Ход работы.

Для подсчета количества лейкоцитов кровь следует развести жидкостью, которая устранила бы эритроциты. Разбавляющими жидкостями для подсчета являются гипотонические растворы, гемолизирующие эритроциты. Дистиллированная вода гемолизирует эритроциты. Добавляемая уксусная кислота просветляет протоплазму лейкоцитов, вследствие чего ядра хорошо видны. Добавление краски (генцианвиолета), окрашивающей ядра способствуют различию их формы.

Состав жидкости Тюрка для разбавления:

Ледяная уксусная кислота - 3см³, 1% водный раствор генцианвиолета - 3 см³, дистиллированная вода – 300 см³.

Разбавление крови с помощью смесителя

Для разбавления лейкоцитов применяется смеситель, разбавляющий не в 200 раз, а только в 20, поэтому в смесителях для лейкоцитов имеются метки: на капилляре цифры 0,5 и 1, выше расширения цифра 11 (рис. 19).

Набрать в смеситель кровь до метки 0,5 и жидкость Тюрка до метки 11. Перевести смеситель в горизонтальное положение, снять резиновую трубочку, задать оба конца пальцами и встряхивать 1,5 минуты.

Разбавление крови пробирочным методом

Разводят исследуемую кровь в 20 раз, для этого в сухую пробирку наливают 0,4 мл уксусной кислоты. Набирают 0,02 мл крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой или марлей, следя за тем, чтобы из пипетки кровь не вылилась.

Рис. 19. Смесители.

В - смеситель для эритроцитов, Г - смеситель для лейкоцитов.

Выдувают кровь из пипетки на дно пробирки, тщательно перемешивают (повторно набирая и выдувая смесь крови с уксусной кислотой). Маркируют пробирку и оставляют до мо­мента счета (допускается счет лейкоцитов не более чем через 2…4 ч после взятия крови).

Подсчет лейкоцитов

Заправить счетную камеру разбавленной жидкостью, как в предыдущем случае, при подсчете эритроцитов. Сосчитать лейкоциты на площади 100 больших квадратов, сумму умножить на 50, что будет соответствовать количеству лейкоцитов в 1 мм³ крови.

По международной системе измерения общую сумму лейкоцитов умножить на 10⁹, что будет соответствовать количеству лейкоцитов в одном литре крови. Пример: в 100 больших квадратах подсчитали 140 лейкоцитов, в 1 мм³ крови их будет 7000 (140 × 50), а в одном литре крови 7 × 10⁹ (СИ).

У здоровых лошадей, крупного и мелкого рогатого скота в крови содержится 6…10 Г/л лейкоцитов (Г = 10⁹; читают: гига на литр); у свиней лейкоцитов больше – 8…16, а у птиц – 20…40 Г/л.

Результат: Результаты анализа крови обычно записываются на бланках, в которых указываются все исследованные параметры.

Пример результата анализа крови

Параметры	Показатели
Эритроциты	4,5·1012 кл/л
Ретикулоциты	1 %
Гемоглобин	150 г/л
ЦП	1
Гематокрит	45 %
Лейкоциты	6·109 кл/л
Тромбоциты	250·109 /л

Вывод: Заключение по анализу крови.

Работа № 2. Анализ лейкоцитарной формулы.

Оборудование: микроскоп, иммерсионное масло.

Объект исследования: мазки крови окрашенные по Гимза - Романовскому.