- •Практичне заняття № 23 тема: Мікробіологія черевного тифу, паратифу а та паратифу в
- •Доаудиторна самостійна робота
- •Серологічна ідентифікація
- •Попередня відповідь
- •Пересів типових колоній на середовище Олькеницького
- •Кінцева відповідь аудиторна самостійна робота
- •План аудиторної самостійної роботи
- •Аудиторна самостійна робота та рекомендації по виконанню практичної роботи
- •3/ Отримання білікультури.
- •4/ Отримання мієлокультури.
- •1/ Отримання гемокультури.
- •5/ Отримання розеолокультури.
- •6/ Посів секційного матеріалу.
- •1/ Виділення збудника з гемокультури та мієлокультури.
- •2/ Виділення чистої культури з копрокультури, уринокультури, білікультури, розеолокультури та секційного матеріалу.
- •Біохімічні властивості тифо-паратифозних бактерій
- •Бактеріологічний метод
- •Серологічний метод (реакція Відаля)
- •Серологічний метод (рнга)
- •Охарактеризувати діагностичні препарати:
- •6.2. Охарактеризувати лікувально-профілактичні препарати:
- •Анотації до діагностичних та лікувально-профілактичних препаратів до теми ”Мікробіологія черевного тифу, паратифів а і в”
- •Контрольні питання та відповіді до теми мікробіологія черевного тифу, паратифів а і в для самостійної роботи у доаудиторний час
- •Післяаудиторна навчально-дослідна робота
Контрольні питання та відповіді до теми мікробіологія черевного тифу, паратифів а і в для самостійної роботи у доаудиторний час
Що таке черевний тиф? |
Гостре антропонозне інфекційне системне захворювання з фекально-оральним механізмом передачі, яке спричиняється Salmonella typhi, супроводжується ураженням лімфатичного апарату тонкої кишки, бактеріємією, гарячкою, розеольозним висипом, інтоксикацією організму та характеризується циклічним перебігом. |
Таксономічне положення збудників черевного тифу, паратифів А і В.
|
Родина Enterobacteriaceae Рід Salmonella Види: Salmonella enterica серовар typhi – збудник черевного тифу Salmonella enterica серовар paratyphi A – збудник паратифу А Salmonella enterica серовар paratyphi B (S. schottmuelleri) – збудник паратифу В. |
Значення бактеріологічного методу для того, щоб поставити діагноз черевний тиф, паратиф А чи паратиф В. |
За клінічними ознаками захворювання розрізнити практично неможливо. Остаточний клінічний діагноз можна поставити за результатами мікробіологічного дослідження. |
Морфологічні та тинкторіальні особливості збудників. |
Короткі прямі з заокругленими кінцями грамнегативні переважно рухливі (перитрихи) монобактерії. Спор та капсул не утворюють. Види сальмонел морфологічно не розрізняються між собою. |
Тип дихання збудників. |
Факультативні анаероби. |
Сутність серологічної класифікації сальмонел за Кауффманном-Уайтом. |
По спільності будови О-антигену сальмонели класифіковані на серологічні групи, а усередині серогрупи – на серовари у відповідності з різницею у будові Н-антигену. |
Антигенна будова збудника черевного тифу. |
Серогрупа D. О-антигени: О9-, О12-, Н-антиген І фази – Нd-, Vi-антиген. |
Антигенна будова збудника паратифу А. |
Серогрупа А. О-антигени: О1-, О2-, О12- та Н-антиген І фази – Нa. |
Антигенна будова збудника паратифу В. |
Серогрупа В. О-антигени: О1-, О4-, О5-, О12- та Н-антигени: І фази – Нb, ІІ фази – 1,2, М-антиген. |
Біологічні особливості збудників черевного тифу та паратифів А і В. |
Здатні протистояти фагоцитозу і розмножуватись у клітинах лімфатичної системи. |
Причини бактеріоносій- ства при черевному тифі та паратифах А і В. |
1/ Місцеві запальні процеси у жовчо-, сечовивідних шляхах, кістковому мозку; 2/ L-трансформація збудників (знаходяться у макрофагах кісткового мозку, недоступні для хіміопрепаратів та антитіл і тривало персистують у організмі людини) та реверсування у типові форми; 3/ функційна недостатність макрофагів; 4/ недосконалість системи мононуклеарних фагоцитів; 5/ дефіцит макроглобулінових О-антитіл - IgM; 6/ особливості перебігу хвороби, неадекватність лікування. |
Фактори патогенності збудника черевного тифу |
Фактори адгезії, колонізації, інвазії (інвазин), Vi-антиген, ендотоксин, фермент ДНК-аза. Екзотоксин збудники не утворюють. |
Дія ендотоксину сальмо-нел. |
