- •Методические указания
- •Режим работы в бактериологической лаборатории.
- •Знакомство с иммерсионным микроскопом.
- •Упражнение в микроскопии на готовых препаратах с применением
- •Правила обращения с культурами микробов.
- •Приготовление препарата-мазка и его фиксация. Окрашивание мазка.
- •Основные преимущества и принципы контрастирования
- •Бактериоскопическое исследование препарата «раздавленная капля» и микропрепаратов контрастированных методами негативной окраски по Бурри, позитивной - фуксином.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 1
- •Определение понятий "микроорганизмы" и "вид"
- •Занятие № 2
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Микроскопические методы исследования
- •1.1. Электронная микроскопия
- •1.2. Фазовоконтрастная микроскопия
- •1.3. Метод люминесцентной микроскопии
- •1.4. Метод микроскопии в темном поле
- •2. Морфология микроорганизмов
- •2.1. Морфология бактерий
- •2.3. Наблюдение подвижности бактерий в препарате "висячая капля"
- •3. Сложные методы окраски микробов в изучении их структуры
- •3.1. Изучение структуры клеточной стенки бактерий, окраска по Граму
- •3.2. Включения у бактерий. Демонстрация препарата
- •3.3. Капсула бактерий, бактериоскопическое исследование препарата-мазка из культуры палочки Фридлендера окрашенного по методу Бурри-Гинса
- •Контрольные вопросы
- •Занятие № 3
- •План занятия
- •Методические указания.
- •Способы стерилизации и дезинфекции лабораторной посуды и
- •Определить по готовым посевам антибактериальное действие
- •Бактериологическое изучение антибактериального действия спирта,
- •Тестовый контроль по теме: «стерилизация и дезинфекция»
- •Знакомство с питательными средами, применяемыми для выращивания бактерий
- •Изучение характера роста бактерий на плотных и жидких питательных средах (культуры бактерий на мпа в чашках Петри и в пробирках, а также на мпб)
- •Пигменты бактерий. Демонстрация пигментных культур
- •Исследование смеси бактерий. Бактериоскопия смеси и посев ее на пластинки мпа с целью получения изолированных колоний
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию № 3
- •Занятие № 4
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Изучение физиологии микроорганизмов, классификации бактерий по типу дыхания и отношению к температуре. Знакомство с термостатом
- •Освоение техники пересева бактериальных культур с пластинок мпа на косячок мпа, с косячков мпа на косячок и пластинки мпа с помощью
- •Исследование смеси бактерий (продолжение). Макро- и микроскопия
- •Знакомство с составом дифференциально-диагностических питательных сред: Плоскирева, Эндо, Левина и др., особенностями роста различных
- •Изучение биохимической (ферментативной) активности бактерий.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию № 4
Знакомство с составом дифференциально-диагностических питательных сред: Плоскирева, Эндо, Левина и др., особенностями роста различных
культур бактерий на них
Записать состав среды Плоскирева и Эндо и характер их изменений при росте различных бактерий. Зарисовать особенности роста культур кишечной палочки, фекального щелочеобразователя и стафилококка на среды Плоскирева, Эндо и МПА (рис. 2,3). Зарегистрировать результаты роста в табл.1.
Рецепт среды Эндо:
Рецепт среды Левина:
Рецепт Среды Плоскирева:
1
2
3
1
3
2
К
Рис.1. Морфология бактерий из изолированной колонии. Окраска по Граму
Рис. 2. Рост культур на среде Эндо
Рис. 3. Рост культур на среде МПА
ишечная палочка_____________________________________Фекальный щелочеобразователь__________________________
Золотистый стафилококк_________________________________
Табл.1. Результаты посева на среды Плоскирева, Эндо, МПА.
Вид бактерий |
Количество колоний или степень интенсивности роста на средах |
||
Плоскирева |
Эндо |
МПА |
|
Кишечная палочка |
|
|
|
Фекальный щелочеобразователь |
|
|
|
Стафилококк |
|
|
|
Изучение биохимической (ферментативной) активности бактерий.
Знакомство со средами "пестрого ряда", принципами их конструирования и характером изменений в результате роста бактерий. Посев бактерий на
среды "пестрого ряда" для изучения их сахаролитических и других
биохимических свойств
Зарегистрировать в табл. 2 результаты посева культур кишечной палочки и фекального щелочеобразователя на средах «пестрого ряда». Ферментация углевода с образованием кислоты и газа обозначается буквами КГ; с образование только кислоты – буквой К. Свертывание молока и образование индола обозначается «+»; отсутствие ферментации углевода, свертывания молока или образования индола обозначается знаком «—».
Табл.2. Изучение биохимических свойств бактерий кишечной группы на средах «пестрого ряда»
Виды бактерий |
Глюкоза |
Лактоза |
Манит |
Сахароза |
Молоко |
Индол |
H2S |
Подвижность |
Кишечная палочка |
|
|
|
|
|
|
|
|
Фекальный щелочеобразователь |
|
|
|
|
|
|
|
|
Заключение:
Контрольные вопросы
Какие типы дыхания у бактерий Вам известны?
Кто открыл анаэробный тип дыхания?
На чем основано деление бактерий на термофилы, психрофилы, мезофилы?
Что собой представляет термостат, его назначение?
Какой характер имеет консистенция колоний у капсульных бактерий?
Какая поверхность может быть у колоний бактерий?
Как следует держать пробирки с культурой бактерий и питательной средой при посеве бактерий?
Как определить прозрачность колоний?
Какие края бывают у колоний бактерий?
По какому принципу сконструированы дифференциальные среды Эндо, Левина, Плоскирева?
Какой состав имеет среда Плоскирева?
Почему среда Плоскирева обладает бактериостатическим действием?
Для чего в среды Плоскирева, Эндо, Левина добавляется молочный сахар (лактоза)?
Почему колонии кишечной палочки на средах Эндо, Левина и Плоскирева окрашены?
Какие бактерии на средах Эндо, Левина, Плоскирева вырастают в виде бесцветных колоний?
Какие углеводы чаше всего включаются в среды "пестрого ряда"?
Какой цвет имеет углеводная среда с индикатором Андреде в случае ферментации углевода?
Как определяется способность бактерий ферментировать углеводы с образованием газа?
Как определяется индол в среде?
Как определяется уреазная активность бактерий?
Как определить способность бактерий образовывать H2S? Что такое анаэробиоз?
Для чего добавляется индикатор в углеводные среды «пестрого ряда»?
