- •1. Основные этапы развития бактериологии, вирусологии и иммунологии. Л.Пастер, р.Кох, и.Мечников, д.Ивановский и другие корифеи мировой и отечественной науки.
- •2. Принципы современной классификации микробов. Понятие о виде, разновидности, биовариантах, серовариантах, фаговариантах.
- •3.Основные методы исследования морфологии бактерий. Микроскопия. Методы окраски микробов и их отдельных структур.
- •4. Морфология, ультраструктура и химический состав бактерий. Субклеточные формы бактерий: протопласты, сферопласты, l-формы бактерий.
- •5. Основные различия прокариот и эукариот, прокариот и вирусов.
- •6. Споры и капсулы. Методы их выявления.
- •7. Размножение бактерий. Скорость и фазы размножения в стандартных условиях. Понятие об м-концентрации.
- •8. Энергетический и конструктивный метаболизм бактерий.
- •9. Условия культивирования микробов. Требования к питательным средам. Классификация питательных сред.
- •4 Классификации
- •Микробные ферменты, их использование в культуральной и биохимической идентификации бактерий.
- •11. Понятие о чистой культуре микроба, штамме, клоне. Методы выделения чистых культур аэробных бактерий.
- •4 Способа выделения чистых культур аэробов
- •12. Выделение и культивирование строгих анаэробов и микроаэрофильных бактерий.
- •Среды для культивирования анаэробов
- •16. Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Умеренные фаги. Лизогения.
- •17. Генетический аппарат у бактерий. Изменчивость микроорганизмов. Формы изменчивости: генотипическая, фенотипическая.
- •18. Генетические рекомбинации: трансдукция, трансформация, конъюгация, транспозиция. Понятие о генной инженерии.
- •19. Нехромосомные (мигрирующие) генетические факторы у бактерий (плазмиды, транспозоны,бактериофаги).
- •Плазмиды (фрагменты днк)
- •21. Учение о микробном антагонизме. Антибиотики, их классификация и получение.
- •Классификация
- •По спектру
- •По происхождению
- •По механизму действия
- •22. Определение чувствительности микробов к антибиотикам. Понятие о миним альной ингибирующей концентрации (мик) и терапевтической дозе
- •23. Механизмы возникновения и распространения лекарственной устойчивости у бактерий. Осложнения при антибиотикотерапии.
8. Энергетический и конструктивный метаболизм бактерий.
Конструктивный метаболизм (пластический обмен)
Углеродные соединения. Для биосинтеза клеточных компонентов необходимы соответствующие низкомолекулярные соединения-предшественники. При наличии таких предшественников в окружающей среде они непосредственно вовлекаются в различные биосинтетические пути. Однако гораздо чаще бактериям приходится предварительно синтезировать большую часть молекул-предшественников из доступных исходных продуктов. Исходные продукты для биосинтеза образуются в ходе различных путей катаболизма, включая гликолиз, пентозофо-фатный путь, окисление пирувата и ЦТК. Автотрофы из CO2 синтезируют глюкозу. Гетеротрофы из углеродосодержащих соединений
Биосинтез аминокислот. Большинство свободно живущих бактерий способно синтезировать все необходимые им аминокислоты из пирувата, альфа-кетоглутарата, фумарата -> (аминирование имонами NH4)-> аланин, глютониновая к-та, аспортат -> (р-ции переаминирования)-> пролин, аргинин, лизин, треонин, метионин. (NB! Только аланин и глутамат образуются путем прямого аминирования).
Теоретически все 20 необходимых аминокислот могут находиться в окружающей среде и быть доступными для утилизации. Кроме того, бактерии способны получать аминокислоты из белковых молекул, расщепляя их бактериальными протеазами и пептидазами. Образующиеся при этом олигопептиды и аминокислоты транспортируются в клетку, где включаются в биосинтетические пути либо расщепляются на низкомолекулярные продукты. Паразитические бактерии потребляют готовые аминокислоты из организма хозяина.
Биосинтез липидов ацилпереносящие белки + ацильные фрагменты = получаются тиоэфиры. Последовательное удлинение приводит к образованию высших жирных кислот (16-18С)
Энергетический обмен.(катаболизм)
Базовый S для разложения в процессе дыхания или брожения- глю. Аэробы для этой цели нуждаются в свободном кислороде. Облигатные (строгие) аэробы не могут жить и размножаться в отсутствие молекулярного кислорода, поскольку они используют его в качестве акцептора электронов. Молекулы АТФ образуются ими при окислительном фосфорилировании с участием цитохромоксидаз, флавинзависимых оксидаз и дегидрогеназ. При этом, если конечным акцептором электронов является кислород, выделяются значительные количества энергии
Анаэробы получают энергию при отсутствии доступа кислорода путем ускоренного, но не полного расщепления питательных веществ. Облигатные анаэробы (столбняк,ботулизм) не переносят даже следов кислорода. Они могут образовывать АТФ в результате окисления углеводов, белков и липидов путем субстратного фосфорилирования до пирувата. При этом выделяется сравнительно небольшое количество энергии.
Существуют факультативные анаэробы, которые могут расти и размножаться как в присутствии кислорода воздуха, так и без него. Они образуют АТФ при окислительном и субстратном фосфорилировании.
9. Условия культивирования микробов. Требования к питательным средам. Классификация питательных сред.
Для стимуляции процессов роста и размножения аэробных микробов, а также сокращения сроков их выращивания используют метод глубинного культивирования, который заключается в непрерывном аэрировании и перемешивании питательной среды.
Для культивирования анаэробов применяют анаэростаты.Анаэробов выращивают на питательных средах, содержащих редуцирующие вещества уменьшающие окислительно-восстановительные потенциал.
Критерии идентификации чистой культуры:
Морфология и тинкториальные св-ва
Физиология: культуральные св-ва и бх
АГ
Патогенность для животных (биопроба)
Отношение к б/ф
Чувствительность к аб
Требования к средам:
оптимальное кол-во всех орг и неорг в-в и легкоусвояемой форме
оптимальное рН 7,2-7,4
изотоничность
стерильность
прозрачность
влажность
вязкость
условия после посева:
t мезофилы 37, психрофилы 22-30 (йерсинии), термофилы от40 (кампилобактер)
кислородные условия
время культивирования (зависит от периода генерации, т е 1 деления)
