Определение групповой принадлежности крови с использованием цоликлонов анти-а и aнти-b.

Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения группы крови системы АВО человека взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Для каждого определения группы крови применяют по одной серии реагента анти-А и анти-В. Цоликлоны готовятся из асцитической жидкости мышей и по антигенным свойствам сходны с человеческими агглютинами альфа и бетта.

Цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета)

Последовательность действии:

1.На верхней части планшета пишут ФИО пациента, которому определяют группу крови.

2. На планшет (пластинку) наносят по одной большой капле цоликлона анти-А и анти-В (0,1 мл) под соответствующими надписями: "Анти-А" или "Анти-В".

3. Рядом помещают по одной маленькой капле исследуемой крови (со­отношение кровь: реагент - 1: 10).

4. Затем реагент и кровь смешивают и наблюдают за ходом реакции при легком покачивании планшета или пластинки.

5. Агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-В обычно наступает в первые 5 секунд. Наблюдение следует вести 2,5 мин, ввиду возможности более позднего

наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А и В.

Оценка результатов.

1. Оценка результата проводят по наличию в каплях агглютинации.

2. Отсутствие реакции агглютинации с цоликлонами анти-А и анти-В сви-

детельствует о том, что кровь относится к О( I ) группе крови.

3. Наличие реакции агглютинации с цоликлоном анти-А и отсутствие ее с

цоликлоном анти- В свидетельствует о том, что кровь относится к А( II)

группе крови.

4. Наличие агглютинации с цоликлоном анти-В и отсутствие ее с цоликлоном

анти- А свидетельствует о том, что кровь относится к В( III) группе крови.

5. Наличие агглютинации с цоликлонами анти-А и анти-В свидетельствует о

том, что кровь относится к АВ ( IY) группе крови.

Определение резус-фактора.

Резус-принадлежность крови больного определяют с помощью универсальной антирезус сыворотки или с помощью цоликлона анти-Д-супер.

С помощью универсальной антирезус сыворотки.

1 кап. сыворотки + 1 кап. крови помещаем в пробирку, встряхиваем, растекаем по стенке. Через 3 мин. добавляем в пробирку 3 мл. физ.раствора, перемешиваем, не взбалтывая и смотрим результат в проходящем свете.

При наличии агглютинации в пробирке кровь резус-положительная, при отсутствии – резус-отрицательная.

С помощью цоликлона анти-Д-супер на плоскости.

1 кап. цоликлона+1 кап. крови. Смешиваем стеклянной палочкой и покачиваем в течении 3 мин.

При наличии агглютинации кровь резус-положительная, при её отсутствии – резус-отрицательная.

Переливание подобранной трансфузионной среды разрешается, если групповая и резусная принадлежность ее совпадает с группой и резус-фактором крови больного.

4) Провести пробы на совместимость крови донора и реципиента.

Проба на групповую совместимость

Проводится определение группы крови реципиента и группы крови донора

во флаконе или гемоконе.

Проба на индивидуальную групповую совместимость (по системе АВО).

Для проведения пробы используют сыворотку отстоявшейся или отцентрифугированной крови больного и кровь донора.

На чистую сухую поверхность планшета или пластинки при ком­натной температуре наносят 1 кап. сыворотки больного + 1 кап. крови донора (из флакона или гемокона. Отсутствие агглютинации в течении 5 мин. указывает на совместимость. При наличии агглютинации кровь реципиента и донора несовместима и такую кровь переливать нельзя.

В со­мнительных случаях результат крови контролируют под микроскопом:

при наличии монетных столбиков, исчезающих после добавления теплого - (+37°С) 0,9% раствора натрия хлорида, кровь совместима, если в капле смеси видны агглютинаты, не расходящиеся при добавлении теплого 0,9% раствора натрия хлорида, кровь не совместима.

Проба на резус-совместимость.

Проведение этой пробы является обязательным перед каждым пере­ливанием не только цельной крови, но и эритроцитарной и тромбоцитарной массы.

Проба на водяной бане.

Последовательность действий:

1. На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки реципиента. Сыворотку крови реципиента получают центрифугированием или отстаиванием в пробирке в течение 1-2 часа;

2. К сыворотке, нанесенной на чашку Петри, добавляют каплю крови донора и тщательно пере­мешивают;

3. Чашку Петри помещают на водяную баню при Т +43-45°С на 10 минут;

4. По истечении 10 минут чашку Петри извлекают из водяной бани и просматривают на белом фоне при легком покачивании.

5. При наличии агглютинации - кровь несовместима и переливание ее не допустимо; при отсутствии агглютинации - кровь донора и реципиента совместима и ее можно переливать.

Определение совместимости крови по резус-фактору с 33% раствором