II.Тема: строение и свойства белков
Белки представляют собой высокомолекулярные полимерные органические соединения, построенные из α-аминокислот. Аминокислоты соединены меду собой пептидными связями (-СО-NН-), образуя полипептидные цепи. Пептидная связь формируется только за счет α–NH2 группы одной и COOH-группы другой аминокислоты у α -углеродного атома.
|
|
В белках различают первичную структуру (последовательность аминокислотных остатков, соединенных между собой при помощи пептидных связей), вторичную структуру (возникает за счет образования водородных связей между группами =N-H и O=C= данной полипептидной цепи, что приводит к расположению полипептидной цепи в виде спиральной или складчатой структуры), третичную структуру (возникает в результате взаимодействия между боковыми цепями аминокислотных остатков полипептидных цепей), четвертичную структуру (межмолекулярные взаимодействия между отдельными полипептидными цепями).
Лабораторная работа № 2. Качественные реакции
Для проведения качественной реакции к исследуемому веществу прибавляют реагент, способный взаимодействовать с определенной химической группой. Если исследуемое вещество содержит такую группу, происходит реакция, в результате которой наблюдается, либо изменение цвета, либо выпадение осадка, либо появление характерного запаха. В этом случае реакцию можно считать положительной и сделать вывод о наличии данной группы в составе исследуемого вещества. Если изменений не происходит (отрицательная реакция), то вещество не содержит искомой группы.
Качественные реакции на белки и аминокислоты
Присутствие белка в биологических жидкостях можно обнаружить с помощью качественных (цветных) реакций. Можно выделить универсальные цветные реакции (биуретовая, нингидриновая), которые дают вещества, содержащие не менее двух пептидных связей, и специфические реакции, которые обусловлены наличием только определенных аминокислот в молекуле белка (ксантопротеиновая, Миллона, Фоля и др.)
Биуретовая реакция на пептидные связи
Принцип метода: Группировки -СО-NН-, входящие в пептидную связь, в щелочной среде образуют комплексные соединения с ионами меди (Сu+2). Полученные соединения окрашены в фиолетовый цвет с красным или синим оттенком в зависимости от длины полипептидной цепи. Раствор белка дает сине-фиолетовое окрашивание, а продукты неполного его гидролиза – розовое или красное.
Реактивы:
1 % раствор яичного белка (белок куриного яйца фильтруют через марлю и разводят водой 1:10);
1 % раствор желатина;
10 % раствор NaOH;
1 % раствор CuSO4.
Ход работы. Берут 3 пробирки: в первую внося 5 капель 1 % раствора яичного белка, во вторую – 5 капель 1 % раствора желатина, в третью - 5 капель воды. Затем в каждую пробирку добавляют по 5 капель 10 % NaOH и по 2 капли 1 % CuSO4. Пробирки встряхивают. Наблюдают за изменением окраски.
Результат:
Первая пробирка: _____________________________________________________________
_____________________________________________________________________________Вторая пробирка: ______________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Третья пробирка: ______________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Вывод: ______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________