11. Понятие о чистой культуре микроба, штамме, клоне. Методы выделения чистых культур аэробных бактерий.

Штамм- любой конкретный образец данного вида. Штаммы одного вида, различающиеся по антигенным характеристикам, называют сероварами, по чувствительности к специфическим фагам - фаговарами, биохимическим свойствам- хемоварами, по биологическим свойствам- биоварами.  Колония- видимая изолированная структура при размножении бактерий на плотных питательных средах, может развиваться из одной или нескольких родительских клеток. Если колония развилась из одной родительской клетки, то потомство называется клон.

  Культура- вся совокупность микроорганизмов одного вида, выросших на плотной или жидкой питательной среде.

 Чистой культурой микробов называют совокупность микроорганизмов одного вида, имеющие одинаковые морфологические, биохимические и культуральные свойства, выросшие на питательной среде.

 Выделение чистой культуры микробов является обязательным этапом всякого бактериологического исследования. Критерии  идентификации чистой культуры:

1. Морфология и тинкториальные св-ва

2. Физиология: культуральные св-ва и бх

3. АГ

4. Патогенность для животных (биопроба)

5. Отношение к б/ф

6. Чувствительность к аб

4 Способа выделения чистых культур аэробов

1. Механич разобщение при посеве

• Метод Дригальского : посев от больного

• Секторный от больного одной петлей на 4 сектора

• Серийные разведения по пастеру (в 1-1мл матреиала), затем пересев на чашки (по коху??)

2. Предварительная обработка материала до посева

• Мокроту при туберкулезе к-той и щелочью

• Кипячение материала до посева при выделении спор

• Фильтрация материала через бак фильтры

3. Создание режимов культивирования

• Элективные и дифференц среды

• T

4. Заражение лаб животных

12. Выделение и культивирование строгих анаэробов и микроаэрофильных бактерий.

 (физич метод-анаэростаты, хим – поглотители О2 ведерко Аристовского, эксикатор, мех- кипячение среды до посева,укол до дна пролбирки, метод фортнера).

Метод Цейсслера применяется для выделения чистых культур спорообразующих анаэробов. Для этого производят посев на среду Китт-Тароцци, прогревают 20 мин при 80 °C (для уничтожения вегетативной формы), заливают среду вазелиновым маслом и инкубируют 24 ч в термостате. Затем производят посев на сахарно-кровяной агар для получения чистых культур. После 24-часового культивирования интересующие колонии изучаются — их пересеивают на среду Китт-Тароцци (с последующим контролем чистоты выделенной культуры).

 Метод Фортнера — посевы производят на чашку Петри с утолщенным слоем среды, разделённым пополам узкой канавкой, вырезанной в агаре. Одну половину засевают культуру аэробных бактерий, на другую — анаэробных. Края чашки заливают парафином и инкубируют в термостате. Первоначально наблюдают рост аэробной микрофлоры, а затем (после поглощения кислорода) — рост аэробной резко прекращается и начинается рост анаэробной. 

Метод Вейнберга используется для получения чистых культур облигатных анаэробов. Культуры, выращенные на среде Китта-Тароцци, переносят в сахарный бульон. Затем одноразовой пастеровской пипеткой материал переносят в узкие пробирки с сахарным мясо-пептонным агаром, погружая пипетку до дна пробирки. Засеянные пробирки быстро охлаждают, что позволяет фиксировать бактериальный материал в толще затвердевшего агара. Пробирки инкубируют в термостате, а затем изучают выросшие колонии. При обнаружении интересующей колонии на её месте делают распил, материал быстро отбирают и засеивают на среду Китта-Тароцци (с последующим контролем чистоты выделенной культуры).