Ход работы:

Исследование группы крови производите в цельной крови, забранной из пальца. На планшет в разные лунки индивидуальными пипетками нанесите растворы анти - А и анти - В по одной большой капле (0,1 мл). Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01– 0,03мл). Стеклянной палочной (разными концами в каждой лунке) смешайте кровь с реагентами.

За ходом реакции наблюдайте визуально при легком покачивании пластины в течение 3 минут. Результат реакции в лунках может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты наблюдаются в виде мелких красных агрегатов, быстро склеивающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

Интерпретация результатов реакции агглютинации

Результат реакции с раствором агглютинина		Принадлежность к исследуемой группе крови
анти-А	анти-В
-	-	0 (I)
+	-	A (II)
-	+	B (III)
+	+	AB (IV)

Примечание. «+» - наличие агглютинации, « – » – отсутствие агглютинации.

Рекомендации по оформлению протокола работы

Интерпретируйте результаты реакции агглютинации в соответствии с таблицей.

Работа № 2. Определение резус-фактора.

Определение резус - принадлежности заключается в выявлении в эритроцитах крови человека наличия или отсутствия особого белка (антигена), названного резус-фактором.

Выделяют три разновидности резус - антигена: D, С, Е. Наибольшей активностью обладает антиген D, поэтому именно его определение имеет важное значение. Группы крови, в которых содержится антиген Rh(D), условно принято считать резус-положительными (Rh⁺), а группы крови, не содержащие антигена Rh(D) - резус-отрицательными (Rh^-).

Метод определения резус - принадлежности – резус-фактора (Rh-фактора) крови человека – основан на смешивании капли крови с раствором, содержащим антитела против резус - антигена (D).

В качестве таких растворов служат моноклональные анти - D антитела или поликлональная иммунная антирезусная сыворотка.

Цель: ознакомиться с методиками определения резус-фактора.

Оборудование: спирт, йод, вата, стерильный скарификатор, эмалированные пластинки с лунками, стеклянные палочки, стандартные сыворотки для определения резус - фактора.

Объект исследования: кровь.

Ход работы

Исследование группы крови производите в цельной крови, забранной из пальца. В лунку эмалированного планшета внесите большую каплю (0,1мл) реагента – раствора с антирезусными антителами. Рядом поместите маленькую каплю исследуемой крови (0,01– 0,03мл). Стеклянной палочкой кровь смешайте с реагентом.

В течение 3 мин наблюдайте за ходом реакции визуально при легком покачивании пластины. Результат реакции в лунках может быть либо положительным, либо отрицательным.

Рекомендации по оформлению протокола работы.

Сделайте вывод, исходя из того, что положительный результат выражается в агглютинации (делается вывод о наличии в крови испытуемого резус-фактора, то есть резус - положительности). При отрицательном результате

агглютинация отсутствует (делается вывод об отсутствии в крови испытуемого резус-фактора).