Робота №3 методики мікроскопічних досліджень. Виготовлення живих препаратів

Для проведення мікроскопічного дослідження використовують: предметні скельця (прямокутна скляна пластина 75*25 мм, товщина – не більше1,2 мм) та покрівні скельця (квадратна скляна пластина 25*25 мм, товщина – не більше 0,15-0,17 мм). Предметні і покрівні скельця із більшою товщиною не дозволяють отримувати чітке зображення об’єкту. Варіанти підготовки скелець до роботи наведені на рис 3.

О чищення предметного скла від жиру проводиться

Витримування впродовж декількох діб в хромовій суміші. Потім – промивання водопровідною та дистильованою водою.	Кип’ятіння 10 хв в 10% НС1, потім – у мильному або 10% содовому розчині (нові скельця – у 1% розчині соди).	Промивання водою та протирання ефіром.
Зберігати чисті предметні скельця найкраще в банках або ванночках з 96% етиловим спиртом

Рис. Підготовка предметних скелець до роботи.

В залежності від виду матеріалу та мети дослідження в препараті можуть бути живі або фіксовані (мертві) мікробні клітини.

Методи виготовлення живих препаратів

Живі мікробні клітини прозорі і лише трохи виділяються на фоні поля зору у мікроскопі. В залежності від мети дослідження, живий препарат готують в двох варіантах.

В живому вигляді зручно вивчати:

• морфологічні особливості таких великих за розмірами мікробних клітин як гриби та дріжджі (еукаріоти). В готових препаратах можна побачити форму клітин, спор грибів та ін. структур. Препарат готується методом “розчавленої краплі” (рис. 4);

• виявляти здатність до руху у бактерій певних видів. В таких препаратих органів руху – джгутиків – не видно. Але направлений рух мікроорганізмів в полі зору мікроскопу під час тривалого спостереження забезпечують саме ці структури. Препарат готується методом “висячої краплі” (рис. 5).

1	2	3
На предметне скло наноситься крапля води	В воду петлею (з колонії) або піпеткою (з бульйону, мокроти) вноситься мікробний матеріал	Суспензію петлею розподіляють по площині 15*15 мм та накривають покрівним скельцем, тримаючи його під кутом

Рис. Виготовлення мікробних препаратів методом “розчавленої краплі.

Результат:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

1	2	3
На покрівне скельце обережно наноситься крапля води	В воду петлею (з колонії) або піпеткою (з бульйону, мокроти) вноситься мікробний матеріал. Розмішується петлею	Покрівне скельце накривають предметним склом з лункою, краї якої змащено вазеліном, і два скла разом –перегортають.

Рис. Виготовлення мікробних препаратів методом “висячої краплі.

Результат:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________