактики.
46. Реакция агглютинации (ра), механизм и методы постановки. Ингридиенты и их получение. Использование ра в диагностике инфекционных заболеваний.
РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ (РА) - это склеивание и выпадение в осадок микробных или других клеток (эритроцитов) под действием антител в присутствии электролита. Видимый эффект реакции - феномен агглютинации - образование осадка, который называется агглютинатом.
РА используют для:
Определения возбудителя, выделенного от больного
Определения антител в сыворотке крови больного
Определения группы крови
РА используют для серодиагностики (обнаружение антител в сыворотке крови больных) брюшного тифа и паратифа (реакция Видаля), бруцеллеза (реакция Райта), туляремии и лептоспироза. РА используют для сероидентификации (определения вида возбудителя, выделенного от больного) при кишечных инфекциях, коклюше, холере и др.
Компоненты реакции:
1. Антиген (агглютиноген) - это целые микробные или другие клетки; антиген имеет корпускулярную природу; это нерастворимый антиген.
2. Антитела (агглютинины) - находятся в сыворотке крови больного (неизвестные антитела) или в иммунной сыворотке (известные антитела).
3. Электролит – 0,9% раствор хлорида натрия.
47. О- и Н- диагностикумы. Диагностические сыворотки: агглютинирующие (неадсорбированные, адсорбированные групповые и монорецепторные), преципитирующие и антитоксические сыворотки. Примеры, получение и применение.
Получение диагностикума.
Выращенную на скошенном агаре чистую культуру возбудителя известного вида смывают 3-4 мл NaCl, помещают в стерильную пробирку, каким-либо способом убивают микробы (например, кипячением) и определяют густоту (3 млрд. микробных клеток в 1 мл). Если микробные клетки убивают высокой температурой, то получают О-диагностикум (О-антиген),
если же ее обрабатывают формалином, то получают Н-диагностикум (Н-антиген).
Примеры диагностикумов:
-сальмонеллезный диагностикум, бруцеллезный дигностикум, туляремийный диагностикум.
Получение агглютинирующих сывороток.
Животным (кроликам) 5-7 раз через неделю парентерально вводят в возрастающих дозах микробные диагностикумы. Этот процесс называется гипериммунизацией. Затем у них отбирают сыворотку крови, в которой содержатся антитела к тем микробам, из которых приготовлен диагностикум.
Если иммунизацию проводят О-диагностикумом, то получают О-агглютинирующие сыворотки (содержат О-антитела), если Н-диагностикумом - Н-агглютинирующие сыворотки.
Агглютинирующие сыворотки могут быть неадсорбированными (нативными) и адсорбированными:
Неадсорбированные (нативные) сыворотки содержат групповые антитела к нескольким близкородственным видам микробов.Если из нативной сыворотки извлечь (адсорбировать) групповые антитела путем взаимодействия с бактериями, имеющими групповые антигены, получаются адсорбированные сыворотки. Адсорбированные сыворотки содержат антитела к одному или нескольким антигенам одного вида микроба. Если сыворотки содержат антитела только к одному антигену, они называются монорецепторными или моновалентными, если к нескольким антигенам - групповыми адсорбированными сыворотками.
Примеры агглютинирующих сывороток:
-сальмонеллезная монорецепторная Н-агглютинирующая сыворотка,
-сальмонеллезная групповая адсорбированная О-агглютинирующая сыворотка,
-противохолерная О-агтлютинирующая сыворотка и др.
Титр агглютинирующей сыворотки - наибольшее разведение сыворотки, при котором еще обнаруживается реакция агглютинации с антигеном (титр зависит от количества антител в крови: чем больше антител, тем выше титр сыворотки).
Способы постановки РА.
Ориентировочная (пластинчатая) РА - проводится на предметном стекле.
Учет результатов реакции
-проводится по появлению хлопьев агглютината.
-Если выпадают хлопья - реакция положительна, т.е. антиген соответствует антителу и по антигену можно определить антитело или наоборот.
-Если хлопьев нет, и остается помутнение - реакция отрицательная.
Развернутая реакция агглютинации (в пробирках)
Развернутая реакция агглютинации
проводится в пробирках. Вначале готовят 2-хкратные разведения сыворотки крови больного человека от 1:50 до 1:1600 (6 пробирок). Две пробирки оставляют для контроля антигена и сыворотки. В контроль сыворотки добавляют только сыворотку в разведении 1:50, в контроль антигена - только антиген. Во все пробирки добавляют 0,1 мл антигена - диагностикума (О-или Н-) и ставят все пробирки в термостат при 37°С на 18-20 часов.
При серодиагностике заболеваний важно не просто обнаружить антитела к возбудителю, но и выявить их количество, т.е. установить такой титр антител, когда можно говорить о наличии заболевания, вызванного этим возбудителем. Этот титр и называется диагностическим титром. Еще более точные результаты дает выявление нарастания антител в парных сыворотках. Сыворотку больного отбирают в начале заболевания и через 3-5 или более дней. Если титр антител возрастает не менее, чем в 4 раза, следовательно, можно говорить о текущем заболевании.