Развёрнутый гематологический анализ крови

Параметры (см. приложение)

Гематологический анализатор измеряет и расчитывает 18 различных параметров, перечисленных ниже (см. приложение)

1. Взятие крови согласно требованием (или донорская кровь).Для анализа используется свежая цельная кровь (5мл) с антикоагулянтом К3- EDTA (вакуумная пробирка, см.приложение )

2. Перед анализом закрытую пробирку с кровью 11 раз осторожно переваричивают, (для хорошего перемешивания).

3. Подбирается адаптор к соотвествующий к вакуумной пробирке, установить его в ротор.

4. Пробирку вставляем в адаптор (без пробки).

5. Пробирка с пробой устанавливается в соответствующющий адаптор в роторе для проб.

6. Введение анкетных данных (ФИО., пол, возраст).

7. Измерение (START)

Практическая работа №13

Тема: «Цветные реакции на холестерин.»

Реакция Шиффа.

Ход исследования:

В пробирку наливают 10 капель 0.3% хлороформного р-ра холестерина и осторожно по стенке пробирки подслаивают 10 капель концентрированной серной кислоты. Через 3-4 мин на границе двух слоев жидкости появляется кольцо красного цвета.

Реакция Сальковского.

Ход исследования:

В пробирку наливают 10 капель 0.3 % хлороформного р-ра холестерина, прибавляют 10 капель концентрированной серной кислоты и осторожно встряхивают. Жидкость разделяется на 2 слоя: верхний- хлороформный слой, окрашенный в вишнево-красный цвет, нижний- серная кислота, окрашенный в желтый цвет.

Реакция с хлорным железом.

Ход исследования:

В пробирку наливают 3 капли 0.3 % хлороформного р-ра холестерина, 10 капель 0.05 % р-ра хлорного железа в ледяной уксусной кислоте и 15 капель концентрированной серной кислоты. После взбалтывания постепенно появляется красно-фиолетовое окрашивание .

Химизм: При реакции холестерина с хлорным железом образуется комплексное соединение, имеющее красно-фиолетовую окраску.

Тема: «Количественное определение холестерина в сыворотке крови.»

Метод

ХЭ

Эфиры холестерина + Н₂О холестерин + свободные жирные кислоты

Холестерин + О₂ 4 холестен-3он+ Н₂О₂

ПОД

2 Н₂О₂+фенол+4-аминоантипирин

Хинонимин + 4 Н₂О₂

Интенсивность розово-красного окрашивания пропорциональна концентрации холестерина в образце

Длина волны 500- 546 нм

Оптический путь 1 см

Температура (+20-25) С+ 37 С

	Реагент бланк	Стандарт калибратор	Образец
Реагент R1	1,00 мл	1,00 мл	1,00 мл
образец	-	-	0,01 мл
Стандарт калибратор		0,01 мл	-
Дистил.вода	0,01 мл	-	-
Смешать, инкубировать 10 мин при 37 С или 20 мин при 20-25 С. Измерить поглощение образца А обр и стандарта (калибратора) А кал относительно реагента бланка. Стабильность окраски 1 час.

Расчета

Аобр+ А бланк

Холестерин моль/л = ________________ х С кал

А кал – А бланк

Фактор пересчета

1 ммоль/л = 0,0259 мг/дл

Нормальные величины

Сыворотка, плазма моль/л -5,0

Клинические показатели риска - 5,0-6,2

Высокий риск - 6,2