14 Вимоги безпеки

Мікробіологічні дослідження з метою діагностики та профілактики кашлюкової інфекції проводять з дотриманням вимог біологічної безпеки відповідно до ДСП 9.9.5. -080 –2002 “Правила влаштування і безпеки роботи в лабораторіях (відділах, відділеннях) мікробіологічного профілю”

Додаток №1

Характеристика мікробів роду Bordetella

Тест	Вид мікроба
	В. pertussis	В. parapertussis	B. bronchiseptica
Терміни появи колоній (у годинах)	48-72	24-48	18-24
Розмір колоній (у мм)	1-2	2-4	2-4
Фарбування за Грамом	-	-	-
Рухливість	-	-	+
Ріст на простому агарі	-	+	+
Зміна кольору поживних середовищ (побуріння)	-	+	-
Оксидаза	+	-	+
Розщеплення сечовини	-	+	+*
Утилізація цитратів	-	-	+
Утворення пігменту з тирозину	-	+	-
Відновлення нітратів	-	-	+
Наявність глютаміндекарбоксилази	-	-	+
Аглютинація видовими специфічними неадсорбованими кашлюковими і паракашлюковими сироватками	+	+	+
Аглютинація монорецепторними сироватками до агглютиногенів (факторів)	+	-	-
фактор-1	+	-	-
фактор-14	-	+	-
фактор-12	-	-	+

* -позитивна реакція з’являється через 4 години.

Умовні позначення: “-“ - відсутність ознаки; “+”- наявність ознаки.

Додаток №2

Схема бактеріологічного дослідження

1.Перша доба. Посів досліджуваного матеріалу на середовища КВА, Борде-Жангу і інкубація в термостаті при 35 - 37°С.

п еніцилін (цефалексин)

і посудина з водою

3 5-37°С

на 72год.

2. Четверта доба дослідження (через 72 години):

1) вивчення характеру колоній на середовищах вирощування з використанням стереоскопічного мікроскопа;

2) відсів колоній для отримання чистої культури мікроба;

3. При наявності великої кількості колоній на середовищі вирощування:

1) приготування мазків, забарвлення їх за Грамом, мікроскопія;

2) постановка реакції аглютинації на склі зі специфічними неадсорбованими кашлюковими та паракашлюковими сироватками в розведенні 1:10 і специфічними монорецепторними сироватками до аглютиногенів (факторів) 1 і 14;

3) постановка проби на уреазу.

4. Видача попереднього позитивного результату проведеного дослідження.

КВА КВА, Борде-Жангу

при наявності великої кількості колоній

мікроскопія; РА з видовими сироватками; уреаза

5. П’ятий-шостий день дослідження (через 96-120 годин). Вивчення виділеної чистої культури у випадку наявності в досліджуваному матеріалі паракашлюкового або бронхісептичного мікробів:

а) вивчення характеру росту чистої культури і зміни кольору поживного середовища; приготування мазків і забарвлення їх за Грамом, мікроскопія;

б) постановка реакції аглютинації на склі з видовими неадсорбованими і монорецепторними сироватками до аглютиногенів (факторів) 1, 14 і 12;

в) постановка проби на уреазу й облік результатів; посів на середовище МПА з тирозином; при необхідності визначення рухливості шляхом посіву в стовпчик напіврідкого агару; посів на середовище Сімонса.

г) облік результатів 4-х діб дослідження;

д) визначення сероваріанту збудника кашлюку;

є) видача остаточної відповіді: позитивної чи негативної.

6. При відсутності росту підозрілих колоній на третю добу дослідження чашки із середовищем вирощування переглядають на четверту і п’яту добу.

Подальший хід дослідження продовжується за схемою:

МПА МПА Сімонса н/р 0,3 % агар сечовина

з тирозином

Додаток №3