5.1.4. Оформление направления на исследование

На каждую отправляемую в лабораторию пробу от больного ЛЗН или с подозрением на эту инфекцию заполняют направление в соответствии с приложением 5, 6. На пробы секционного материала (от умершего от ЛЗН или с подозрением на эту инфекцию) заполняют направление в соответствии с приложением 7. При передаче материала для исследования в стороннюю организацию оформляют сопроводительный документ, в котором указывают адрес учреждения, в которое направляется проба (пробы); вид материала, взятого для исследования; количество образцов, цель исследования; наименование учреждения, должность, фамилия и инициалы лица, направляющего пробу (пробы), подпись.

5.1.5. Проведение иммунодиагностических исследований клинического материала на лихорадку Западного Нила в медицинских организациях

В лаборатории медицинской организации с целью лабораторного подтверждения диагноза ЛЗН проводят определение антител классов М и G к ВЗН в СМЖ и парных сыворотках крови. Возможно определение авидности IgG.

Для диагностики используют тест-системы, зарегистрированные в Российской Федерации. Выявление специфических антител класса M (IgM) и класса G (IgG) осуществляется с помощью иммуноферментных тест-систем в соответствии с прилагаемыми к ним инструкциями.

Клинический диагноз ЛЗН считают подтвержденным:

-при обнаружении в исследуемых образцах специфического фрагмента РНК вируса ЛЗН;

- при выявлении в ИФА IgM в одной сыворотке в титре, равном или выше диагностического (в зависимости от рекомендаций фирмы-производителя иммунодиагностической тест-системы, зарегистрированной в Российской Федерации);

- при 4-кратном увеличении титра IgG к ВЗН, при одновременном исследовании парных сывороток крови и при условии отрицательного результата на другие эндемичные флавивирусы.

При оценке результатов иммунологического исследования необходимо учитывать, что IgM в спинномозговой жидкости появляются на 1-3 сутки от начала клинических проявлений болезни, а в сыворотке крови - на 2-3 дня позже (при тяжелых формах течения болезни). При легком течении ЛЗН IgM в сыворотке крови определяют с 3-5 дня болезни. Имеются данные о длительной циркуляции IgM (12-16 месяцев).

Следует помнить, что в начальной фазе заболевания титры IgG могут быть низкие, или результат исследования на наличие антител класса G – негативный.

Если при анализе парных сывороток на антитела класса G образец, взятый в острую фазу заболевания, негативный, а образец, взятый в фазу реконвалесценции, позитивный, то имеет место сероконверсия, что свидетельствует о первичной инфекции.

Одной из важных особенностей вирусов семейства Flaviviridae является наличие выраженных антигенных связей между его представителями, в том числе между вирусами серокомплекса КЭ, а также других арбовирусных инфекций. Широкое распространение КЭ и увеличение ареала распространения ЛЗН делает проблему дифференциальной диагностики данных инфекций весьма актуальной.

На эндемичных территориях по ЛЗН при отсутствии циркуляции вируса КЭ или других флавивирусов достаточно проведения исследований на выявление антител лишь для ВЗН.

Однако, на эндемичных территориях по КЭ или другим флавивирусным инфекциям (при подозрении на ЛЗН), для подтверждения острой формы инфекций необходимо проведение сравнительных исследований на выявление антител класса IgM к другим флавивирусам, причем в парных сыворотках. Тестирование на IgG является косвенно подтверждающим диагноз исследованием, так как положительные результаты часто регистрируются при других флавивирусных инфекциях, являясь отражением перекрестных реакций.

Измерение авидности специфичных к ВЗН IgG позволяет определить период времени, прошедший после первичного инфицирования. Так, IgG, выявляемые в первые 3-5 месяцев после первичного инфицирования, имеют низкую авидность, в то время как в более поздние сроки IgG показывают высокую авидность.

При индексе авидности (ИА) менее 50%, сыворотка содержит низкоавидные антитела, что указывает на текущую, либо недавно перенесенную инфекцию (2-3 месяца назад). Если индекс авидности более 70%, то сыворотка содержит высокоавидные антитела, что указывает на перенесенную ранее инфекцию.

В то же время высокое значение ИА анализируемой пробы к антигенам ВЗН не позволяет установить время начала заболевания ЛЗН, тогда как аналогичная величина ИА к антигенам ВКЭ указывает на перенесенный ранее (более 80 дней) КЭ. Однако при клещевом энцефалите могут обнаруживаться IgG-антитела к ВЗН с высокой авидностью (до 100 %).

Таким образом, наличие IgM свидетельствует об острой, либо недавно перенесенной инфекции, обусловленной ВЗН. Выявление антител класса IgG необходимо использовать в парных сыворотках в качестве подтверждающего теста и при проведении сероэпидемиологических исследований.

Результаты лабораторных анализов оформляют в соответствии с приложением 8 МУ.