Онкомаркер поджелудочной железы, желчного пузыря (са 19-9)

Код 1026

СА 19-9 представляет собой ганглиозид, синтез которого обусловлен наличием антигенов группы крови Льюиса. Таким образом, лица с относительно редкой группой крови, отрицательной к антигенам Льюиса (3-5% населения), характеризуются отсутствием необходимого фермента сиалилтрансферазы, необходимого для синтеза CA 19-9. У этих людей CA 19-9 остаются на очень низком уровне, даже при наличии неоплазии. В таких случаях соответствующим опухолевым маркером является CA 50. CA 19-9 присутствует в клетках эпителия и слизистых клетках желудка, кишечника, поджелудочной железы, печени и яичников. Повышенные значения СА 19-9 встречаются в 70-80% случаев рака поджелудочной железы, в 50-60% случаев заболеваний раком желудка, в 60% гепатобилиарных опухолей, в 30% опухолей прямой кишки, а также у некоторых пациентов с раком молочной железы, яичников, простаты, легких.

 

Материал: венозная кровь.

 

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается стабильной в течение 7 дней при

2-8 °C. Архивированная сыворотка может храниться при температуре -20 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

 

Метод: иммунохимический с электрохемилюминесцентной детекцией (ECLIA).

 

Анализатор: Cobas е 411.

 

Тест-системы: Roche Diagnostics (Швейцария).

 

Референтные значения в лаборатории ИООО«СИНЭВО»: до 34,0 Ед/мл

 

Коэффициент пересчета: Ед/мл = кЕд/л.

 

Основные показания к назначению анализа:

1. Мониторинг течения заболевания, доклиническая диагностика метастазирования и оценка эффективности проводимой терапии карциномы поджелудочной железы.

2. Наблюдение за пациентами с возможным рецидивом рака желудка – в сочетании с РЭА (раково-эмбриональным антигеном).

3. В комбинации с РЭА при наличии отрицательных карцином толстого кишечника

Интерпретация результатов: уровень CA 19-9 может быть положительным и при доброкачественных заболеваниях, особенно воспалительных заболеваниях кишечника, циррозе печени, и при аутоиммунных заболеваниях – ревматоидный полиартрит (33%), системная красная волчанка (32%) и склеродермия (33%).

 

Онкопатология (значительное повышение уровня):

1. Рак поджелудочной железы (чувствительность – 70-100%).

2. Рак желчного пузыря или желчных путей и первичный рак печени (при раке гепатобилиарной системы чувствительность – от 22 до 51%).

3. Рак желудка.

4. Колоректальный рак.

5. Рак молочной железы.

6. Рак яичников, матки.

Соматическая патология:

1. Острый и хронические гепатиты.

2. Холелитиаз (желчнокаменная болезнь).

3. Холецистит.

4. Цирроз печени.

5. Муковисцидоз.

Онкомаркер желудка (са 72-4)

Код 1028

CA 72-4 – высокомолекулярный гликопротеин, компонент поверхности эпителия. Этот белок экспрессируется самыми разнообразными карциномами – толстого кишечника, легких, яичников, эндометрия, поджелудочной железы, желудка, молочных желез. CA 72-4 используют, преимущественно, в комбинации с РЭА или СА519-9 – в целях контроля течения и терапии рака желудка, или вместе с СА-125 – в целях мониторинга рака яичников.

 

Рак желудка: в литературе приводят данные о диагностической чувствительности теста CA 72-4 при данной патологии от 28 до 80%, в среднем, около 40-46%. Степень повышения уровня CA 72-4 коррелирует со стадией заболевания. После хирургического вмешательства уровень CA 72-4 возвращается к норме (в среднем, за 3-4 недели). Данный маркер обладает более высокой чувствительностью к рецидивам заболевания, по сравнению с РЭА и СА 19-9. Комплексное применение этих тестов повышает диагностическую чувствительность и специфичность тестирования.

 

Рак яичников: данные по диагностической чувствительности теста варьируют от 47 до 80%.

 

Колоректальный рак: диагностическая чувствительность теста порядка 20-41%, при этом уровень маркера коррелирует с клинической стадией заболевания. После резекции опухоли концентрация CA 72-4 заметно снижается. При долгосрочном контроле постоянно повышенная концентрация CA 72-4 наблюдается в случаях остатков опухоли. Комбинированное использование CA 72-4 и РЭА увеличивает чувствительность тестирования к рецидивам заболевания.

