Определение коагулазоположительных стафилококков

Сущность метода заключается в определении морфологии, характера роста на питательных средах и в способности отдельных стафилококков

ферментировать лецитиназу и коагулиговаль нитратную плазму крови кро­ликов под воздействием фермента коагулазы.

Ход анализа. Взвесь в количестве 0,2 см³ равномерно разнести по всей поверхности молочно-солевого агара, содержащего 6,5% хлористого натрия. Посевы термостатируют в течение 24ч при температуре 37ºС и 24ч выдер­живают при комнатной температуре.

На поверхности питательной среды колонии стафилококков имеют вид плоских или слегка выпуклых блестящих колоний с ровным краем. При этом на молочно-солевом агаре лучше выявляется пигмент (белый или золоти­стый), а на желточно-солевом агаре колонии стафилококков могут образовы­вать «радужный венчик», что является признаком их патогенности.

Из подозрительных колоний готовят препараты, окрашивают по Граму. При наличии стафилококков обнаруживаются грамположительные мелкие кокки, располагающиеся неправильными гроздьями.

Для подтверждения признаков патогенности ставят реакцию плазмокоа-гуляции. В пробирку с 0,5см³ цитратной плазмы крови кролика, разведенной физиологическим раствором в соотношении 1:4, вносят петлю чистой суточ­ной культуры стафилококка и ставят в термостат при температуре 37ºС ре­ак -цию учитывают через 3-4ч (не встряхивая пробирку) и оставляют в тер­мостате на сутки. Реакцию считают положительной, если коагулируется в сгусток.

Заключение. Для определения количества стафилококков учитывают ко­лонии стафилококков, давшие положительную реакцию плазмокоагуляции. При расчете на 1г продукта количество подсчитанных колоний умножают на степень разведения и на количество посеянного материала.

Определение клостридий перфингенс (сульфит-восстановителей)

Сущность метода заключается в специфическом росте клостридий пер­фингенс в среде Вильсона-Блера. Образуется почернение среды за счет сер­нистою железа.

Ход анализа. I см³ анализируемой взвеси стерильной пипеткой вносят в пробирку с 9 см³ среды, затем проводят последовательные пересевы на ана­логичные объемы среды, в результате чего получают возрастающие десяти­кратные разведения суспензии. Инкубацию проводят при 46°С в течение 8-12 часов. При наличии роста клостридий перфингенс образуется почернение среды.

Заключение. За положительный титр клостридий принимают то макси­мальное разведение суспензий, в посеве которой) произошло почернение среды. Например, если характерные изменения наблюдаются в пробирках с разведением 10', то счтают, что в исследуемом продукте будет 10(1 (или 1х10¹) клеток в 1 г; если характерные изменения наблюдаются в пробирках с разведением 10 ², то считают, что в исследуемом продукте будет 100 (или 1-10 ² ) микробных клеток в 1 г.

В готовых колбасах и копченостях не должно быть патогенной и услов­но-патогенной микрофлоры. При выявлении в колбасных продуктах (всех видов), копченостях сальмонелл, сульфитредуцирующих микроорганизмов, патогенных коагулазоположительных стафилококков, патогенных эшерихий, других патогенных микроорганизмов продукцию направляют на утилизацию.

Микробиологический анализ колбасных изделий неразрывно связан с санитарным контролем оборудования, тары, инвентаря и других объектов, которые размещены в колбасном цехе. Особенное внимание обращают на наличие щелей, пазов и углублений в столах, в таре, чанах и другом инвентаре. Для санитарно- микробиологического контроля этих объектов до работы или после уборки делают смывы и исследуют в лаборатории. Площадь смывов должна быть не меньшая 100см². При вияв­лении в смыве из этой поверхности свыше 300 микроорганизмов немедленно проводят дополнительную тщательную санитарную обработку цеха с повторным бактериологическим анализом.