6. Изучение характера роста бактерий на плотных и жидких питательных средах (культуры бактерий на мпа в чашках Петри и в пробирках, а также на мпб)

Обратить внимание на внешний вид культуры: муть, пленка, осадок (для жидких культур). Описать внешний вид колоний на пластинках МПА, определить к каким колониям S-форме (правильной круглой формы, с ровным краем, гладкой, блестящей поверхностью) или R-форме (правильной или не правильной формы, с неровным, волнистым, зубчатым, лопастным краем, с матовой шероховатой поверхностью) относятся выросшие на демонстрационных чашках колонии.

7. Пигменты бактерий. Демонстрация пигментных культур

Многие бактерии в процессе жизнедеятельности синтезируют пигменты, у патогенных и условно-патогенных бактерий выделяют:

1) жирорастворимые, каратиноидные пигменты красного, оранжевого, желтого цвета, образуют микобактерии туберкулеза, некоторые актиномицеты, стафилококки;

2) нерастворимый в воде и кислотах пигмент черного или коричневого цвета – меланины – синтезируются облигатными анаэробами;

3) пирроловые пигменты ярко-красного цвета, например продигиозин, образуемый некоторыми серациями;

4) водорастворимые фенозиновые пигменты, пр. пиоцеанин, продуцируется синегнойной палочкой, окрашивающей всю питательную среду в сине-зеленый цвет пигмента.

Познакомиться и зарисовать колонии разной формы и пигментации, выросшие на демонстрационной чашке (рис. 1).

8. Исследование смеси бактерий. Бактериоскопия смеси и посев ее на пластинки мпа с целью получения изолированных колоний

Промикроскопировать препарат, приготовленный из смеси бактерий и окрашенный по Граму, определить, какие виды микробов находятся в смеси, зарисовать (рис. 2). Произвести посев смеси на пластинку МПА в чашке Петри для выделения изолированных колоний. Получение изолированной колонии с целью последующего пересева материала из нее на скошенный агар необходимо для получения чистой культуры, без этого этапа невозможно реализовать бактериологический метод идентификации бактерий паразитирующих в ротовой полости.

Для этого чашка Петри делится восковым карандашом на две половины. Каждый студент использует для посева одну половину чашки. Перед посевом следует тщательно проверить качество бактериальной петли, которая должна быть полностью замкнута. Прокаленной и остуженной петлей захватывают каплю бактериальной взвеси и переносят ее на МПА в один из углов отведенного для посева сектора (несколько отступая от границы сектора и от края чашки). Затем скользящими движениями наносят петлей штрихи по поверхности МПА возможно ближе штрих к штриху, но, не наслаивая один штрих на другой так, чтобы использовать всю поверхность чашки, за исключением полоски в 3-4 мм шириной у края чашки и у границы сектора (во избежание слияния посевов). В момент посева необходимо строго соблюдать правила, предупреждающие загрязнение питательной среды микробами воздуха (посев производить под прикрытием крышки или держа чашку в вертикальном положении, не оставлять чашку открытой). Чашки с посевами помещают в термостат до следующего зан ятия.

Рис. 1. Колонии пигментных бактерий.

Рис.2. Смесь бактерий. Окраска по Граму.