Практическая работа №3 Группы гистологических красителей

Цель занятия: Познакомиться с разными типами окрашивания препаратов.

 Задание:

1. Прочитайте статью. Заполните таблицу 4, перечислив основные группы красителей.

Таблица 4

Основные группы красителей

Тип красителя	Методика окрашивания	Окрашиваемые структуры

Процесс окраска гистологических срезов.

Цель окраски заключается в том, чтобы различные компоненты клеток и тканей выявлялись более отчетливо. Всякая окраска начинается как чисто физический процесс, при котором находящийся в растворе краситель проникает в тканевые поры и накапливается по физическим законам (капиллярность, поверхностное натяжение). За этой фазой следует вторая, представляющая собой химический процесс взаимодействия красителя с химическими компонентами клетки. На третьей стадии во время дифференцировки можно с помощью более сильного растворителя модифицировать получившиеся в начале химические соединения.

Процесс гистологической окраски по своей природе настолько сложен, что трудно выявить какую-либо теорию, которая во всей полноте объясняла бы его сущность. Установление того факта, что определенные компоненты клеток и тканей воспринимают и удерживают различные красители с большей или меньшей интенсивностью, позволяет выявлять и отличать друг от друга многочисленные структуры, которые из-за своих показателей преломления были не видны или не ясно видны в неокрашенном состоянии.

Красители, используемые в гистологии, можно классифицировать по-разному. Как правило, это сложные органические соединения, поведение которых определяется их химическими свойствами. Существуют основные, кислотные и нейтральные красители. Основной краситель представляет собой красящее основание или его соль. Соответственно кислотный краситель - красящая кислота или ее соль. При соединении водных растворов основного и кислотного красителей возникает нейтральный краситель (соль красящего основания и кислоты). Сродство клеточной структуры к основным красителям носит название базофилии, к кислым - оксифилии.

Типы гистологических окрасок.

Если срезы оставляют в красителе лишь до тех пор, пока они не будут достаточно окрашены, то говорят о прогрессивной окраске. Регрессивной называют такую окраску, при которой срезы сначала перекрашивают, а затем избыток красителя удаляют путем отмывки (дифференцировки) в соответствующей жидкости. Различают прямую (субстантивную) и непрямую (аджективную) окраски. Если объект сразу же окрашивается в растворе красителя, то это прямая окраска. Если перед окраской необходима предварительная обработка (протрава), то это непрямая окраска. В зависимости от того, какие структуры клетки окрашивают красители, их разделяют на две группы: ядерные и цитоплазматические. К ядерным красителям относятся: гематоксилин, кармин, метиловый зеленый, толуидиновый синий и т.д. К цитоплазматическим - эозин, кислый фуксин, пикриновая кислота, светлый зеленый и т.д. Обычно при окраске используют смеси различных красителей.