- •1. Тема: «Микроскопическая диагностика генитальных инфекций у женщин»
- •2. Практическое занятие для клинических ординаторов
- •3. Значение темы (актуальность изучаемой проблемы).
- •4. Цели обучения.
- •7. План проведения занятия:
- •Аннотация (краткое содержание темы).
- •Трихомониаз.
- •Взятие материала для исследования
- •Метод фазово-контрастной микроскопии
- •Нативная микроскопия.
- •Окрашивание по Романовскому-Гимза
- •Гонорея
- •Взятие материала для исследования
- •Окрашенные фиксированные препараты.
- •Хламидиоз
- •Окраска азур-эозиновой смесью (по Романовскому-Гимза)
- •Цитомегаловирусная инфекция (цмви
- •Вирусы герпеса
- •Вирусы папилломы человека - впч, Human papillomavirus - hpv
- •Л абораторная диагностика папилломавирусной инфекции
- •Амебиаз
- •9. Вопросы для самоподготовки курсантов.
- •Эталоны ответов
- •11. Ситуационные задачи по теме.
- •12. Рекомендации по учебно-исследовательской работе курсантов (темы рефератов):
- •13. Перечень практических умений.
- •14. Список литературы:
Нативная микроскопия.
М
етодика
исследования нативного препарата
заключается в том, что патологический
материал вносят в каплю теплого
изотонического раствора хлорида натрия
или раствора Рингера—Локка на предметном
стекле и эмульгируют. Взвесь накрывают
подогретым покровным стеклом, получая
препарат «раздавленная капля». С не
меньшим успехом можно использовать
препарат «висячая капля». Микроскопируют
немедленно после приготовления препарата.
Трихомонады овальной, грушевидной или круглой формы, величиной немного больше лейкоцита, хорошо видны жгутики и толчкообразные движения.
Метод фазово-контрастной микроскопии
Д
ает
возможность обнаруживать живых
малоконтрастных трихомонад в
неокрашенном виде. Паразиты различимы
даже тогда, когда совсем неподвижны.
Позволяет с предельной четкостью
различать не только движения, но и
структуру трихомонад: жгутики, ундулирующую
мембрану, аксостиль и др. Для окраски
нативных препаратов при фазово-контрастной
микроскопии иногда применяют 0,1% раствор
сафронина. При этой окраске трихомонады
сохраняют движения и лучше выделяются
среди форменных элементов.
Окрашенные фиксированные препараты.
1% метиленовым синим
0,5% бриллиантовым зеленым
Эозином и метиленовым синим
Основным фуксином
по Грамму
по Романовскому-Гимза
по Паппенгейму
по Папаниколау
по Пик-Якобсону
Перед окраской мазки фиксируют 96° этиловым спиртом, в течение 3 минут, высушивают.
Окраска метиленовым синим.
Окраску мазков 1% водным раствором метиленового синего производят в течение I минуты, мазок промывают в воде и высушивают.
На синем фоне трихомонады округлой, овальной, полигональной формы, четко просматривается оболочка, ядро расположено эксцентрично, интенсивно окрашено в синий цвет, цитоплазма сетчатая, светлосиняя, вакуоли бесцветные.
0краска фуксином основным
Окраску мазков 1% водным раствором основного фуксина производят в течение I минуты, мазок промывают в воде и высушивают.
На розовом фоне трихомонады округлой, овальной, полигональной формы, четко просматривается оболочка, ядро расположено эксцентрично, интенсивно окрашено в красно-фиолетовый цвет, цитоплазма сетчатая, розового цвета, вакуоли бесцветные.
0краска 1% раствором бриллиантового зеленого
Окраску мазков 1% спиртовым раствором бриллиантового зеленого производят в течение I минуты, мазок промывают в воде и высушивают.
На зеленом фоне трихомонады округлой, овальной, полигональной формы, четко просматривается оболочка, ядро расположено эксцентрично, интенсивно окрашено в зеленый цвет, цитоплазма сетчатая, бледно-зеленого цвета, вакуоли бесцветные.
Окраска по методу Грама.
Фиксированный, высушенный мазок покрывают полоской фильтровальной бумага, на которую наливают 1% раствор кристаллвиолета на I минуту.
Бумагу снимают, мазок промывают водопроводной водой.
Заливают раствором Люголя, который выдерживают несколько секунд до почернения мазка. Затем раствор Люголя сливают.
Мазок промывают водой и приступают к обесцвечиванию, которое проводят под контролем глаза, каждый раз погружая, вынимая и вновь погружая мазок в стакан с 96° этиловым спиртом; мазок обесцвечивают до тех пор, пока с более тонких участков перестанут стекать фиолетовые струйки спирта и участки мазка в этом месте станут бледно-серого цвета.
Препарат быстро и тщательно промывают водопроводной водой и докрашивают 1% водным раствором нейтрального красного в течение 3 минут, после чего его вновь промывают водопроводной водой и высушивают. 1% водным раствором сафранина докрашивают мазок в течение I минуты.
Трихомонады окрашиваются бледно: оболочка в виде тонкой полоски окружает сетчатую, оранжево-красного цвета цитоплазму; ядро сиреневого или фиолетового цвета, жгутики и ундулируюшая мембрана, как правило, не просматриваются, но иногда видны жгутики, окрашенные в розовый цвет.