 

Материал: венозная кровь.

 

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается стабильной в течение 7 дней при

2-8 °C. Архивированная сыворотка может храниться при температуре -20 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

 

Метод:иммунохимический с электрохемилюминесцентной детекцией (ECLIA).

 

Анализатор: Cobas е 411.

 

Тест-системы: Roche Diagnostics (Швейцария).

 

Референтные значения в лаборатории ИООО«СИНЭВО»: до 6,9 Ед/мл

 

Коэффициент пересчета: Ед/мл = кЕд/л.

 

Основные показания к назначению анализа:

1. В комплексе с клиническими методами исследования при первичной диагностике и в прогностических целях в случае рака желудка и яичников.

2. Оценка эффективности хирургического вмешательства и последующий мониторинг при раке желудка, яичников, колоректальном раке (при повышенной концентрации на момент первичной постановки диагноза).

Интерпретация результатов: повышение СА 72-4 можно наблюдать при доброкачественных заболеваниях молочной железы или печени, а также при беременности.

 

Повышенный уровень:

1. Рак желудка.

2. Рак яичников.

3. Рак молочных желез.

4. Рак толстого кишечника.

5. Рак легких.

6. Эндометриоидные опухоли.

7. Рак поджелудочной железы.

8. Доброкачественные заболевания (панкреатит, цирроз печени, легочные заболевания, доброкачественные заболевания яичников, ревматические заболевания, гинекологические болезни, заболевания молочной железы, доброкачественные заболевания желудочно-кишечного тракта).

АІЖ, бауыр, сүт безі, өкпе, жыныс мүшелерінің ісіктеріне жүргізілетін скринингтің лабораторлы әдістері. Сүт безінің, жатыр мойынының ісіктеріне, гепатома, асқазан, ұйқы безі ісігі, колоректальді ісік пен өкпе ісіктеріне күмәнданғандағы зерттеу алгоритмі.

Билет №17

Молекулярно-генетические методы в клинической практике. Основные предикторы генетической предрасположенности (ДНК-диагно­стика) развития сердечно-сосудистой патологии, тромбофилии, нарушения обмена веществ, болезни ЖКТ, аутоиммуных заболеваний.

Молекулярно-генетический  метод основан на анализе нуклеиновых кислот, в первую очередь, молекул ДНК.  Основной целью этих методов является диагностика мутаций, исследование их ассоциации с наследственными заболеваниями, а также выявление  гетерозиготных и гомозиготных носителей мутации.

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) до сих пор занимают лидирующую позицию в структуре смертности населения, несмотря на современные достижения в области медицины. Среди всей когорты ССЗ аритмии сердца и нарушения проводимости являются важнейшими проблемами кардиологии, так как именно они служат первопричиной внезапной смерти, которая, по данным Американской ассоциации сердца, составляет 50% всех смертей от заболеваний сердечно-сосудистой системы. Одной из причин, приводящих к развитию опасных для жизни аритмий, является синдром слабости синусового узла (СССУ). Тяжелые последствия развития СССУ стимулируют интенсивное изучение всех звеньев его этиологии и патогенеза. С учетом того, что на начальных этапах нарушение функции синусного узла может протекать бессимптомно или малосимптомно особое значение придают раннему выявлению указанной сердечно-сосудистой патологии. Изучение структуры генетической предрасположенности к СССУ позволит идентифицировать лиц с высоким риском развития данного синдрома, оптимизировать лечение и профилактику осложнений этого состояния. В настоящее время получены данные молекулярногенетических исследований, подтверждающих, что СССУ может быть обусловлен полиморфизмами определенных генов, таких как ген вольтаж-зависимых натриевых каналов сердца (SCN5A), ген потенциал-зависимых натриевых каналов сердца (HCN4), ген анкирина-2 (ANK2). Однако представляют интерес полиморфизмы некоторых других генов, роль которых ранее не была изучена: ген а-2бета-адренорецепторов (ADRA2B), ген фермента эндотелиальной синтазы NO (NOS3), ген белка коннексина-40 (Сх40), полиморфизм AG гена SCN5A, а также полиморфизма 2161С>Т (Arg721Trp) гена тяжелых цепей сердечного миозина (MYH6), который, по данным Н. Holm, связан с развитием СССУ у исландского населения. Связывание лиганда адреналина с а-2бета-адренорецептором приводит к опосредованной белком G активации аденилатциклазы, стимулирующей образование цАМФ. Образовавшийся цАМФ активирует протеинкиназы, открывающие ионные каналы кардиомиоцитов для ионов натрия. Оксид азота, синтезированный с помощью фермента NOS3, стимулирует гуанилатциклазу, способствующую образованию цГМФ, который активирует зависимые протеинкиназы, открывающие ионные канаты кардиомиоцитов. Нарушение формирования ADRA2B и образования NOS3 приводит к замедлению спонтанной диастолической деполяризации миокарда, уменьшению частоты сердечных сокращений и формированию СССУ. Коннексины представляют собой белки-олигомеры, формирующие межклеточные каналы, называемые gapсвязующими. Через эти каналы ионы и небольшие молекулы циркулируют между соседними клетками. Нарушение формирования этих каналов также может приводить к развитию СССУ. Целью настоящего исследования являлось изучение влияния полиморфных аллельных вариантов генов (ADRA2B, NOS3, Сх40, MYH6, SCN5A) на возникновение и течение идиопатического СССУ.

