- •Бийский технологический институт (филиал)
- •Содержание
- •Введение
- •Цели и задачи лабораторных работ
- •Методика проведения лабораторных работ
- •Часть 1. Аминокислоты и белки
- •1.1 Характеристика методов качественного и количественного
- •1.2.1 Качественные цветные реакции на аминокислоты
- •1.2.1.1 Нингидриновая реакция
- •1.2.1.2 Реакция Фоля на «слабосвязанную» серу цистеина
- •Экспериментальная часть
- •1.2 Качественные реакции на аминокислоты и белки
- •1.2.1.3 Биуретовая реакция на пептидные связи
- •1.2.1.4 Ксантопротеиновая реакция
- •1.2.2 Цветные реакции на белки
- •1.2.2.1 Биуретовая реакция на обнаружение пептидных связей
- •1.2.2.2 Цветные реакции с белками на обнаружение
- •1.2.2.3 Цветные реакции с белками на обнаружение
- •1.2.3 Обсуждение результатов работы
- •1.3 Количественная и качественная оценки белков пищевых
- •1.3.1 Определение общего количества белка методом формольного титрования
- •1.3.2 Определение общего количества белка на рефрактометре ирф-464
- •1.3.3 Расчёт биологической ценности белков пищевых продуктов
- •1.3.4 Обсуждение результатов работы
- •Контрольные вопросы к части 1
- •Часть 2. Углеводы
- •2.1 Характеристика методов определения углеводов
- •2.1.1 Определение простейших сахаров
- •2.1.2 Определение полисахаридов (крахмала и декстринов)
- •2.1.3 Определение содержания сахаров
- •2.1.4 Определение пищевых волокон
- •2.2 Качественные реакции на углеводы
- •2.2.1 Качественные реакции моносахаридов
- •2.2.1.1 Реакция Троммера
- •2.2.1.2 Реакция Фелинга
- •2.2.1.3 Реакция Барфеда (реакция с уксуснокислой медью)
- •2.2.1.4 Реакция Селиванова на кетозы
- •2.2.2 Качественные реакции дисахаридов
- •2.2.2.1 Восстанавливающая способность лактозы и мальтозы
- •2.2.2.2 Определение восстанавливающей способности у сахарозы и гидролиз сахарозы
- •2.2.3 Качественные реакции полисахаридов
- •2.2.3.1 Реакция крахмала и гликогена с йодом
- •2.2.3.2 Гидролиз крахмала
- •2.2.3.3 Гидролиз целлюлозы
- •2.2.4 Обсуждение результатов работы
- •Контрольные вопросы к части 2
- •Часть 3. Липиды
- •3.1 Методы определения свойств липидов и их основных констант (чисел)
- •3.2 Определение основных свойств и констант жиров
- •3.2.1 Растворимость липидов и образование эмульсии
- •3.2.2 Омыление жира
- •3.2.3 Образование свободных жирных кислот
- •3.2.4 Образование нерастворимых кальциевых мыл
- •3.2.5 Определение числа омыления
- •3.2.6 Определение кислотного числа жира
- •3.2.7 Определение эфирного числа жира
- •3.2.8 Определение йодного числа жира
- •3.2.9 Обсуждение результатов работы
- •Контрольные вопросы к части 3
- •Часть 4. Витамины
- •4.1 Характеристика методов определения витаминов
- •Экспериментальная часть
- •4.2 Качественные реакции на витамины
- •4.2.1 Водорастворимые витамины
- •4.2.1.1 Реакции на витамин в1 (тиамин)
- •4.2.1.2 Реакция восстановления витамина в2 (рибофлавина)
- •4.2.1.3 Реакция на витамин рр (антипеллагрический, в5)
- •4.2.1.4 Реакция на пиридоксин (витамин в6)
- •4.2.1.5 Реакции на витамин р (рутин) (цитрин, витамин
- •4.2.1.6 Реакции на витамин с (аскорбиновая кислота)
- •4.2.2 Жирорастворимые витамины
- •4.2.2.1 Реакции на витамин а (реакция Друммонда)
- •4.2.2.2 Реакция на витамин е (а-токоферол)
- •4.2.3 Обсуждение результатов работы
- •Контрольные вопросы к части 4
- •Часть 5. Влага в пищевых продуктах
- •5.1 Характеристика методов определения свободной