Викликає пірогенний ефект, спричиняє агрегацію тромбоцитів, стимулює підвищення синтезу простагландинів з арахідонової кислоти, яка входить до складу фосфоліпідів клітинної мембрани, які впливають на аденілатциклазу – підвищується секреція води та електролітів у кишечник, розвивається діарейний синдром, чинить безпосередню цитотоксичну дію, стимулює ГСТ. |
Джерело інфекції при черевному тифі та паратифах А і В. |
При черевному тифі та паратифі А – хворі та бактеріоносії (антропонозна інфекція). Паратиф В – хворі люди, бактеріоносії та тварини (велика рогата худоба, птахи) – зооантропонозна інфекція. |
Шляхи передачі збудників черевного тифу, паратифів А і В. |
Основні – водний (є найбільш поширеним і може призвести до епідемічного спалаху захворювання), харчовий (переважно через молоко, молочні та м‘ясні продукти, в яких збудник здатний розмножуватися), рідше – контактно-побутовий (зараження у побутових умовах – коли фактор передачі не встановлений). |
Методи мікробіологічної діагностики черевного тифу, паратифів А і В. |
1/ Бактеріологічний (основний): діагностика захворювань, обстеження контактних осіб, виявлення бактеріоносіїв та з‘ясування джерела інфекції; 2/ серологічний, 3/ метод експрес-діагностики. |
Матеріал для бактеріологічного дослідження при черевному тифі, парати-фів А і В. |
Основний: кров (гемокультура), фекалії (копрокультура), сеча (уринокультура), жовч (білікультура), пунктат кісткового мозку (мієлокультура). Додатковий: вміст розеол (розеолокультура), спинномозкова рідина (при менінготифі), харкотиння (при пневмотифі), секційний матеріал, питна вода. |
Матеріал для серологічної діагностики сальмонельозної інфекції. |
Кров. |
Середовища, які використовуються для вивчення культуральних властивостей збудників та їх накопичення. |
Диференціально-діагностичні середовища: вісмут-сульфітний агар, Плоскирєва, Ендо, Левіна (для первинного посіву матеріалу та висіву збудника зі збагачувального середовища). Вісмут-сульфітний агар – високо селективне та диференціально-діагностичне середовище для культивування сальмонел. Середовище Плоскирєва – для диференціації лактозонегативних бактерій: сальмонел, шигел та ЕІЕС. Середовища Ендо та Левіна мають менші селективні властивості для культивування сальмонел. Селективне середовище для отримання гемокультури – середовище Рапопорт. Збагачувальне середовище - селенітове середовище. |
Культуральні властивості S. typhi на вісмут-сульфітному агарі. |
Колонії чорні з металевим блиском з зафарбовуванням середовища під колонією у чорний колір, дрібні (2-4мм), мутні (збудник має Vi-антиген), гладкі, ніжні. |
Культуральні властивості S. paratyphi A на вісмут-сульфітному агарі. |
Колонії дрібні прозорі гладкі ніжні коричнево-зеленуваті.
|
Культуральні властивості S. schottmuelleri на вісмут-сульфітному агарі |
Колонії чорні з металевим блиском з зафарбовуванням середовища під колонією у чорний колір, дрібні (2-4мм), прозорі, гладкі, ніжні. |
Культуральні властивості S. typhi та S. paratyphi A на середовищі Плоскирєва. |
Колоні безбарвні. |
Культуральні властивості S. paratyphi В на середовищі Плоскирєва. |
Безбарвні, оточені слизовим валиком. |
Результат культивування збудників у селенітовому середовищі. |
Стає каламутним. |
Біохімічні властивості сальмонел у порівнянні з властивостями ешерихій та шигел. |
Утворення сірководню та відсутність індолу. |
Мета дослідження гемокультури та мієлокультури при захворюванні на черевний тиф, строки забору крові та її об‘єм. |
Виділення збудника з крові та кісткового мозку – абсолютне підтвердження у хворого діагнозу "черевний тиф". Кров беруть з першого дня гарячки до останнього. На першому тижні захворювання – 5-10мл з ліктьової вени (у дорослих), 2мл з мочки вуха, п‘ятки або пальця (у маленьких дітей). На другому тижні захворювання (у дорослих) – 15-20мл (збудник знаходиться в крові протягом всього періоду гарячки, але кількість його поступово зменшується). Кров сіють у середовище Рапопорт біля ліжка хворого у співвідношенні 1:10. |
Мета та строки дослідження іншого матеріалу при черевному тифі. |
