Граф логічної структури теми: «мікробіологічна діагностика ботулізму»
МЕТОДИ
ДІАГНОСТИКИ БАКТЕРІОЛОГІЧНИЙ
БІОЛОГІЧНИЙ МАТЕРІАЛ,
ЯКИЙ ДОСЛІДЖУЄТЬСЯ
ВИСІВ НА ПОЖИВНІ
СЕРЕДОВИЩА й ІНКУБАЦІЯ В АНАЕРОБНИХ
УМОВАХ
ВИДІЛЕННЯ ЧИСТОЇ
КУЛЬТУРЫ МІКРОБІВ ПОСТАНОВКА РЕАКЦІЇ
НЕЙТРАЛІЗАЦІЇ НА ТВАРИНАХ ДЛЯ ВИЯВЛЕННЯ
БОТУЛІНІЧНОГО ТОКСИНУ
ВИВЧЕННЯ ВЛАСТИВОСТЕЙ
ВИДІЛЕНОЇ КУЛЬТУРИ МІКРОБІВ
ОЦІНКА РЕЗУЛЬТАТІВ
ІДЕНТИФІКАЦІЯ
МІКРОБІВ
ВСТАНОВЛЕННЯ
МІКРОБІОЛОГІЧНОГО ДІАГНОЗУ
МАТЕРІАЛ,
ЯКИЙ ДОСЛІДЖУ- ЄТЬСЯ
(ФІЛЬТРАТ ЧИ ЦЕНТРИФУГАТ)
Контрольні питання
Які морфологічні, тінкторіальні й культуральні властивості має збудник ботулізму ?
Який матеріал необхідно досліджувати при підозрі на ботулізм ?
Які методи використовують при проведенні мікробіологічної діагностики ботулізму ?
Як поставити біологічну пробу й реакцію нейтралізації з протиботулінічними антитоксичними сироватками ?
Як поставити та провести облік РПГА з еритроцитарним антитільним діагностикумом ?
Тестові завдання
Тест 1
Після вживання в їжу грибів домашнього консервування, в родині зареєстровано отруєння з неврологічними симптомами: утруднене ковтання, двоїння в очах, афонія. Для якого захворювання характерні симптоми зазначені в умові ?
Черевного тифу
Правцю
Грипу
Ботулізму
Дизентерії
Тест 2
Хворого госпіталізовано зі скаргами на блювоту, запаморочення, двоїння в очах, утруднене ковтання. Лікар запідозрив ботулізм. Які методи мікробіологічної діагностики доцільно використовувати для підтвердження діагнозу?
Мікроскопічний, серологічний
Біологічний, бактеріологічний
Алергологічний, мікроскопічний
Мікроскопічний, серологічний
Алергологічний, серологічний
Тест 3
При мікроскопії пофарбованого за Грамом мазка знайшли грампозитивні безладно розташовані короткі палички з закругленими кінцями, що мають термінально розташовані спори овальної форми (у вигляді тенісної ракетки). Яким бактеріям притаманні такі морфологічні й тінктроіальні властивості?
Clostridium perfringens
Clostridium botulinum
Clostridium tetani
Proteus vulgaris
Bacillus anthracis
Тест 4
Під час постановки реакції нейтралізації кров хворого з підозрою на ботулізм змішали з протиботулінічною сироваткою й після інкубації в термостаті протягом 30 хвилин, цією сумішшю інфікували білих мишей. Назвіть спосіб зараження тварин.
Внутрішньом'язовий
Внутріошньочеревинний
Внутрішньошкірний
Внутрішньомозковий
Внутрішньовенний
Завдання. Розташуйте за допомогою цифр та стрілок послідовність етапів (означено цифрами) мікробіологічної діагностики ботулізму
Мікробіологічна діагностика ієрсиніозів
Кишковий ієрсиніоз й псевдотуберкульоз – гострі інфекційні захворювання, що протікають з переважним враженням шлунково-кишкового тракту. Збудники належать до родини Enterobacteriaceae, роду Yersinia (Y.pseudotuberculosis и Y. enterocolitica).
Для мікробіологічної діагностики цих захворювань використовують мікроскопічний, бактеріологічний, серологічний та алергологічний методи.
Матеріалом для дослідження є кров, сеча, випорожнення, продукти харчування.
Мікроскопічний
метод. В мазках,
виготовлених із випорожнень, сечі та
фарбованих за Грамом Y.
pseudotuberculosis
й Y.
enterocolitica
мають вигляд безспорових грамнегативних
паличок розміром від 1-3 - 0,5-0,8 мкм. Обидва
види бактерій рухливі при температурі
18-20ºС і нерухомі при температурі 37°С .
Бактеріологічний метод. Заснований на виділенні збудника, як правило, з калових мас хворого. Спочатку матеріал для дослідження висівають у рідкі середовища накопичення (фосфатно-буферний розчин, 1% пептонна вода) й витримують у холодильнику при температурі 5-6°С для накопичення ієрсиній в мікробних асоціаціях. При недостатності живлення й низькій температурі ієрсинії накопичуються швидше за інші ентеробактерії. На 3-5 добу виконують висів із середовища накопичення на чашки Петрі з середовищами Ендо, Плоскирєва, Сєрова, попередньо оброблені слабким розчином лугу, й поміщають в термостат для культивування.