- •Экспериментальная часть
- •5.2 Изучение состава и свойств воды, её виды и формы связи
- •5.2.1 Определение массовой доли влаги и сухого вещества
- •5.2.1.1 Определение содержания влаги и сухого вещества
- •5.2.1.2 Определение влаги (сухого вещества) в продуктах
- •5.2.2 Определение активной кислотности (рН) сыра
- •5.2.3 Определение расчётным путём доли связанной воды
- •5.2.4 Характеристика связанной воды через долю сухих
- •5.2.5 Анализ форм и видов связи влаги в твёрдых сырах
- •5.2.6 Обсуждение результатов работы
- •Контрольные вопросы к части 5
- •Часть 6. Минеральные вещества
- •6.1 Характеристика методов определения минеральных
- •Контрольные вопросы к части 6
- •ТехниКа безопасности при работе в лаборатории
- •Требования к оформлению отчёта по лабораторным работам
- •Тестовые задания
- •Приложение а Структура -аминокислот
- •Приложение б
- •151000 «Технологические машины и оборудование
- •Пищевая химия
- •260204 «Технология бродильных производств и виноделие», 260601 «Машины и аппараты пищевых производств», 240706 «Автоматизированное производство химических предприятий» и бакалавров направлений
- •260100 «Продукты питания из растительного сырья»,
4.2.2 Жирорастворимые витамины
4.2.2.1 Реакции на витамин а (реакция Друммонда)
Принцип реакции: витамин А в бензольном растворе с концентрированной серной кислотой образует комплекс, окрашенный в синий цвет.
Материалы и реактивы: хлороформный раствор трихлоруксусной сурьмы (33%-ный ), хлороформ, 0,05%-ный масляный раствор витамина А в хлороформе или раствор рыбьего жира в хлороформе в соотношении 1:5, концентрированная серная кислота, ледяная уксусная кислота, насыщенная сульфатом железа (II).
Оборудование: штатив с пробирками, капельницы.
Порядок выполнения работы: в пробирку к 2–3 каплям раствора витамина А прибавляют 23 капли концентрированной серной кислоты.
Содержимое пробирки окрашивается в синий цвет, который через некоторое время переходит в фиолетовый и бурый.
4.2.2.2 Реакция на витамин е (а-токоферол)
Принцип реакции: при взаимодействии с хлорным железом (III) (FeCl3) а-токоферол окисляется до а-токоферилхинона – соединения, окрашенного в красный цвет.
а-токоферол

а-токоферилхинон
Материалы и реактивы: 0,1%-ный спиртовый раствор α-токоферола, 1%-ный раствор хлорного железа (III).
Оборудование: штатив с пробирками, капельницы, пипетки.
Порядок выполнения работы: в сухую пробирку вносят 0,5 см3 спиртового раствора а-токоферола, затем 0,5 см3 раствора FeCl3 и тщательно перемешивают содержимое пробирки.
Наблюдают появление красного окрашивания.
4.2.3 Обсуждение результатов работы
Результаты наблюдений оформить по типу таблицы 9. Сделать вывод о содержании витаминов в исследуемых продуктах.
Таблица 9 – Содержание витаминов в составе различных продуктов питания
|
Наименование объекта исследования |
Водорастворимые витамины |
Жирорастворимые витамины | ||||||
|
В1 |
В2 |
РР |
В6 |
Р |
С |
А |
Е | |
|
Сок |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Масло растительное |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Рыбий жир |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Молоко |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Витаминный комплекс |
|
|
|
|
|
|
|
|
Контрольные вопросы к части 4
Приведите классификацию витаминов, дайте определение этой группе химических соединений.