Вірогідність підтвердження діагнозу при дослідженні копрокультури, уринокультури та білікультури починається з 2-го тижня захворювання. Виділення збудника з цих культур у хворого з гарячкою не дає права остаточно поставити діагноз "черевний тиф". Для цього необхідні результати серодіагностики. |
Мета бактеріологічного дослідження крові, фека-лій, сечі, жовчі при черевному тифі, паратифу А і В. |
Дослідження гемокультури, копрокультури, уринокультури та білікультури використовується для підтвердження діагнозу у розпал захворювання, контролю за ефективністю лікування та виявлення бактеріоносіїв. |
За якими ознаками диференціюють збудника черевного тифу від збудників паратифів А і В. |
За біохімічними властивостями та особливостями антигенної структури при бактеріологічному дослідженні матеріалу. |
Біохімічні особливості збудника черевного тифу |
Ферментують глюкозу, мальтозу, маніт з утворенням тільки кислоти, утворюють сірководень. |
Біохімічні особливості збудників паратифів А і В. |
Ферментують глюкозу, мальтозу, маніт з утворенням кислоти та газу. |
Особливості серологічного методу діагностики сальмонельозної інфекції. |
Усе ширше використовується ІФА, який є значно чутливішим ніж РНГА та реакція Відаля, і дозволяє визначити антитіла різних класів (IgG, IgM). Усі методи з діагностичною метою необхідно оцінювати лише у динаміці (інтервал між дослідженнями 10-12 днів). Чотирикратне зростання титру антитіл – критерій вірогідності діагнозу. Визначення титрів Vi-аглютинінів використовують для виявлення бактеріоносіїв та контролю за реконвалесцентами (діагностичний титр 1:40 і вище). |
Мета та термін постановки реакції Відаля. |
Для діагностики черевного тифу, паратифів А і В з кінця І тижня захворювання. Антитіла до О-антигену з‘являються на І тижні захворювання, накопичуються у розпал захворювання та швидко зникають на момент видужання. Антитіла до Н-антигену з‘являються у розпал захворювання, накопичуються у кінці захворювання та зберігаються у високих титрах після видужання хворого та щеплень протягом тривалого часу. |
Компоненти реакції Відаля. Оцінка реакції Відаля. |
Сироватка крові хворого (на 7-9 день захворювання та через 10-12 днів), черевнотифозні О- (О9-) та Н- (Нd-) монодіагностикуми, паратифозні О- (О2-,О4-) та Н- (Нa-, Hb-) монодіагностикуми, фізрозчин. Реакція ставиться у пробірках. Діагностичний титр імуноглобулінів до О- та Н-антигенів становить 1:200. Якщо реакція поставлена у динаміці, то зростання титру антитіл у сироватці хворого у 2-4 і > разів є підтвердженням діагнозу. Специфічність реакції недостатньо висока. |
Мета та термін постановки РНГА. |
Для діагностики черевного тифу, паратифів А і В з кінця І тижня захворювання та підтвердження бактеріоносійства. |
Компоненти РНГА та її особливості. |
Сироватка крові (при захворюванні реакцію ставлять з парними сироватками; першу порцію крові беруть на 7-9 день, а другу - через 10-12 днів), еритроцитарний черевнотифозний (паратифозний А, паратифозний В) О-діагностикум, фізрозчин. Реакція ставиться у планшеті з лунками. Зростання титру антитіл у 2-4 і > разів є доказом захворювання на відповідну інфекцію. Для виявлення бактеріоносіїв реакція ставиться з цистеїновою пробою (сироватку крові пацієнта попередньо обробляють цистеїном) для визначення титру IgG. Реакція має високу специфічність. |
Антитіла, які виявляють у сироватці у розпал хвороби. |
Антитіла до О-антигену – IgМ. |
Антитіла, які виявляють у сироватці крові реконвалесцентів та щеплених. |
Антитіла до Н-антигену - IgG. |
Діагностика бактеріоносійства. |
Найважливіший доказ – виявлення збудника. Матеріал для дослідження: дуоденальний вміст, випорожнення, сеча. Додаткові дані – одночасне виявлення антитіл до О-, Н-, Vi- або Н-, Vi- антигенiв. |
Особливості постінфекційного імунітету |
Напружений, типоспецифічний. Клітинний. Місцевий (опосередкований sIgA – запобігає процесу пенетрації сальмонел до слизової оболонки тонкої кишки). Гуморальний імунітет (антитіла до Vi-, О-, Н-антигенів) не володіє протективною активністю, є підтвердженням інфекційного процесу. |
Сутність специфічної профілактики черевного тифу. |
Застосування хімічної сорбованої Vi-черевнотифозної моновакцини за епідемічними показниками. |
Особливості імунітету після щеплення |
Ненапружений (≈ 12 місяців). |