• Муковисцидоз 

Анализ на носительство самой частой мутации в гене муковисцидоза CFTR - дельта F508.

• Гемохроматоз 

Анализ на носительство мутаций (C282Y, H63D и S65C) в гене HFE, ответственных за развитие гемохроматоза. Более подробная информация о заболевании и исследуемых мутациях.

• Атопический дерматит 

Анализ на носительство мутаций 2282del4 и R1501X в гене филаггрина FLG, которые значительно повышают риск развития атопического дерматита. Информация о наличии у больного атопическим дерматитом этих мутаций может влиять на тактику ведения данного больного.

• Вульгарный ихтиоз 

Анализ на носительство мутаций 2282del4 и R1501X в гене филаггрина FLG, ответственных за развитие вульгарного ихтиоза

• Альфа1-антитрипсиновая недостаточность 

Анализ на носительство двух самых частых мутаций, ответственных за развитие альфа1-антитрипсиновой недостаточности в гене AATH (PIZ, PIS).

• Синдром Жильбера 

Анализ на носительство динуклеотидной инсерции в области ТА-повтора в промоторном районе гена UGT1А1 (6ТА/7ТА). У гетеро- и гомозиготных носителей динуклеотидной инсерции возможна манифестация болезни Жильбера с развитием токсических реакций при приеме некоторых лекарственных препаратов: анаболических стероидов, глюкокортикоидов, андрогенов, рифампицина, циметидина, хлорамфеникола, стрептомицина, салицилата натрия, ампициллина, кофеина, этинилэстрадиола, парацетамола, иринотекана, нилотиниба.

• •        Нарушения сперматогенеза.

Анализ микроделеций локуса AZF Y-хромосомы

Микроделеции AZF локуса Y-хромосомы, который содержит большое количество генов, ответственных за формирование сперматозоидов. Наиболее часто встречаются делеции AZFa, AZFb и AZFc (у 11 % мужчин с азооспермией и у 8 % мужчин с олигозооспермией). Исследование на наличие этих мутаций позволяет прогнозировать эффективность лечебных процедур при мужском бесплодии.

• Предрасположенность к сахарному диабету 2-го типа 

Ген TCF7L2 (rs7903146, С/T).

• Диагностика дисбеталипопротеинемии или III тип гиперлипидемии 

Анализ полиморфизма гена аполипопротеина Е (е2/е3/е4).

• Диагностика семейной гиперхолестеринемии 

Секвенирование экзонов гена рецептора липопротеинов низкой плотности LDLR

• Диагностика MODY2 сахарного диабета 

Секвенирование экзонов гена GCK при MODY диабете

• Определение чувствительности Helicobacter pylori к кларитромицину

Анализ на наличие мутаций A2142G и A2143G в гене 23S rRNA микроорганизма Helicobacter pylori. ДНК выделяется из биоптата слизистой желудка.

2-я группа. Полиморфизмы генов, знание которых может быть потенциально полезным.

