- •Содержание
- •Правила работы в биотехнологических учебных лабораториях
- •Аппаратура для выращивания микроорганизмов, стерилизации и других микробиологических целей
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Информационно-дидактический блок
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Информационно-дидактический блок
- •Особенности биосинтеза микроорганизмов-продуцентов антибиотиков
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 4
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 5
- •Порядок выполнения работы
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 6-7
- •Методика определения активности антибиотика с использованием стандартной кривой.
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 8 «Определение концентрации антибиотика методом серийных разведений»
- •Метод серийных разведений
- •Информационно-дидактический блок
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 9-10
- •Информационно-дидактический блок
- •Методы выделения антибиотиков
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 11.
- •Информационно-дидактический блок
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 12
- •Порядок выполнения работы
- •Информационно-дидактический блок
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 13
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа № 14
- •Совместная работа студента с преподавателем
- •Лабораторная работа 15
- •Информационно-дидактический блок
- •Список используемой литературы
Информационно-дидактический блок
Ферменты входят в состав всех клеток и тканей живых организмов и регулируют течение процессов, лежащих в основе жизнедеятельности организма. Разнообразие этих процессов свидетельствует о существовании большого количества ферментов. В настоящее время описано около 3000 ферментов, примерно 100 из них получены в кристаллическом виде. Промышленность выпускает свыше 50 индивидуальных ферментов и вдвое больше ферментных препаратов, представляющих собой смеси, содержащие кроме целевого продукта - значительное количество близких по физико-химическим свойствам белков.
Как и все белки, ферменты являются высокомолекулярными соединениями от 10 000 до 1 000 000. Они обладают малостойкой структурой, весьма чувствительны к изменениям рН среды и температуры. Для каждого фермента существует свой оптимум значения рН среды. Отклонение рН среды в ту или иную сторону ведет к снижению скорости ферментативной реакции. Оптимальное значение температуры для большинства ферментов – +20 - +400С. Повышение температуры до 40-500С, как правило, приводит к падению ферментативной активности и даже к полной денатурации белка.
В соответствии с современной классификацией все ферменты делят на 6 основных классов по типу катализируемой ими реакции:
1. Оксидоредуктазы; 3. Гидролазы; 5. Изомеразы;
2. Трансферазы; 4. Лиазы; 6. Лигазы (синтетазы).
Большая часть выпускаемых в промышленности ферментов, в том числе и для здравоохранения, относится к классу гидролаз.
По экономическим и технологическим соображениям получать ферменты с помощью микроорганизмов более выгодно, чем из растительных и животных клеток. Микробные клетки содержат или продуцируют более 2000 ферментов, которые катализируют биохимические реакции, связанные с ростом, дыханием и образованием продуктов. Культуры микроорганизмов способны вырабатывать большое количество ферментов за короткое время с использованием дешевых исходных веществ. В биологических объектах ферменты находятся в фиксированном состоянии на поверхности различных клеточных структур и сохраняют свою активность в течение длительного времени. Многие из этих ферментов могут быть выделены и проявляют свою активность независимо от клетки.
Промышленное производство ферментных препаратов осуществляется, в основном, с помощью плесневых грибов, бактерий, дрожжей, актиномицетов. В последние годы используют в основном мицелиальные грибы родов Aspergillus, Penicillium и Rhyzopus, а также бактерии рода Bacillus, Escherichia coli и др.
Они способны продуцировать большое число разнообразных по своему составу ферментов. Это обусловлено специфическими способностями их ферментативного аппарата, высокой способностью к размножению и адаптации в различных условиях окружающей среды.
Высокая лабильность ферментов к различным факторам окружающей среды (значению рН, температуре), быстрая инактивация в организме и выделение из организма, наличие антигенных свойств чужеродных организму белков в значительной мере могут быть устранены при использовании ферментов в иммобилизованном виде.
Иммобилизация ферментов - это повышение их стабильности. Существуют различные способы физической (адсорбция на нерастворимом носителе, включение в гель, микрокапсулирование, включение ферментов в липосомы и др.) и химической (с помощью ковалентного связывания, металлохелатный способ) иммобилизации. Их проводят в строго асептических условиях, но ни один из существующих способов иммобилизации биологически активных молекул, таких, как ферменты, антигены, антитела, не является универсальным.
Совместная работа студента с преподавателем
Самостоятельная работа студентами выполняется под непосредственным контролем преподавателя. После выполнения задания студенты должны представить тетради на проверку преподавателю.
Контрольные вопросы:
Дайте определение ферментов как белковых соединений и общую характеристику.
Как классифицируются ферменты?
Каковы правила формирования названий ферментных препаратов и их индексации?
Дайте номенклатуру лекарственных ветеринарных, диагностических ферментных препаратов, получаемых биотехнологическим синтезом.
Дайте общую принципиальную технологическую схему получения внутриклеточных и внеклеточных ферментов.
Дайте характеристику основному ферментационному и технологическому оборудованию биотехнологических производств.
Назовите основные группы предшественников роста продуцентов и биосинтеза ферментов. Как они влияют на биосинтез ферментов?
Как стандартизируются ферментные препараты?