Какую физиологическую роль выполняют витамины в организме человека?
Витамины, их значение для организма человека. Причины гиповитаминозов и авитаминозов.
Назовите водорастворимые витамины.
Назовите жирорастворимые витамины.
Дайте характеристику отдельных витаминов. В каких продуктах они присутствуют в максимальном количестве?
Приведите примеры витаминоподобных веществ.
Что понимается под витаминизацией пищи?
Часть 5. Влага в пищевых продуктах
5.1 Характеристика методов определения свободной
и связанной влаги в пищевых продуктах
Наличие воды, особенности её распределения и связи с другими компонентами продукта особенно важны для характеристики структуры и сроков хранения пищевых продуктов.
В соответствии с существующими ныне классификационными системами различают свободную и связанную воду. Свободная вода является непрерывной средой, в которой растворены другие компоненты пищи: органические кислоты, минеральные вещества, сахара, ароматические вещества. Как растворитель свободная вода участвует во всех биохимических, микробиологических процессах и химических реакциях. Это один из важных факторов активности воды, влияющих на порчу пищевых продуктов. В то же время количество свободной воды можно уменьшить или полностью удалить высушиванием, замораживанием или сгущением. Свободная вода в первую очередь способна к замерзанию, а затем могут замерзать все остальные виды влаги в порядке убывания энергии связи.
В соответствии с классификацией Ребиндера П.А., связанная вода – это вода, имеющая связь с сухим веществом продукта. Она по форме связи с компонентами и по мере убывания её энергии согласно этой же классификации делится на три группы: химической, физико-химической и механической связи. Различия существуют в форме и энергии связи (прочности). Влага, химически связанная, входит в состав сухих веществ. Например, в молочных продуктах это вода кристаллогидратов молочного сахара (С12Н22О11·Н2О). Она обладает наибольшей энергией связи, очень прочна, разрушается с большим трудом и только при высоких температурах (125…130 °С).
В сущности, когда говорят о связанной воде, то имеют в виду физико-химическую наиболее или наименее прочно удерживаемую влагу. Она образуется в результате притяжения диполей воды полярными группами молекул белков. При адсорбировании воды диполи располагаются слоями вокруг гидрофильных групп молекулы белка, образуя гидратную (водную) оболочку. Первый слой оболочки (мономолекулярный) связан с белком наиболее прочно, последующий (диффузный) слой – с меньшей энергией связи. Связанная вода первого слоя – влага мономолекулярной адсорбции, вода остальных слоев – влага полимолекулярной адсорбции. В результате вокруг белковых частиц образуются гидратные оболочки, препятствующие их соединению. Аналогичные оболочки создаются и вокруг жировых шариков.
Поскольку молоко – это биологическая жидкость, то основным её компонентом является вода (86…89 %). По данным Давидова Р.Б., количество связанной воды в цельном молоке 3,5 %, которая распределена таким образом, что 84 % её связано с белками. Как таковое содержание связанной влаги относительно постоянно в пищевых продуктах, оно пропорционально концентрации растворённых веществ. Особую роль играет связанная вода (мономолекулярная и полимолекулярная адсорбция) в стабильности белковых систем.
Физико-химически связанной воде присущи важные особенности, которыми она отличается от свободной воды: не замерзает при низких температурах (минус 40 °С), не растворяет сахар и соли, не удаляется из продукта при высушивании и, что особенно важно для сохранности продукта, недоступна микроорганизмам, т.е. не служит средой, активизирующей химические процессы. Влажность продукта, равная содержанию влаги моно- и полимолекулярной адсорбции, обеспечивает и должную сохранность продукта.