• Генетические полиморфизмы, ассоциированные с риском развития тромбофилии

(по материалам фирмы «ДНК-технология»)

Тромбофилия – заболевание системы крови, проявляющееся в нарушении гемостаза и склонности к развитию рецидивирующих сосудистых тромбозов (преимущественно венозных) различной локализации, и часто возникающее в связи с беременностью, после хирургического вмешательства, травмы или физического перенапряжения. Заболевание обусловлено генетической (у 30-50% с тромботическим состоянием) или приобретенной патологией клеток, а также дефектами свертывающей системы крови. Наследственная тромбофилия представляет собой предрасположенность к тромбозу вследствие генетических дефектов как свертывающей, так и противосвертывающей (антикоагулянтной и фибринолитической), системы крови. Генетический анализ позволяет выявить полиморфизмы генов факторов и компонентов системы гемостаза, которые приводят к их аномальному синтезу или нарушению функциональной активности. Это позволяет оценить риски развития сердечно-сосудистой патологии и акушерско-гинекологических осложнений, тромбоэмболии, венозных и артериальных тромбозов. Скрининг генетических особенностей тромбофилий помогает на раннем этапе выявить группу риска и внести соответствующие коррективы в тактику ведения пациентов.

Дополнительные факторы риска развития тромбофилических состояний:

• Приобретенные заболевания крови (тромбоцитозы, этитремия, антифосфолипидный синдром)

• Атеросклероз

• Мерцательная аритмия

• Варикозное расширении вен нижних конечностей

• Артериальная гипертензия

• Травмы и хирургические вмешательства

• Злокачественные новообразования

• Ожирение

• Беременность и послеродовый период

• Прием гормональных препаратов

• Химиотерапия

• Курение

• Гипокинезия

• Чрезмерные физические нагрузки

Показания к генетическому анализу:

• Случаи наследственной тромбоэмболии в семье

• Случаи тромбоза в анамнезе

  • единичный тромбоз до 50 лет

  • повторные тромбозы

  • случай тромбоза в любом возрасте при наличии семейного анамнеза

  • тромбозы необычной локализации (портальные, брыжеечные, мозговые вены)

  • тромбоз неясной этиологии после 50 лет

• Применение гормональной контрацепции или гормональной заместительной терапии у женщин, имеющих тромбозы в анамнезе, имеющих родственников 1 степени родства с диагностированной наследственной тромбофилией или семейный анамнез тромбоэмболических осложнений

• Осложненный акушерский анамнез

• Все женщины, планирующие беременность

• Ситуации высокого риска

  • массивные хирургические вмешательства

  • длительная иммобилизация

• Профилактика тромботических осложнений у больных злокачественными новообразованиями

Ген	Полиморфизм	«Нейтральный» генотип	Генотип «риска»	Проявления генотипа «риска»
F2-протромбин (фактор II свертывания крови)	20210 G>A	G/G	G/A, A/A Частота – 2-5%.	Повышение уровня протромбина в плазме на 30%. Потеря плода в I триместре, невынашивание беременности, фетоплацентарная недостаточность, гестозы, задержка развития плода, отслойка плаценты. Венозные тромбозы, повышение риска послеоперационной смерти. Ишемический инсульт, увеличение риска развития тромбоэмболии в 3 раза.
F5 (фактор V свертывания крови)	1691G>A	G/G	G/A, A/A, частота – 2-3%	Резистентность к активированному к протеину C. Потеря плода во II и III триместрах, тромбоз вен нижних конечностей, ТЭЛА, тромбозы церебральных сосудов и ишемический инсульт, артериальные тромбозы в молодом возрасте. При приеме гормональных контрацептивов риск тромбозов повышается в 6-9 раз.
F7 (фактор VII свертывания крови)	10976 G>A	G/G	G/A, A/A частота – 10-20%	Понижение уровня фактора VII в крови на 30%. 2-х кратное снижение риска инфаркта миокарда. У новорожденных геморрагический диатез,кровотечение из пупочной ранки, слизистой оболочки носа, желудочно-кишечного тракта.
F13A1 (фактор XIII свертывания крови)	9 G>T	G/G	G/T, T/T частота – 12-20%	Снижение уровня фактора XIII в крови. Уменьшение риска венозного тромбоза. Повышенный риск на фоне антикоагулянтной терапии. Геморрагический синдром, олигоспермия у гомозиготных мужчин, гемартрозы
FGB – фибриноген (фактор I свертывания крови)	-455 G>A	G/G	G/A, A/A частота – 5-10%	Повышение уровня фибриногена в крови на 10-30%. Повышенный в 2,6 раза риск инсульта с многоочаговостью поражений. Привычное невынашивание беременности, фетоплацентарная недостаточность, гипоксия плода.
Серпин 1 (PAI-1) –антагонист тканевого активатора плазминогена	-675 5G>4G	5G/5G	5G/4G, 4G/4G частота – 5-8%	Повышение уровня PAI-1 в крови, снижение фибринолитической активности крови. Привычное невынашивание беременности, увеличение риска развития тяжелого гестоза в 2-4 раза. Гипоксия, задержка развития и внутри утробная смерть плода. Повышение риска коронарных нарушений в 1,3 раза.
ITGA2-α2 интегрин (тромбоцитарный рецептор к коллагену)	807 C>T	С/С	С/Т, Т/Т частота – 8-15%	Повышенный риск послеоперационных тромбозов. Изменение свойств рецептора, приводит к увеличению скорости адгезии тромбоцитов. Повышенный риск инфаркта миокарда (в 2,8 раза), ишемического инсульта. Развитие тромбоэмболических заболеваний, постангиопластические тромбозы.
ITGB3 -b интегрин (тромбоцитарный рецептор фибриногена)	1565 T>C	Т/Т	С/Т, С/С частота – 20-30 %	Низкая эффективность терапии аспирином. Изменение свойств рецептора приводит к гиперагрегации тромбоцитов. Повышенный риск инфаркта миокарда, тромбоэмболия. Посттрансфузионная тромбоцитопения. Повышенный риск потери плода на ранних сроках

