- •Введение
- •Химическая природа белка
- •1.1 Лабораторная работа 1. Биуретовая реакция
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Контрольные вопросы
- •1.2 Лабораторная работа 2. Нингидриновая реакция на α-аминокислоты
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Контрольные вопросы
- •1.5 Лабораторная работа 5. Ксантопротеиновая реакция
- •2 Приборы и материалы
- •3 Порядок проведения работы
- •1.3 Лабораторная работа 3. Реакция на первичную аминогруппу
- •1.4 Лабораторная работа 4. Реакция на тирозин (Миллона)
- •4 Контрольные вопросы
- •1.6 Лабораторная работа 6. Реакция на гистидин (Паули)
- •2 Приборы и материалы
- •3 Порядок проведения работы
- •4 Контрольные вопросы
- •1.7 Лабораторная работа 7. Реакция Фоля на серосодержащие аминокислоты
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Контрольные вопросы
- •1.8 Лабораторная работа 8. Реакция на триптофан
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Контрольные вопросы
- •1.9 Лабораторная работа 9. Реакция на аргинин (Сакагучи)
- •1.10 Лабораторная работа 10. Хроматографический метод определения аминокислот
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Оформление результатов работы
- •5 Контрольные вопросы
- •1.11 Лабораторная работа 11. Количественное определение белка по биуретовой реакции
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •3.2 Определение количества белка
- •4 Оформление результатов работы
- •Физико-химические свойства белков
- •2.1 Лабораторная работа 12. Осаждение белков солями щелочных и щелочноземельных металлов
- •2.2 Лабораторная работа 13. Осаждение белков органическими растворителями
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Контрольные вопросы
- •2.3 Лабораторная работа 14. Осаждение белков солями тяжелых металлов
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Контрольные вопросы
- •2.4 Лабораторная работа 15. Осаждение белков минеральными кислотами
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Контрольные вопросы
- •2.5 Лабораторная работа 16. Осаждение белков органическими кислотами
- •2.6 Лабораторная работа 17. Осаждение белков при нагревании
- •2.7 Лабораторная работа 18. Количественное определение белка в культуральной жидкости
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Оформление результатов работы
- •5 Контрольные вопросы
- •2.8 Лабораторная работа 19. Высаливание белков
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Оформление результатов работы
- •5 Контрольные вопросы
- •3 Сложные белки
- •3.1 Лабораторная работа 20. Гидролиз нуклеопротеидов дрожжей
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание работы
- •4 Оформление результатов работы
- •5 Контрольные вопросы
- •3.2 Лабораторная работа 21. Бензидиновая проба на геминовую группировку гемоглобина
- •3.3 Лабораторная работа 22. Выделение гликопротеида из слюны
- •2 Приборы и материалы
- •3 Описание метода
- •3.4 Лабораторная работа 23. Нафтоловая проба на углеводную группировку гликопротеида (реакция Подобедова—Молиша)
- •Литература
- •Лабораторный практикум по химии белка
4 Контрольные вопросы
Что выявляет данная реакция?
Какие циклические аминокислоты вам известны?
1.6 Лабораторная работа 6. Реакция на гистидин (Паули)
При взаимодействии кислого раствора сульфаниловой кислоты с нитритом натрия осуществляется реакция диазотировапия и образуется диазобензолсульфоновая кислота:
сульфаниловая п-сульфобензол
кислота диазоний
Последний, взаимодействуя с гистидином, дает соединение вишнево-красного цвета:
гистидин
2,5-бис-п-сульфобензолазогистидин
1 Цель работы – провести качественную реакцию на гистидин
2 Приборы и материалы
Сульфаниловая кислота 1 %
Соляная кислота 5 %
Нитрит натрия 0,5 %
Гистидин 0,01 %
Белок 1 %
Гидролизат белка
Карбонат натрия 10 %
3 Порядок проведения работы
В три пробирки наливают по 1 мл 1 % раствора сульфаниловой кислоты в 5 % растворе соляной кислоты. Затем приливают по 2 мл 0,5 % нитрита натрия, сильно встряхивают и немедленно приливают в 1-ю пробирку 2 мл 0,01 % раствора гистидина, во 2-ю – 2 мл 1 % раствора белка, в 3-ю – 2 мл гидролизата белка.
После перемешивания содержимого в пробирках сразу приливают по 6 мл 10 % раствора соды (карбонат натрия). Развивается интенсивная вишнево-красная окраска.
4 Контрольные вопросы
Какую аминокислоту выявляет реакция Паули?
В чем состоит принцип метода?
1.7 Лабораторная работа 7. Реакция Фоля на серосодержащие аминокислоты
Сера в цистеине содержится в виде SН-групп, легко отщепляющихся при нагревании со щелочами в виде сероводорода. Сероводород со свинцом дает PbS – осадок черного цвета. Серосодержащих аминокислот особенно много в керотинах (белки волос, ногтей и т. п.):
Цистеин Серин
Плюмбит Черный осадок
1 Цель работы – провести качественную реакцию на серосодержащие аминокислоты
2 Приборы и материалы
Водяная баня
Электроплитка
Волос
Гидроксид натрия 10 %
Уксуснокислый свинец
3 Описание работы
В пробирку поместить свернутый волос (лучше светлый). Налить 10 капель 10% гидроксида натрия и 5 капель раствора уксуснокислого свинца. Пробирку нагреть на водяной бане в течение минуты. За это время волос утолщится и покроется черным налетом. По прошествии длительного времени волос растворяется, а на дне пробирки скапливается черный осадок.
4 Контрольные вопросы
Наличие какой функциональной группы в молекуле белка обеспечивает протекание реакции Фоля?
Какие серосодержащие аминокислоты Вы знаете?
Назовите источники серосодержащих аминокислот?
1.8 Лабораторная работа 8. Реакция на триптофан
Триптофан, реагируя в кислой среде с альдегидами, образует окрашенные продукты конденсаций. Например, с глиоксиловой кислотой, которая является примесью к концентрированной уксусной кислоте, реакция протекает по уравнению:
1 Цель работы – провести качественную реакцию на триптофан
