- •1. Тема: «Микроскопическая диагностика генитальных инфекций у женщин»
- •2. Практическое занятие для клинических ординаторов
- •3. Значение темы (актуальность изучаемой проблемы).
- •4. Цели обучения.
- •7. План проведения занятия:
- •Аннотация (краткое содержание темы).
- •Трихомониаз.
- •Взятие материала для исследования
- •Метод фазово-контрастной микроскопии
- •Нативная микроскопия.
- •Окрашивание по Романовскому-Гимза
- •Гонорея
- •Взятие материала для исследования
- •Окрашенные фиксированные препараты.
- •Хламидиоз
- •Окраска азур-эозиновой смесью (по Романовскому-Гимза)
- •Цитомегаловирусная инфекция (цмви
- •Вирусы герпеса
- •Вирусы папилломы человека - впч, Human papillomavirus - hpv
- •Л абораторная диагностика папилломавирусной инфекции
- •Амебиаз
- •9. Вопросы для самоподготовки курсантов.
- •Эталоны ответов
- •11. Ситуационные задачи по теме.
- •12. Рекомендации по учебно-исследовательской работе курсантов (темы рефератов):
- •13. Перечень практических умений.
- •14. Список литературы:
Окрашенные фиксированные препараты.
Перед окраской мазки фиксируют 96° этиловым спиртом, в течение 3 минут, высушивают. Фиксированный, высушенный мазок окрашивают по методу Грамма.
При исследовании мазков обнаруживают четко окрашенные в красный (желтовато-оранжевый) цвет диплококки, имеющие бобовидную форму и зеркальное отображение, расположенные обычно в шахматном порядке внутри нейтрофильных лейкоцитов и внеклеточно. Другой бактериальной флоры обычно нет. Характерно наличие большого количества лейкоцитов, слизи.
При хронической гонорее могут встречаться дегенеративные формы гонококков: микро- и макроформы, слабоокрашенные, округлые, шарообразные или в виде мелких точек.
Лабораторное заключение дается только при наличии типичных форм.
Хламидиоз
Хламидиоз - инфекционное заболевание в подавляющем большинстве случаев передаваемое половым путем. Наряду с ВИЧ-инфекцией и герпесом, хламидиоз относят к группе возбудителей второго поколения.
Одним из ключевых моментов при диагностике хламидиоза является правильное взятие материала, особенно при использовании цитологической диагностики.
Материалом для исследования на наличие C.trachomatis могут служить соскобы эпителия: уретры, цервикального канала, конъюктивы нижнего или верхнего века, задней стенки глотки, прямой кишки, вульвы.
По инструкции для диагностики хламидиоза у женщин в случае генитальной инфекции материал должен быть взят из цервикального канала, так как хламидии заселяют в основном цилиндрический и переходный эпителий и не обнаруживаются в плоском эпителии. Но, по данным ряда авторов, мазок со слизистой влагалища, имеющей эктодермальное происхождение, и состоящей из плоского эпителия, является не менее, а в некоторых случаях более информативным, чем соскоб из цервикального канала, и в то же время более щадящим (исключаются травмирование и возможный занос микроорганизмов в матку), что особенно важно при обследовании беременных женщин.
Полученный материал наносят тонким слоем на предметное стекло, многократно касаясь его поверхности кончиком зонда с биоматериалом и распределяя в виде круга на площади диаметром не более 8 мм (для иммунофлюоресцентного метода) или в виде полоски (для окрашивания по Романовскому-Гимзе).
Окраска азур-эозиновой смесью (по Романовскому-Гимза)
Микроскопическое исследование при хламидиозе (окраска по Романовскому – Гимза) не может заменить более чувствительных и специфичных (культурального, ПЦР-исследования), но может быть использовано как метод скрининга.
При хламидийной инфекции обнаруживаются вишнево-красные или фиолетовые включения, расположенные в бесцветных вакуолях цитоплазмы цилиндрического или метаплазированного плоского эпителия. Пораженные клетки обычно располагаются небольшими группами, ядро часто имеет вишневый оттенок, хроматин распределен причудливо, нагромождения чередуются с просветлениями, мембрана ядра складчатая.
Световая микроскопия в отличие от всех других методик дает количественную характеристику (процент инфицированных клеток и число включений — микроколоний на клетку) и дополнительную цитологическую картину мазка.
П
ри
световой микроскопии в инфицированной
клетке обнаруживается до 20 микроколоний
разного размера (1—5 мкм). Количество
микроколоний в разных клетках одного
и того же больного примерно одинаково,
но может меняться в зависимости от
стадии болезни, так же как и интенсивность
окраски микроколоний (при бессимптомных
формах течения болезни микроколонии
часто окрашиваются менее интенсивно,
чем при остром течении болезни), вплоть
до полного исчезновения окраски
после интенсивного лечения антибиотиками
(создается впечатление, что клетки
перфорированы: на фоне окрашенной
цитоплазмы видны светлые округлые
пятна). Как правило, чем больше процент
инфицированных клеток, тем больше
микроколоний обнаруживается в каждой
из них. При острых процессах (больные
из стационара) процент инфицированных
клеток может доходить в отдельных
случаях до 80, при хронических вялотекущих
процессах процент инфицированных клеток
низкий и в них может быть по 1—3
микроколонии.