Y. enterocolitica на щільних середовищах утворює дрібні, круглі, опуклі блискучі колонії з рівними краями, з блакитино-сірим відтінком. У процесі старіння колонії зливаються та ростуть суцільно. На середовищі Ендо утворюються колонії з рожевим відтінком. У рідких поживних середовищах спостерігають дифузний ріст у вигляді помутніння.
Y. pseudotuberculosis утворюють як S- так й R-форми колоній. S-форми Y. pseudotuberculosis – дрібні, блискучі, сірувато-жовті й менш прозорі ніж у Y. enterocolitica. На середовищі Ендо колонії безбарвні. R-форми - опуклі, бугристі, середніх розмірів, часто з фестончастими краями. У процесі старіння колонії збільшуються в розмірах й втрачають свою прозорість. У рідинних поживних середовищах ієрсинії дають дифузний ріст у вигляді помутніння чи у вигляді осаду пластівців, залишаючи середовище прозорим. Відбирають підозрілі колонії, що виросли, і виготовлюють з них мазки, які фарбують за Грамом, мікроскопують. Частину колонії, яка залишились, пересівають на скошене поживне середовище для накопичення чистої культури мікробів. Пробірки поміщають в термостат на 48-72 годин при температурі 22-30°С.
Отриману чисту культуру мікроорганізмів висівають у строкатий ряд Гіса для вивчення біохімічних властивостей.
Збудники псевдотуберкульозу та кишкового ієрсиніозу
|
Здатність до ферментації |
Збудники | |
|
Кишкового ієрсиніози |
Псевдотуберкульозу
| |
|
Рамноза |
– |
+ |
|
Маніт |
+ |
+ |
|
Лактоза |
– |
– |
|
Цукроза |
+ |
– |
|
Мілібіоза |
– |
+ |
|
Сорбіт |
+ |
– |
|
Мукат |
– |
– |
|
Сірководень |
– |
– |
|
Індол |
± |
– |
реакція позитивна (+), реакція негативна (–).
Ієрсинії не утворюють сірководню, проявляють уреазну активність. Ферментують більшість вуглеводів, виключаючи лактозу й мукат, без утворення газу. У ієрсиній псевдотуберкульозу реакція Фогеса-Проскауера завжди негативна, тоді як у кишкових ієрсиній при температурі 22-28° C вона позитивна. Псевдотуберкульозні мікроби від кишкових ієрсиній відрізняються за відношенням до цукрози й рамнози, лізабельністю псевдотуберкульозним бактеріофагом й аглютинабельністю відповідними видовими сироватками.
Для вивчення антигенних властивостей виконують реакцію аглютинації на склі з адсорбованою діагностичною сироваткою при розведенні 1:10. Результати оцінюють через 3-5 хвилин.
Серологічний метод. З метою виявлення специфічних антитіл у крові хворого використовують реакцію аглютинації й реакцію пасивної гемаглютинації (див. додаток). Досліджують парні сироватки, відібрані на початку та на 3-му тижні захворювання. Розгорнута РА типу Відаля виконується з відповідними діагностикумами. Реакцію вважають позитивною при титрі антитіл 1:200 й вище. Реакцію пасивної гемаглютинації (РПГА) ставлять з еритроцитарним псевдотуберкульозним й кишковоієрсиніозним діагностикумами. РПГА вважається позитивною при титрі 1:160 – 1:200 й вище.
При дослідженні парних сироваток, найбільш вірогідним вважають приріст титрів антитіл у 4 рази й більше.
В експрес-діагностиці псевдотуберкульозу й кишкового ієрсиніозу для виявлення антигенів ієрсиній в матеріалі, який досліджується, в перші дні захворювання може бути використаний ІФА (див. додаток).
Алергологічний метод. Для постановки внутрішньошкірної проби* використовують алергодіагностичні препарати "псевдотуберкулін" й "ентероієрсин". Облік проби проводять через 24 години. Реакція вважається позитивною, якщо у місці введення 0,1 мл алергену утворюється папула й зона гіперемії діаметром 10 мм й більше.
Схема „Мікробіологічна діагностика ієрсиніозів”
Граф логічної структури теми “Мікробіологічна діагностика ІЄрсинІозІв”
Матеріал, який
досліджується
Методи діагностики
Мікроскопічний
Бактеріологічний
Алергологічний Серологічний
Експрес-метод
Мікроскопія
матеріалу, який досліджується
Виділення чистої
бактеріальної культури
ІФА
РА
Постановка
алергічних проб
Морфологічні
властивості мікробів Тінкторіальні
влас ти вості
мікробів Характер
розташування мікробів
Властивості
виділеної чистої культури мікробів
В/шкірна
алергічна проба
з псевдотуберкуліном й ентероієрсином
Культу ральні Антигенні
Біохімічні
Оцінка результатів
Оцінка результатів
Оцінка результатів
Оцінка результатів
Оцінка результатів
Визначення виду,
біовару, патогенності
Встановлення
мікробіологічного діагнозу