Для высококонцентрированных белковых продуктов (сыры, творог), обладающих высокими водосвязывающими свойствами, характерно высокое содержание связанной воды и более энергоёмких форм связи – моно- и полимолекулярной адсорбции. Поэтому эти продукты рекомендуют выбирать как объекты замораживания и дальнейшего низкотемпературного хранения. Особенности структуры этих продуктов (макро- и микрозерна, прослойки, микропустоты) обусловливают присутствие другой, малоэнергоёмкой (непрочной) влаги физико-химической связи. Она, как дисперсионная среда, заполняет макро- и микрокапилляры, грубые поры, а также удерживается поверхностью продукта. Наименее прочная вода механической связи обладает свойствами свободной. Эта влага кристаллизуется в первую очередь. Для сыров характерно отсутствие самой малоэнергетической формы связи – поверхностной влаги. Характер связи влаги с компонентами сыра объясняется его весьма сложной структурой. Количество влаги по видам связи (таблица 10) находится в подвижном равновесии, зависящем от рН.
Фазовые превращения воды в лёд являются очень важными явлениями при замораживании продуктов и происходят при достижении ими криоскопической точки (температуре начала кристаллообразования). Криоскопические температуры находятся в прямой связи с концентрацией растворённых веществ (соль, лактоза, минеральные вещества). Для цельного молока криоскопическая температура составляет минус 0,5 °С, а для сыров – от минус 4,5 до минус 10 °C. Вода, превратившаяся в лед, является вымороженной, а её доля увеличивается с понижением температуры.
Таблица 10 – Содержание различных видов влаги и формы связи её
в сырах и твороге (по Табачникову В.П. и Алексееву Н.Г.)
|
Формы связи влаги с сухими веществами |
Виды влаги |
Массовая доля влаги, % | |||||
|
Сыр «Российский» |
Сыр «Голландский» |
Творог жирный | |||||
|
абсолют. |
относит. |
абсолют. |
относит. |
абсолют. |
относит. | ||
|
Физико-химическая связь |
Влага моно- и поли-молекулярной адсорбции |
8,4 |
21,4 |
6,8 |
18 |
8 |
13,7 |
|
Физико- механическая связь |
Влага микро-капилляров |
12,4 |
31,4 |
11,8 |
31 |
16,4 |
25,2 |
|
Влага макро-капилляров и грубых пор |
18,6 |
47,2 |
18,6 |
51 |
25,4 |
39 | |
|
Влага смачивания или поверхностная влага |
- |
- |
- |
- |
14,6 |
22,1 | |
|
Содержание влаги в продукте: |
39,4 |
100 |
37,2 |
100 |
65,2 |
100 | |
На пищевых предприятиях обычно контролируется только массовая доля влаги в объекте, независимо от формы её связи, то есть влажность. Выражается этот показатель в процентах или в долях единицы.
При определении влажности чаще всего используются термогравиметрические и рефрактометрические методы.
Термогравиметрический метод (метод сушки) основан на удалении влаги из исследуемого материала (навеску взвешивают до сушки и после получения сухого остатка) и определении убыли в массе, которая условно принимается за влагу.
К термогравиметрическим методам относятся: метод высушивания до постоянной массы, ускоренные методы на электроплитках и экспресс-методы высушивания на приборе ВНИИХП-ВЧ (Чижовой).
Рефрактометрическое определение влажности основано на непосредственном определении сухих веществ в самом объекте или его растворе по показателю преломления, измеряемому с помощью рефрактометра. Влажность в этом случае рассчитывается по разности единицы массы анализируемого вещества и доли в ней сухих веществ. Рефрактометрические методы просты и удобны при пользовании ими. Они незаменимы при необходимости быстрого проведения анализа. Например, при выработке сгущённого молока с сахаром готовность смеси перед фасовкой определяется с помощью рефрактометра.
Для определения свободной и связанной воды в пищевых продуктах используют следующие методы:
метод дифференциальной сканирующей калориметрии;
термогравиметрический метод измерения скорости высушивания в контролируемых условиях;
метод ядерно-магнитного резонанса.