Для верификации диагноза и разработки тактики лечения необходимы дополнительные исследования:

• АЧТВ

• Протромбиновое время в секундах

• Фибриноген

• Агрегация тромбоцитов

• D-димер

Клиникалық тәжірибедегі молекулярлы-генетикалық әдістер. Жүрек-қан тамыр патологияларының, тромбофилиялар, зат алмасу бұзылыстары, АІЖ және аутоиммунды аурулардың дамуының генетикалық бейімділіктің (ДНК-диагностика) негізгі предикторлары.

Билет №18

Исследования мочи и биохимические исследования при патологии почек. Лабораторные синдромы при заболеваниях почек: мочевой, нефритический, нефротический, инфекции мочевыводящих путей.

Бүйрек патологиясында зәрді, биохимиялық зерттеуді жүргізу. Бүйрек ауруларындағы лабораторлы синдромдар: зәрді, нефритикалық, нефротикалық, зәр шығару жолдарының инфекциясы.

Общий анализ мочи относится к обязательным диагностическим процедурам, которые назначаются всем пациентам, обратившимся в здравоохранительное учреждение.

При общем анализе мочи для расшифровки исследуются такие параметры, как:

• удельный вес (относительная плотность),

• цвет,

• прозрачность,

• запах,

• pH (реакция мочи или кислотность),

• содержание белка,

• содержание глюкозы,

• содержание кетоновых тел и желчных пигментов.

Удельный вес — показатель, который отражает способность почек к концентрации. В норме удельный вес мочи составляет 1,020-1,024. Повышение показателя может быть признаком сахарного диабета, понижение — несахарного диабета, чрезмерного потребления жидкости.

Цвет мочи при общем анализе — условный показатель, зависящий от времени забора, употребления определенной пищи и лекарств. В норме моча здорового человека должна быть прозрачной и иметь соломенно-желтый цвет. Красноватый оттенок может говорить о повреждении мочевого пузыря и мочевыделительных путей, наличии опухоли.

Моча здорового человека должна быть прозрачной. Причиной мутности являются бактерии и слизь, свидетельствующие о наличии воспалительного процесса.

Появление специфического запаха (ацетона, тухлого мяса и др.) говорит о нарушении обмена веществ, инфекционных заболеваниях, развитии диабета и других болезней. В норме моча должна обладать нерезким неспецифическим запахом.

pH в норме варьируется от 5,0 до 7,0 (слабокислая или нейтральная реакция). Изменение уровня pH наблюдается при сахарном диабете, обезвоживании, гипокалиемии, хронической почечной недостаточности, инфекции мочевыводящих путей и других нарушениях. Изменения могут происходить также на фоне употребления некоторых витаминов и медикаментов.

Концентрация белка не должна превышать 0,033 г/л. Превышение уровня может указывать на наличие нефротического синдрома, воспалительного процесса и других патологических состояний.

Глюкозы и кетоновых тел в моче здорового человека не должно выявляться. Их появление во многих случаях свидетельствует о сахарном диабете.

Что касается желчных пигментов, в моче могут присутствовать уробилиноген (норма 5-10 мг/л) и билирубин. Наличие билирубина характерно для пациентов, страдающих заболеваниями печени.